Kultivace embryí pod konstantní 5% vs. gradient 8%, 5%, 2% koncentrace kyslíku
Vliv konstantní 5% versus gradient 8%, 5%, 2% koncentrace kyslíku na vývoj sourozeneckých lidských embryí in vitro
Přehled studie
Postavení
Detailní popis
Několik studií ukázalo, že embryonální morfologické parametry se zlepšily, když se koncentrace kyslíku v kultuře embryí snížila z 20 % na 5 %. Embrya raných savců se vyvíjela rychleji, měla kratší buněčné cykly, vyšší rychlost tvorby blastocyst a lepší integritu vnitřní buněčné hmoty (ICM) ve srovnání s embryi kultivovanými při 20% koncentraci kyslíku.
Nedávné studie ukázaly, že koncentrace kyslíku v ženském reprodukčním traktu není statická. Ve vejcovodech vyšších savců se pohybuje kolem 8 %, zatímco v děloze je v době implantace embrya koncentrace kyslíku téměř anoxická (2 %).
Napodobování takových fyziologických podmínek, které lépe odrážejí prostředí in vivo v lidském reprodukčním traktu, je cílem technologie asistované reprodukce (ART).
Cílem této studie je posoudit, zda změna statického 5% kyslíku během pěti dnů kultivace embryí in vitro na gradient kyslíku, počínaje 8% od 0. dne do 3. dne, pokračující s 5% v den 3. a po 2% kyslíku od konce 3. do 5. dne lépe odráží podmínky nalezené v lidském reprodukčním traktu a zlepšuje vývojové charakteristiky embrya.
Typ studie
Zápis (Aktuální)
Fáze
- Nelze použít
Kontakty a umístění
Studijní místa
-
-
-
Maribor, Slovinsko, 2000
- University Medical Centre Maribor
-
-
Kritéria účasti
Kritéria způsobilosti
Věk způsobilý ke studiu
- Dospělý
Přijímá zdravé dobrovolníky
Popis
Kritéria pro zařazení:
- Věk žen mezi 18 a 35 lety.
- Index tělesné hmotnosti (BMI) mezi 18 a 30 kg/m².
- Pouze pacienti s procedurou ICSI (mužský faktor neplodnosti, s výjimkou azoospermie) a kultivací blastocysty.
- Pacienti z prvního a druhého pokusu cyklu ICSI.
- Cykly antagonisty hormonu uvolňujícího gonadotropin (GnRH).
Kritéria vyloučení:
- Přítomnost endometriózy.
- Předchozí klinická intervence na vaječnících.
- Související endokrinní nebo metabolická onemocnění.
- Přítomnost syndromu polycystických vaječníků.
Studijní plán
Jak je studie koncipována?
Detaily designu
- Primární účel: Jiný
- Přidělení: Randomizované
- Intervenční model: Paralelní přiřazení
- Maskování: Singl
Zbraně a zásahy
Skupina účastníků / Arm |
Intervence / Léčba |
|---|---|
|
Experimentální: 8-5-2% koncentrace kyslíkového gradientu v inkubátoru
Fyziologická koncentrace kyslíkového gradientu v inkubátoru (8-5-2 % O2).
|
Po odběru oocytů a inseminaci bude polovina embryí dané pacientky náhodně alokována do inkubátoru s gradientem tenze kyslíku (8-5-2 %).
Embrya zůstanou v inkubátoru až do jejich vývojového hodnocení v den 5.
|
|
Žádný zásah: Ovládání (bez zásahu)
Libovolné kultivační podmínky (statické 5% 02).
|
Co je měření studie?
Primární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Podíl inseminovaných oocytů vyvinutých na morfologicky optimální blastocysty v den 5
Časové okno: Embrya budou anotována 5. den po inseminaci (v 8:00).
|
Primárním výsledkem bude podíl oocytů, které se budou vyvíjet na morfologicky optimální blastocysty den 5, skóroval 4-5AA podle Gardnerových kritérií.
