Kultura zarodka przy stałym 5% vs gradient 8%, 5%, 2% stężenia tlenu
Wpływ stałego 5% w porównaniu z gradientem 8%, 5%, 2% stężenia tlenu na rozwój ludzkich zarodków rodzeństwa in vitro
Przegląd badań
Status
Interwencja / Leczenie
Szczegółowy opis
Kilka badań wykazało, że parametry morfologiczne zarodka poprawiły się, gdy stężenie tlenu w hodowli zarodkowej zostało obniżone z 20% do 5%. Wczesne zarodki ssaków rozwijały się szybciej, miały krótsze cykle komórkowe, większą szybkość tworzenia blastocyst i lepszą integralność wewnętrznej masy komórkowej (ICM) w porównaniu z zarodkami hodowanymi przy 20% stężeniu tlenu.
Ostatnie badania wykazały, że stężenie tlenu w żeńskim układzie rozrodczym nie jest stałe. W jajowodach ssaków wyższych wynosi około 8%, podczas gdy w macicy w momencie implantacji zarodka stężenie tlenu jest prawie beztlenowe (2%).
Celem technologii wspomaganego rozrodu (ART) jest naśladowanie takich warunków fizjologicznych, które lepiej odzwierciedlają środowisko in vivo w ludzkim układzie rozrodczym.
Celem pracy jest ocena, czy zmiana statycznego 5% tlenu w ciągu pięciu dni hodowli zarodków in vitro na gradient tlenu, zaczynając od 8% od dnia 0 do dnia 3, kontynuując 5% w dniu 3 a następnie z 2% tlenem od końca dnia 3 do dnia 5, lepiej odzwierciedla warunki panujące w układzie rozrodczym człowieka i poprawia cechy rozwojowe zarodka.
Typ studiów
Zapisy (Rzeczywisty)
Faza
- Nie dotyczy
Kontakty i lokalizacje
Lokalizacje studiów
-
-
-
Maribor, Słowenia, 2000
- University Medical Centre Maribor
-
-
Kryteria uczestnictwa
Kryteria kwalifikacji
Wiek uprawniający do nauki
- Dorosły
Akceptuje zdrowych ochotników
Opis
Kryteria przyjęcia:
- Wiek kobiet od 18 do 35 lat.
- Wskaźnik masy ciała (BMI) od 18 do 30 kg/m².
- Tylko pacjenci z zabiegiem ICSI (męski czynnik niepłodności, z wyłączeniem azoospermii) i posiewem blastocysty.
- Pacjenci po pierwszej i drugiej próbie cyklu ICSI.
- Cykle antagonisty hormonu uwalniającego gonadotropinę (GnRH).
Kryteria wyłączenia:
- Obecność endometriozy.
- Wcześniejsza interwencja kliniczna dotycząca jajników.
- Powiązane choroby endokrynologiczne lub metaboliczne.
- Obecność zespołu policystycznych jajników.
Plan studiów
Jak projektuje się badanie?
Szczegóły projektu
- Główny cel: Inny
- Przydział: Randomizowane
- Model interwencyjny: Przydział równoległy
- Maskowanie: Pojedynczy
Broń i interwencje
Grupa uczestników / Arm |
Interwencja / Leczenie |
|---|---|
|
Eksperymentalny: 8-5-2% stężenie gradientu tlenu w inkubatorze
Fizjologiczne stężenie gradientu tlenu w inkubatorze (8-5-2% O2).
|
Po pobraniu oocytów i inseminacji połowa zarodków danej pacjentki zostanie losowo przydzielona do inkubatora ustawionego na gradient ciśnienia tlenu (8-5-2%).
Zarodki pozostaną w inkubatorze do czasu oceny ich rozwoju w 5. dniu.
|
|
Brak interwencji: Kontrola (bez interwencji)
Dowolne warunki uprawy (statyczne 5% 02).
|
Co mierzy badanie?
Podstawowe miary wyniku
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Odsetek zapłodnionych oocytów rozwinięty do morfologicznie optymalnych blastocystów w dniu 5
Ramy czasowe: Zarodki zostaną adnotowane w dniu 5 po zakłóceniu (o 8:00).
|
Podstawową miarą wyniku będzie odsetek oocytów, które rozwiną się do morfologicznie optymalnych blastocyst Day-5, uzyskanych 4-5AA zgodnie z kryteriami Gardnera.
