Coltura di embrioni sotto costante 5% rispetto a gradiente 8%, 5%, 2% di concentrazione di ossigeno
L'effetto della concentrazione di ossigeno costante del 5% rispetto al gradiente 8%, 5%, 2% sullo sviluppo di embrioni umani fratelli in vitro
Panoramica dello studio
Stato
Intervento / Trattamento
Descrizione dettagliata
Diversi studi hanno dimostrato che i parametri morfologici embrionali migliorano quando la concentrazione di ossigeno nella coltura embrionale viene ridotta dal 20% al 5%. Gli embrioni dei primi mammiferi si sviluppavano più velocemente, avevano cicli cellulari più brevi, un tasso di formazione di blastocisti più elevato e una migliore integrità della massa cellulare interna (ICM) rispetto agli embrioni coltivati al 20% di concentrazione di ossigeno.
Recenti studi hanno dimostrato che la concentrazione di ossigeno nel tratto riproduttivo femminile non è statica. Nelle tube di Falloppio dei mammiferi superiori è intorno all'8%, mentre nell'utero, al momento dell'impianto dell'embrione, la concentrazione di ossigeno è quasi anossica (2%).
Imitare tali condizioni fisiologiche che riflettono meglio l'ambiente in vivo nel tratto riproduttivo umano è l'obiettivo della tecnologia di riproduzione assistita (ART).
Lo scopo di questo studio è valutare se cambiare l'ossigeno statico del 5% durante cinque giorni di coltura embrionale in vitro al gradiente di ossigeno, iniziando con l'8% dal giorno 0 al giorno 3, continuando con il 5% il giorno 3 e successivamente con il 2% di ossigeno dalla fine del giorno-3 al giorno-5, riflette meglio le condizioni riscontrate all'interno del tratto riproduttivo umano e migliora le caratteristiche di sviluppo dell'embrione.
Tipo di studio
Iscrizione (Effettivo)
Fase
- Non applicabile
Contatti e Sedi
Luoghi di studio
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Maribor, Slovenia, 2000
- University Medical Centre Maribor
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Criteri di partecipazione
Criteri di ammissibilità
Età idonea allo studio
- Adulto
Accetta volontari sani
Descrizione
Criterio di inclusione:
- Età delle donne tra i 18 ei 35 anni.
- Indice di massa corporea (BMI) tra 18 e 30 kg/m².
- Solo pazienti con procedura ICSI (fattore maschile di infertilità, esclusa azoospermia) e coltura di blastocisti.
- Pazienti del primo e secondo tentativo di ciclo ICSI.
- Cicli antagonisti dell'ormone di rilascio dell'ormone della gonadotropina (GnRH).
Criteri di esclusione:
- Presenza di endometriosi.
- Precedente intervento clinico sulle ovaie.
- Malattie endocrine o metaboliche connesse.
- Presenza di sindrome dell'ovaio policistico.
Piano di studio
Come è strutturato lo studio?
Dettagli di progettazione
- Scopo principale: Altro
- Assegnazione: Randomizzato
- Modello interventistico: Assegnazione parallela
- Mascheramento: Separare
Armi e interventi
Gruppo di partecipanti / Arm |
Intervento / Trattamento |
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Sperimentale: Gradiente di ossigeno all'8-5-2% nell'incubatrice
Una concentrazione fisiologica di gradiente di ossigeno nell'incubatore (8-5-2% O2).
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Dopo il prelievo degli ovociti e l'inseminazione, la metà degli embrioni di un dato paziente verrà allocata in modo casuale in un'incubatrice impostata su un gradiente di tensione di ossigeno (8-5-2%).
Gli embrioni rimarranno nell'incubatrice fino alla loro valutazione dello sviluppo il giorno 5.
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Nessun intervento: Controllo (nessun intervento)
Condizioni di coltivazione arbitrarie (statico 5% 02).
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Cosa sta misurando lo studio?
Misure di risultato primarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
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Proporzione di ovociti inseminati sviluppati per le blastocisti morfologicamente ottimali il giorno 5
Lasso di tempo: Gli embrioni saranno annotati il 5 ° giorno dopo l'inseminazione (alle 8:00).
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L'outcome primario sarà la proporzione di ovociti che si svilupperà per le blastocisti morfologicamente ottimali di Day-5, segnato 4-5AA secondo i criteri di Gardner.
Secondo il sistema di punteggio di Gardner, i parametri morfologici di Blastocisti come il grado di espansione di blastocoel (1-5), l'aspetto morfologico della massa cellulare interna (ICM) (A, B, C) e la coesione del trofectoderma (TE) (A, B, C) saranno misurati.
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Gli embrioni saranno annotati il 5 ° giorno dopo l'inseminazione (alle 8:00).
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Misure di risultato secondarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
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Tempi misurati dall'inseminazione a diverse fasi embrionali raggiunte
Lasso di tempo: I tempi morfocinetici sono stati registrati continuamente (ogni 5 minuti) in tutta la cultura dell'embrione, fino a 124 ore (giorno 5) dopo l'inseminazione.
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Utilizzando il software time-lapse, i video di sviluppo dell'embrione sono stati rivisti avanzando manualmente il frame delle immagini per fotogramma. I tempi morfocinetici sono stati registrati continuamente (ogni 5 minuti) in tutta la cultura dell'embrione, fino a 124 ore (giorno 5) dopo l'inseminazione. Sono state registrate le seguenti pietre miliari dello sviluppo per ogni embrione usato clinicamente che ha raggiunto la fase di blastocisti (crioconservata o trasferita): TPNA - Aspetto dei singoli pronuclei T2 - Time to 2 -Cell Stage T3 - Time to 3 -Cell Stage T4 - Time to 4 -Cell Stage T5 - Time to 5 -Cell Stage T6 - Time to 6 -Cell Stage T7 - Time to 7 -Cell Stage T8 - Time to 8 -Cell Stage TSC - Prima prova della compattazione TM - Completamento del processo di compattazione (Morula Stage) TSB - Iniziazione della blastico TB - Blastocisti completa (ultimo fotogramma prima che Zona Pellucida inizi a assottigliarsi) TEB - Iniziazione dell'espansione della blastocisti (primo fotogramma che mostra il diradamento della zona) |
I tempi morfocinetici sono stati registrati continuamente (ogni 5 minuti) in tutta la cultura dell'embrione, fino a 124 ore (giorno 5) dopo l'inseminazione.
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Misurazione della superficie della massa di massa cellulare di blastocisti e di massa interna (ICM) il giorno 5
Lasso di tempo: Correggi il tempo (116 ore) post inseminazione
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Le misurazioni superficiali di blastocisti e massa cellulare interna (ICM) saranno registrate su foto time-lapse a 116 ore dopo l'inseminazione.
Le superfici verranno misurate in micrometri quadrati utilizzando lo strumento di misurazione del software Primo Vision.
Un'ellisse verrà generata attorno al bordo esterno del trofettoderma o alla massa cellulare interna.
Queste misurazioni escluderanno la zona pellucida.
Le misurazioni saranno prese sul piano di messa a fuoco con la più grande superficie.
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Correggi il tempo (116 ore) post inseminazione
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Numero di cellule trofectodermiche il giorno 5
Lasso di tempo: Riparare il tempo (116 ore) dopo l'inseminazione.
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A 116 ore dopo l'inseminazione, il numero di cellule trofectodermiche verrà conteggiato usando foto time-lapse.
Le immagini saranno focalizzate sul bordo più esterno del trofettoderma per determinare meglio i confini di ogni singola cella.
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Riparare il tempo (116 ore) dopo l'inseminazione.
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Incidenza di scissioni di embrioni atipici
Lasso di tempo: Continua (una foto verrà scattata ogni 5 minuti) durante 5 giorni di cultura dell'embrione.
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I video time-lapse per ogni embrione saranno rivisti per funzionalità di scissione atipica, come ad esempio; Pseudo -Furrows, scissione diretta, scissione inversa, multinucleazione, divisione caotica irregolare, esclusione cellulare e collasso di blastocisti, usando il software Primo Vision inoltrando manualmente il frame delle immagini per frame.
Verrà registrata la frequenza dei modelli di scissione anormale.
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Continua (una foto verrà scattata ogni 5 minuti) durante 5 giorni di cultura dell'embrione.
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Collaboratori e investigatori
Studiare le date dei record
Studia le date principali
Inizio studio (Effettivo)
Completamento primario (Effettivo)
Completamento dello studio (Effettivo)
Date di iscrizione allo studio
Primo inviato
Primo inviato che soddisfa i criteri di controllo qualità
Primo Inserito (Effettivo)
Aggiornamenti dei record di studio
Ultimo aggiornamento pubblicato (Effettivo)
Ultimo aggiornamento inviato che soddisfa i criteri QC
Ultimo verificato
Maggiori informazioni
Termini relativi a questo studio
Altri numeri di identificazione dello studio
- 0120-405/2021/4
- P3-0327 (Altro numero di sovvenzione/finanziamento: Slovenian Research Agency)
Informazioni su farmaci e dispositivi, documenti di studio
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Studia un dispositivo regolamentato dalla FDA degli Stati Uniti
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