一定 5% 対 グラジエント 8%、5%、2% 酸素濃度での胚培養
2023年6月9日 更新者：Borut Kovačič、University Medical Centre Maribor
一定の 5% 対 8%、5%、2% の酸素濃度勾配が in vitro での兄弟ヒト胚の発育に及ぼす影響
この研究の目的は、2 つの異なる酸素濃度下での in vitro ヒト胚の発生を調査することです。 5日間の培養中ずっと静的5%、または酸素勾配下で、0日目から3日目まで8%で開始し、3日目に5%で継続し、その日の終わりから2%の酸素を続ける- 3日目から5日目まで。
調査の概要
詳細な説明
いくつかの研究では、胚培養中の酸素濃度が 20% から 5% に減少すると、胚の形態学的パラメーターが改善されることが示されています。 哺乳類の初期胚は、酸素濃度 20% で培養した胚と比較して、発育が速く、細胞周期が短く、胚盤胞形成率が高く、内部細胞塊 (ICM) の完全性が良好でした。
最近の研究では、女性の生殖管内の酸素濃度は一定ではないことが示されています。 高等哺乳類の卵管では酸素濃度は約 8% ですが、子宮内では胚の着床時の酸素濃度はほぼ無酸素状態 (2%) です。
人間の生殖管における生体内環境をよりよく反映するこのような生理学的条件を模倣することが、生殖補助医療 (ART) の目標です。
この研究の目的は、5 日間の in vitro 胚培養中の 5% の静的な酸素を、0 日目から 3 日目まで 8% から始めて 3 日目に 5% と続ける酸素の勾配に変更するかどうかを評価することです。 3 日目の終わりから 5 日目まで 2% の酸素を供給すると、ヒトの生殖管内で見られる状態がよりよく反映され、胚の発育特性が改善されます。
研究の種類
介入
入学 (実際)
44
段階
- 適用できない
連絡先と場所
このセクションには、調査を実施する担当者の連絡先の詳細と、この調査が実施されている場所に関する情報が記載されています。
研究場所
-
-
-
Maribor、スロベニア、2000
- University Medical Centre Maribor
-
-
参加基準
研究者は、適格基準と呼ばれる特定の説明に適合する人を探します。これらの基準のいくつかの例は、人の一般的な健康状態または以前の治療です。
適格基準
就学可能な年齢
- 大人
健康ボランティアの受け入れ
はい
説明
包含基準:
- 18歳から35歳までの女性の年齢。
- 体格指数 (BMI) が 18 ～ 30 kg/m² の間。
- 顕微授精（無精子症を除く男性不妊原因）および胚盤胞培養を受けた患者のみ。
- 1 回目と 2 回目の ICSI サイクル試行の患者。
- 性腺刺激ホルモン放出ホルモン (GnRH) アンタゴニスト サイクル。
除外基準:
- 子宮内膜症の存在。
- 卵巣に対する以前の臨床介入。
- 関連する内分泌疾患または代謝疾患。
- 多嚢胞性卵巣症候群の存在。
研究計画
このセクションでは、研究がどのように設計され、研究が何を測定しているかなど、研究計画の詳細を提供します。
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
- 主な目的：他の
- 割り当て：ランダム化
- 介入モデル：並列代入
- マスキング：独身
武器と介入
参加者グループ / アーム |
介入・治療 |
|---|---|
|
実験的：インキュベーター内の酸素濃度勾配 8-5-2%
保育器内の生理学的酸素濃度勾配 (8-5-2% O2)。
|
採卵と授精後、特定の患者の胚の半分が酸素分圧勾配（8-5-2%）に設定された保育器内にランダムに割り当てられます。
胚は5日目の発育評価まで保育器内に置かれます。
|
|
介入なし：制御（介入なし）
任意の培養条件 (静的 5% 02)。
|
この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
|---|---|---|
|
5日目に形態学的に最適な胚盤胞まで発育した授精卵母細胞の割合
時間枠：受精後 5 日目 (午前 8:00) に胚に注釈が付けられます。
|
主要評価項目は、形態学的に最適な 5 日目の胚盤胞まで発育する卵母細胞の割合であり、ガードナー基準に従って 4 ～ 5AA とスコア付けされます。
Gardner のスコアリング システムによれば、胚盤胞の拡大の程度 (1 ～ 5)、内部細胞塊 (ICM) の形態学的外観 (A、B、C)、栄養外胚葉の粘着性 (TE) などの胚盤胞の形態パラメーター（A、B、C）を測定します。