Zgodnie z systemem punktacji Gardnera, parametry morfologii blastocysty, takie jak stopień ekspansji blastocoel (1-5), zmierzono wygląd morfologicznej masy komórek (ICM) (A, B, C) i spójność trofeektodermy (TE) (A, B, C).
|
Zarodki zostaną adnotowane w dniu 5 po zakłóceniu (o 8:00).
|
Miary wyników drugorzędnych
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Zmierzone czasy od zapłodnienia do różnych stadiów zarodkowych
Ramy czasowe: Czasami morfokinetycznymi rejestrowano w sposób ciągły (co 5 minut) w całej kulturze zarodka, do 124 godzin (dzień 5) po inseminacji.
|
Korzystając z oprogramowania poklatkowego, filmy programistyczne zarodka zostały sprawdzone poprzez ręczne rozwój ramki obrazów według ramki. Czasami morfokinetycznymi rejestrowano w sposób ciągły (co 5 minut) w całej kulturze zarodka, do 124 godzin (dzień 5) po inseminacji. Dla każdego zużytego zarodka klinicznie zarejestrowano następujące kamienie milowe rozwojowe, który osiągnął etap blastocysty (kriok zachowany lub przeniesiony): TPNA - pojawienie się poszczególnych przednich T2 - czas do 2 -komórek T3 - czas do 3 -komórek T4 - czas do 4 -komórek T5 - czas do 5 -komórek T6 - czas do 6 -komórek T7 - czas do 7 -komórek T8 - czas do 8 -komórek TSC - Pierwszy dowód zagęszczania TM - Ukończenie procesu zagęszczania (etap Morala) TSB - inicjacja blastulacji TB - pełna blastocyst (ostatnia ramka przed zacznie cienką Zonę Pellucida) TEB - inicjacja ekspansji blastocysty (pierwsza rama pokazująca przerzedzenie strefy) |
Czasami morfokinetycznymi rejestrowano w sposób ciągły (co 5 minut) w całej kulturze zarodka, do 124 godzin (dzień 5) po inseminacji.
|
|
Pomiar powierzchni pomiaru powierzchni blastocysty i wewnętrznej komórki (ICM) w dniu 5
Ramy czasowe: Napraw czas (116 godzin) po zapłodnianiu
|
Pomiary powierzchni blastocyst i wewnętrznej masy komórek (ICM) zostaną rejestrowane na zdjęciach poklatkowych po 116 godzinach po inseminacji.
Powierzchnie będą mierzone w mikrometrach kwadratowych za pomocą narzędzia pomiarowego oprogramowania Primo Vision.
Elipsa zostanie wygenerowana wokół zewnętrznej krawędzi trofektodermy lub masy komórkowej.
Pomiary te wykluczą Zona Pellucida.
Pomiary zostaną wykonane w płaszczyźnie ostrości o największej powierzchni.
|
Napraw czas (116 godzin) po zapłodnianiu
|
|
Liczba komórek trofektodermy w dniu 5
Ramy czasowe: Napraw czas (116 godzin) po zapłodnieniu.
|
Po 116 godzinach po zapłodnieniu liczba komórek trofeektodermy zostanie zliczona za pomocą zdjęć poklatkowych.
Obrazy będą koncentrowane na zewnętrznej krawędzi troferektodermy, aby lepiej określić granice każdej komórki.
|
Napraw czas (116 godzin) po zapłodnieniu.
|
|
Występowanie atypowych rozszczepów zarodków
Ramy czasowe: Ciągle (zdjęcie będzie wykonywane co 5 minut) podczas 5 dni kultury zarodkowej.
|
Filmy poklatkowe dla każdego zarodka zostaną sprawdzone pod kątem nietypowych funkcji dekoltu, takich jak; Pseudofurrowny, bezpośrednie cięcie, odwrócone rozszczepienie, wielomukowe, nieregularny chaotyczny podział, wykluczenie komórek i upadek blastocysty, przy użyciu oprogramowania Primo Vision poprzez ręczne przekazanie ramki obrazów według ramki.
Częstotliwość nieprawidłowych wzorów cięcia zostanie zarejestrowana.
|
Ciągle (zdjęcie będzie wykonywane co 5 minut) podczas 5 dni kultury zarodkowej.
|
Współpracownicy i badacze
Daty zapisu na studia
Główne daty studiów
Rozpoczęcie studiów (Rzeczywisty)
Zakończenie podstawowe (Rzeczywisty)
Ukończenie studiów (Rzeczywisty)
Daty rejestracji na studia
Pierwszy przesłany
Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości
Pierwszy wysłany (Rzeczywisty)
Aktualizacje rekordów badań
Ostatnia wysłana aktualizacja (Rzeczywisty)
Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości
Ostatnia weryfikacja
Więcej informacji
Terminy związane z tym badaniem
Inne numery identyfikacyjne badania
- 0120-405/2021/4
- P3-0327 (Inny numer grantu/finansowania: Slovenian Research Agency)
Informacje o lekach i urządzeniach, dokumenty badawcze
Bada produkt leczniczy regulowany przez amerykańską FDA
Bada produkt urządzenia regulowany przez amerykańską FDA
Te informacje zostały pobrane bezpośrednio ze strony internetowej clinicaltrials.gov bez żadnych zmian. Jeśli chcesz zmienić, usunąć lub zaktualizować dane swojego badania, skontaktuj się z register@clinicaltrials.gov. Gdy tylko zmiana zostanie wprowadzona na stronie clinicaltrials.gov, zostanie ona automatycznie zaktualizowana również na naszej stronie internetowej .