一定 5% 対 グラジエント 8%、5%、2% 酸素濃度での胚培養
一定の 5% 対 8%、5%、2% の酸素濃度勾配が in vitro での兄弟ヒト胚の発育に及ぼす影響
調査の概要
詳細な説明
いくつかの研究では、胚培養中の酸素濃度が 20% から 5% に減少すると、胚の形態学的パラメーターが改善されることが示されています。 哺乳類の初期胚は、酸素濃度 20% で培養した胚と比較して、発育が速く、細胞周期が短く、胚盤胞形成率が高く、内部細胞塊 (ICM) の完全性が良好でした。
最近の研究では、女性の生殖管内の酸素濃度は一定ではないことが示されています。 高等哺乳類の卵管では酸素濃度は約 8% ですが、子宮内では胚の着床時の酸素濃度はほぼ無酸素状態 (2%) です。
人間の生殖管における生体内環境をよりよく反映するこのような生理学的条件を模倣することが、生殖補助医療 (ART) の目標です。
この研究の目的は、5 日間の in vitro 胚培養中の 5% の静的な酸素を、0 日目から 3 日目まで 8% から始めて 3 日目に 5% と続ける酸素の勾配に変更するかどうかを評価することです。 3 日目の終わりから 5 日目まで 2% の酸素を供給すると、ヒトの生殖管内で見られる状態がよりよく反映され、胚の発育特性が改善されます。
研究の種類
入学 (実際)
段階
- 適用できない
連絡先と場所
研究場所
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Maribor、スロベニア、2000
- University Medical Centre Maribor
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参加基準
適格基準
就学可能な年齢
- 大人
健康ボランティアの受け入れ
説明
包含基準:
- 18歳から35歳までの女性の年齢。
- 体格指数 (BMI) が 18 ～ 30 kg/m² の間。
- 顕微授精（無精子症を除く男性不妊原因）および胚盤胞培養を受けた患者のみ。
- 1 回目と 2 回目の ICSI サイクル試行の患者。
- 性腺刺激ホルモン放出ホルモン (GnRH) アンタゴニスト サイクル。
除外基準:
- 子宮内膜症の存在。
- 卵巣に対する以前の臨床介入。
- 関連する内分泌疾患または代謝疾患。
- 多嚢胞性卵巣症候群の存在。
研究計画
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
- 主な目的：他の
- 割り当て：ランダム化
- 介入モデル：並列代入
- マスキング：独身
武器と介入
参加者グループ / アーム |
介入・治療 |
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実験的：インキュベーター内の酸素濃度勾配 8-5-2%
保育器内の生理学的酸素濃度勾配 (8-5-2% O2)。
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採卵と授精後、特定の患者の胚の半分が酸素分圧勾配（8-5-2%）に設定された保育器内にランダムに割り当てられます。
胚は5日目の発育評価まで保育器内に置かれます。
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介入なし：制御（介入なし）
任意の培養条件 (静的 5% 02)。
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この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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5日目に形態学的に最適な胚盤胞に対して発生した授精卵母細胞の割合
時間枠：胚は、授精後5日目（午前8時）に注釈が付けられます。
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主な結果尺度は、Gardnerの基準に従って4-5AAを採点した形態学的に最適なDay-5胚盤胞に発達する卵母細胞の割合です。
ガードナーのスコアリングシステムによれば、胚盤胞拡張の程度（1-5）、内細胞質量（ICM）（a、b、c）の形態学的外観、および栄養層筋（te）（a、b、c）の凝集性などの胚盤胞の形態パラメーターが測定されます。
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胚は、授精後5日目（午前8時）に注釈が付けられます。
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二次結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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授精からさまざまな胚段階までの測定時間が到達しました
時間枠：モルホキネティックタイミングは、胚培養全体で継続的に（5分ごとに）記録され、発達後124時間（5日目）まで記録されました。
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タイムラプスソフトウェアを使用して、胚開発ビデオをフレームごとに画像を手動で進めてレビューしました。 モルホキネティックタイミングは、胚培養全体で継続的に（5分ごとに）記録され、発達後124時間（5日目）まで記録されました。 以下の発達のマイルストーンは、胚盤胞段階に到達した臨床的に使用された胚ごとに記録されました（凍結保存または転送）： TPNA-個々のプロヌクレイの外観 T2- 2セルステージまでの時間 T3- 3セルステージまでの時間 T4- 4セルステージまでの時間 T5- 5セルステージまでの時間 T6- 6セルステージまでの時間 T7- 7セルステージまでの時間 T8- 8セルステージまでの時間 TSC-圧縮の最初の証拠 TM-圧縮プロセスの完了（モルラステージ） TSB-爆発の開始 TB-完全な胚盤胞（Zona Pellucidaが薄くなり始める前の最後のフレーム） TEB-胚盤胞拡張の開始（Zona薄化を示す最初のフレーム） |
モルホキネティックタイミングは、胚培養全体で継続的に（5分ごとに）記録され、発達後124時間（5日目）まで記録されました。
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5日目の胚盤胞および内細胞質量（ICM）表面積測定
時間枠：授精後の時間（116時間）を修正します
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胚盤胞および内部細胞質量（ICM）の表面測定は、授精後116時間でタイムラプス写真に記録されます。
表面は、Primo Visionソフトウェアの測定ツールを使用して、平方マイクロメートルで測定されます。
楕円は、栄養皮皮の外端または内部細胞質量の周りに生成されます。
これらの測定では、Zona Pellucidaが除外されます。
測定値は、最大の表面積を持つフォーカスプレーンで行われます。
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授精後の時間（116時間）を修正します
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5日目の栄養皮細胞細胞の数
時間枠：授精後の時間（116時間）を修正します。
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授精後116時間で、タイムラプス写真を使用して栄養骨細胞の数がカウントされます。
画像は、各セルの境界をより適切に決定するために、栄養層の最外端に焦点を合わせます。
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授精後の時間（116時間）を修正します。
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非定型胚切断の発生率
時間枠：5日間の胚培養の間、継続的に（5分ごとに写真が撮影されます）。
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各胚のタイムラプスビデオは、次のような非定型切断機能についてレビューされます。 Primo Visionソフトウェアを使用して、フレームごとに画像を手動で転送することにより、Primo Visionソフトウェアを使用して、Pseudofurols、直接切断、逆切断、多核形成、不規則なカオス分割、細胞除外、胚盤胞崩壊を使用します。
異常な切断パターンの頻度が記録されます。
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5日間の胚培養の間、継続的に（5分ごとに写真が撮影されます）。
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協力者と研究者
研究記録日
主要日程の研究
研究開始 (実際)
一次修了 (実際)
研究の完了 (実際)
試験登録日
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (実際)
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
詳しくは
本研究に関する用語
キーワード
その他の研究ID番号
- 0120-405/2021/4
- P3-0327 (その他の助成金/資金番号：Slovenian Research Agency)
医薬品およびデバイス情報、研究文書
米国FDA規制医薬品の研究
米国FDA規制機器製品の研究
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