|
受精後 5 日目 (午前 8:00) に胚に注釈が付けられます。
|
二次結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
|---|---|---|
|
授精からさまざまな胚段階に達するまでの測定時間
時間枠：: 形態運動のタイミングは、5 日間の胚培養中に継続的に記録されます (5 分ごとに写真が撮影されます)。
|
タイムラプス ソフトウェアを使用すると、手動で画像をフレームごとに進めてビデオを直接確認できます。
したがって、次のような形態運動学的タイミング: t2 - 2 細胞期までの時間、t3 - 3 細胞期までの時間、t4 - 4 細胞期までの時間、t5 - 5 細胞期までの時間、t6 - 6 細胞期までの時間、t7 - 7細胞期までの時間、t8 - 8細胞期までの時間、tSC - 圧縮開始までの時間、tM - 桑実胚完了までの時間、tSB - 胞芽形成開始までの時間、tEB - 拡大開始までの時間、tB - 胚盤胞が完成するまでの時間は、各胚について記録されます。
|
: 形態運動のタイミングは、5 日間の胚培養中に継続的に記録されます (5 分ごとに写真が撮影されます)。
|
|
5日目の胚盤胞および内部細胞塊（ICM）の表面積測定
時間枠：受精後の固定時間（116時間）
|
胚盤胞と内部細胞塊 (ICM) の表面測定値は、授精後 116 時間のタイムラプス写真に記録されます。
表面は、Primo ビジョン ソフトウェアの測定ツールを使用して平方マイクロメートル単位で測定されます。
栄養外胚葉の外縁または内部細胞塊の周囲に楕円が生成されます。
これらの測定では透明帯は除外されます。
測定は、最大の表面積を持つ焦点面で行われます。
|
受精後の固定時間（116時間）
|
|
5日目の栄養外胚葉細胞の数
時間枠：受精後の固定時間（116時間）。
|
授精後 116 時間で、微速度撮影写真を使用して栄養外胚葉細胞の数をカウントします。
画像は栄養外胚葉の最外縁に焦点を合わせて、個々の細胞の境界をより正確に決定します。
|
受精後の固定時間（116時間）。
|
|
異型胚割の発生率
時間枠：5 日間の胚培養の間、継続的に (5 分ごとに写真が撮影されます)。
|
各胚の微速度撮影ビデオは、次のような非典型的な卵割の特徴について検査されます。 Primo ビジョン ソフトウェアを使用して画像をフレームごとに手動で転送することにより、偽溝、直接卵割、逆卵割、多核形成、不規則なカオス分裂、細胞排除および胚盤胞崩壊を行います。
異常な切断パターンの頻度が記録されます。
|
5 日間の胚培養の間、継続的に (5 分ごとに写真が撮影されます)。
|
協力者と研究者
ここでは、この調査に関係する人々や組織を見つけることができます。
研究記録日
これらの日付は、ClinicalTrials.gov への研究記録と要約結果の提出の進捗状況を追跡します。研究記録と報告された結果は、国立医学図書館 (NLM) によって審査され、公開 Web サイトに掲載される前に、特定の品質管理基準を満たしていることが確認されます。
主要日程の研究
研究開始 (実際)
2022年1月1日
一次修了 (実際)
2023年1月1日
研究の完了 (実際)
2023年1月1日
試験登録日
最初に提出
2023年4月26日
QC基準を満たした最初の提出物
2023年6月9日
最初の投稿 (実際)
2023年6月12日
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
2023年6月12日
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
2023年6月9日
最終確認日
2023年5月1日
詳しくは
本研究に関する用語
キーワード
その他の研究ID番号
- 0120-405/2021/4
- P3-0327 (その他の助成金/資金番号：Slovenian Research Agency)
医薬品およびデバイス情報、研究文書
米国FDA規制医薬品の研究
いいえ
米国FDA規制機器製品の研究
いいえ
この情報は、Web サイト clinicaltrials.gov から変更なしで直接取得したものです。研究の詳細を変更、削除、または更新するリクエストがある場合は、register@clinicaltrials.gov。 までご連絡ください。 clinicaltrials.gov に変更が加えられるとすぐに、ウェブサイトでも自動的に更新されます。