Podle bodovacího systému Gardnera se parametry morfologie blastocyst, jako je stupeň expanze blastocoel (1-5), bude měřen morfologický vzhled vnitřní buněčné hmoty (ICM) (A, B, C) a soudržnost trofektodermu (A, B, C).
|
Embrya budou anotována 5. den po inseminaci (v 8:00).
|
Sekundární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Měřené časy od inseminace do různých embryonálních fází dosažených
Časové okno: Morfokinetické načasování bylo zaznamenáno nepřetržitě (každých 5 minut) během embryové kultury, až 124 hodin (5. den) po inseminaci.
|
Pomocí časosběrného softwaru byla vývojová videa embryí přezkoumána ručním rozvojem rámce obrázků po rámu. Morfokinetické načasování bylo zaznamenáno nepřetržitě (každých 5 minut) během embryové kultury, až 124 hodin (5. den) po inseminaci. Pro každé klinicky použité embryo byly zaznamenány následující vývojové milníky, které dosáhlo stadiu blastocyst (kryokonzervované nebo přenesené): TPNA - vzhled jednotlivých pronuklei T2 - Čas do 2 -buněčného stádia T3 - čas do 3 -buněčného stádia T4 - Čas do fáze 4 -buněk T5 - čas do 5 -buněčného stádia T6 - čas do stupně 6 buněk T7 - Čas do fáze 7 -buněk T8 - Čas do fáze 8 buněk TSC - první důkaz zhutnění TM - Dokončení procesu zhutnění (Stage Morula) TSB - Iniciace blastulace TB - Full Blastocyst (poslední snímky před Zona Pellucida začne ztenčit) TEB - Iniciace expanze Blastocyst (první snímky ukazující ztenčení Zona) |
Morfokinetické načasování bylo zaznamenáno nepřetržitě (každých 5 minut) během embryové kultury, až 124 hodin (5. den) po inseminaci.
|
|
Měření plochy povrchové plochy Blastocyst a vnitřní buňky v den 5
Časové okno: Opravte čas (116 hodin) Po inseminaci
|
Měření povrchu blastocyst a hmoty vnitřní buněk (ICM) budou zaznamenány na časosběrných fotografiích 116 hodin po inseminaci.
Povrchy budou měřeny ve čtvercových mikrometrech pomocí nástroje pro měření softwaru Primo Vision.
Elipsa bude generována kolem vnějšího okraje trofektodermu nebo hmotnosti vnitřní buňky.
Tato měření vyloučí Zona Pellucida.
Měření budou prováděna v zaostřovací rovině s největší povrchovou plochou.
|
Opravte čas (116 hodin) Po inseminaci
|
|
Počet trofektodermových buněk v den 5
Časové okno: Opravte čas (116 hodin) po inseminaci.
|
Po 116 hodinách po inseminaci se počet buněk trofektodermu počítá pomocí časosběrných fotografií.
Snímky budou zaměřeny na nejvzdálenější hranu trofektodermu, aby bylo možné lépe určit hranice každé jednotlivé buňky.
|
Opravte čas (116 hodin) po inseminaci.
|
|
Výskyt atypických embryí
Časové okno: Nepřetržitě (obrázek bude pořízen každých 5 minut) během 5 dnů kultury embryí.
|
Časosnisná videa pro každé embryo budou přezkoumána z hlediska atypických funkcí štěpení, jako například; Pseudofurrows, přímé štěpení, reverzní štěpení, multinukleace, nepravidelné chaotické dělení, vyloučení buněk a kolaps blastocyst pomocí softwaru primo vision ručním předáním rámce obrázků podle rámu.
Bude zaznamenána frekvence abnormálních vzorů štěpení.
|
Nepřetržitě (obrázek bude pořízen každých 5 minut) během 5 dnů kultury embryí.
|
Spolupracovníci a vyšetřovatelé
Termíny studijních záznamů
Hlavní termíny studia
Začátek studia (Aktuální)
Primární dokončení (Aktuální)
Dokončení studie (Aktuální)
Termíny zápisu do studia
První předloženo
První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality
První zveřejněno (Aktuální)
Aktualizace studijních záznamů
Poslední zveřejněná aktualizace (Aktuální)
Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality
Naposledy ověřeno
Více informací
Termíny související s touto studií
Další identifikační čísla studie
- 0120-405/2021/4
- P3-0327 (Jiné číslo grantu/financování: Slovenian Research Agency)
Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty
Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA
Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA
Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .