Coltura di embrioni sotto costante 5% rispetto a gradiente 8%, 5%, 2% di concentrazione di ossigeno
9 giugno 2023 aggiornato da: Borut Kovačič, University Medical Centre Maribor
L'effetto della concentrazione di ossigeno costante del 5% rispetto al gradiente 8%, 5%, 2% sullo sviluppo di embrioni umani fratelli in vitro
Lo scopo di questo studio è quello di indagare lo sviluppo di embrioni umani in vitro sotto due diverse concentrazioni di ossigeno; un 5% statico durante tutti e cinque i giorni di coltura o sotto un gradiente di ossigeno, iniziando con l'8% dal giorno 0 al giorno 3, continuando con il 5% il giorno 3 e seguendo con il 2% di ossigeno dalla fine della giornata- 3 al giorno-5.
Panoramica dello studio
Stato
Completato
Intervento / Trattamento
Descrizione dettagliata
Diversi studi hanno dimostrato che i parametri morfologici embrionali migliorano quando la concentrazione di ossigeno nella coltura embrionale viene ridotta dal 20% al 5%. Gli embrioni dei primi mammiferi si sviluppavano più velocemente, avevano cicli cellulari più brevi, un tasso di formazione di blastocisti più elevato e una migliore integrità della massa cellulare interna (ICM) rispetto agli embrioni coltivati al 20% di concentrazione di ossigeno.
Recenti studi hanno dimostrato che la concentrazione di ossigeno nel tratto riproduttivo femminile non è statica. Nelle tube di Falloppio dei mammiferi superiori è intorno all'8%, mentre nell'utero, al momento dell'impianto dell'embrione, la concentrazione di ossigeno è quasi anossica (2%).
Imitare tali condizioni fisiologiche che riflettono meglio l'ambiente in vivo nel tratto riproduttivo umano è l'obiettivo della tecnologia di riproduzione assistita (ART).
Lo scopo di questo studio è valutare se cambiare l'ossigeno statico del 5% durante cinque giorni di coltura embrionale in vitro al gradiente di ossigeno, iniziando con l'8% dal giorno 0 al giorno 3, continuando con il 5% il giorno 3 e successivamente con il 2% di ossigeno dalla fine del giorno-3 al giorno-5, riflette meglio le condizioni riscontrate all'interno del tratto riproduttivo umano e migliora le caratteristiche di sviluppo dell'embrione.
Tipo di studio
Interventistico
Iscrizione (Effettivo)
44
Fase
- Non applicabile
Contatti e Sedi
Questa sezione fornisce i recapiti di coloro che conducono lo studio e informazioni su dove viene condotto lo studio.
Luoghi di studio
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Maribor, Slovenia, 2000
- University Medical Centre Maribor
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Criteri di partecipazione
I ricercatori cercano persone che corrispondano a una certa descrizione, chiamata criteri di ammissibilità. Alcuni esempi di questi criteri sono le condizioni generali di salute di una persona o trattamenti precedenti.
Criteri di ammissibilità
Età idonea allo studio
- Adulto
Accetta volontari sani
Sì
Descrizione
Criterio di inclusione:
- Età delle donne tra i 18 ei 35 anni.
- Indice di massa corporea (BMI) tra 18 e 30 kg/m².
- Solo pazienti con procedura ICSI (fattore maschile di infertilità, esclusa azoospermia) e coltura di blastocisti.
- Pazienti del primo e secondo tentativo di ciclo ICSI.
- Cicli antagonisti dell'ormone di rilascio dell'ormone della gonadotropina (GnRH).
Criteri di esclusione:
- Presenza di endometriosi.
- Precedente intervento clinico sulle ovaie.
- Malattie endocrine o metaboliche connesse.
- Presenza di sindrome dell'ovaio policistico.
Piano di studio
Questa sezione fornisce i dettagli del piano di studio, compreso il modo in cui lo studio è progettato e ciò che lo studio sta misurando.
Come è strutturato lo studio?
Dettagli di progettazione
- Scopo principale: Altro
- Assegnazione: Randomizzato
- Modello interventistico: Assegnazione parallela
- Mascheramento: Separare
Armi e interventi
Gruppo di partecipanti / Arm |
Intervento / Trattamento |
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Sperimentale: Gradiente di ossigeno all'8-5-2% nell'incubatrice
Una concentrazione fisiologica di gradiente di ossigeno nell'incubatore (8-5-2% O2).
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Dopo il prelievo degli ovociti e l'inseminazione, la metà degli embrioni di un dato paziente verrà allocata in modo casuale in un'incubatrice impostata su un gradiente di tensione di ossigeno (8-5-2%).
Gli embrioni rimarranno nell'incubatrice fino alla loro valutazione dello sviluppo il giorno 5.
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Nessun intervento: Controllo (nessun intervento)
Condizioni di coltivazione arbitrarie (statico 5% 02).
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Cosa sta misurando lo studio?
Misure di risultato primarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
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Proporzione di ovociti inseminati sviluppati rispetto alle blastocisti morfologicamente ottimali il giorno 5
Lasso di tempo: Gli embrioni saranno annotati il giorno 5 dopo l'inseminazione (alle 8:00).
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La misura dell'esito primario sarà la proporzione di ovociti che si svilupperanno in blastocisti morfologicamente ottimali al giorno 5, valutati 4-5AA secondo i criteri di Gardner.
Secondo il sistema di punteggio di Gardner, i parametri morfologici della blastocisti come il grado di espansione del blastocele (1-5), l'aspetto morfologico della massa cellulare interna (ICM) (A, B, C) e la coesione del trofectoderma (TE) (A, B, C) saranno misurati.
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Gli embrioni saranno annotati il giorno 5 dopo l'inseminazione (alle 8:00).
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Misure di risultato secondarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
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Tempi misurati dall'inseminazione ai diversi stadi embrionali raggiunti
Lasso di tempo: : I tempi morfocinetici verranno registrati continuamente (verrà scattata una foto ogni 5 minuti) durante 5 giorni di coltura dell'embrione.
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Utilizzando il software time-lapse, i video verranno rivisti direttamente facendo avanzare manualmente le immagini fotogramma per fotogramma.
Quindi tempi morfocinetici come: t2 - tempo allo stadio a 2 celle, t3 - tempo allo stadio a 3 celle, t4 - tempo allo stadio a 4 celle, t5 - tempo allo stadio a 5 celle, t6 - tempo allo stadio a 6 celle , t7 - tempo allo stadio a 7 celle, t8 - tempo allo stadio a 8 celle, tSC - tempo all'inizio della compattazione, tM - tempo al completamento della morula, tSB - tempo all'inizio della blastulazione, tEB - tempo all'inizio dell'espansione , tB - tempo alla blastocisti completa, sarà registrato per ciascun embrione.
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: I tempi morfocinetici verranno registrati continuamente (verrà scattata una foto ogni 5 minuti) durante 5 giorni di coltura dell'embrione.
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Misurazione della superficie della blastocisti e della massa cellulare interna (ICM) il giorno 5
Lasso di tempo: Tempo fisso (116 ore) dopo l'inseminazione
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Le misurazioni superficiali delle blastocisti e della massa cellulare interna (ICM) saranno registrate su foto time-lapse a 116 ore dopo l'inseminazione.
Le superfici saranno misurate in micrometri quadrati utilizzando lo strumento di misurazione del software Primo vision.
Verrà generata un'ellisse attorno al bordo esterno del trofectoderma o alla massa cellulare interna.
Queste misurazioni escluderanno la zona pellucida.
Le misurazioni verranno effettuate sul piano focale con la superficie maggiore.
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Tempo fisso (116 ore) dopo l'inseminazione
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Numero di cellule del trofectoderma al giorno 5
Lasso di tempo: Tempo fisso (116 ore) dopo l'inseminazione.
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A 116 ore dall'inseminazione, il numero di cellule del trofectoderma verrà contato utilizzando foto time-lapse.
Le immagini saranno focalizzate sul bordo più esterno del trofectoderma per determinare meglio i confini di ogni singola cellula.
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Tempo fisso (116 ore) dopo l'inseminazione.
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Incidenza di scissioni embrionali atipiche
Lasso di tempo: Continuamente (verrà scattata una foto ogni 5 minuti) durante 5 giorni di coltura dell'embrione.
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I video time-lapse per ciascun embrione verranno esaminati per caratteristiche di scissione atipiche, come; pseudosolchi, scissione diretta, scissione inversa, multinucleazione, divisione caotica irregolare, esclusione cellulare e collasso di blastocisti, utilizzando il software Primo vision inviando manualmente le immagini fotogramma per fotogramma.
Verrà registrata la frequenza dei modelli di clivaggio anomali.
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Continuamente (verrà scattata una foto ogni 5 minuti) durante 5 giorni di coltura dell'embrione.
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Collaboratori e investigatori
Qui è dove troverai le persone e le organizzazioni coinvolte in questo studio.
Studiare le date dei record
Queste date tengono traccia dell'avanzamento della registrazione dello studio e dell'invio dei risultati di sintesi a ClinicalTrials.gov. I record degli studi e i risultati riportati vengono esaminati dalla National Library of Medicine (NLM) per assicurarsi che soddisfino specifici standard di controllo della qualità prima di essere pubblicati sul sito Web pubblico.
Studia le date principali
Inizio studio (Effettivo)
1 gennaio 2022
Completamento primario (Effettivo)
1 gennaio 2023
Completamento dello studio (Effettivo)
1 gennaio 2023
Date di iscrizione allo studio
Primo inviato
26 aprile 2023
Primo inviato che soddisfa i criteri di controllo qualità
9 giugno 2023
Primo Inserito (Effettivo)
12 giugno 2023
Aggiornamenti dei record di studio
Ultimo aggiornamento pubblicato (Effettivo)
12 giugno 2023
Ultimo aggiornamento inviato che soddisfa i criteri QC
9 giugno 2023
Ultimo verificato
1 maggio 2023
Maggiori informazioni
Termini relativi a questo studio
Altri numeri di identificazione dello studio
- 0120-405/2021/4
- P3-0327 (Altro numero di sovvenzione/finanziamento: Slovenian Research Agency)
Informazioni su farmaci e dispositivi, documenti di studio
Studia un prodotto farmaceutico regolamentato dalla FDA degli Stati Uniti
No
Studia un dispositivo regolamentato dalla FDA degli Stati Uniti
No
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