Alkioviljelmä vakiona 5 % vs. gradientti 8 %, 5 %, 2 % happipitoisuus
Vakion 5 %:n ja 8 %:n, 5 %:n, 2 %:n happipitoisuuden vaikutus sisarusten ihmisalkioiden kehitykseen in vitro
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Interventio / Hoito
Yksityiskohtainen kuvaus
Useat tutkimukset ovat osoittaneet, että alkion morfologiset parametrit paranivat, kun alkioviljelmän happipitoisuus pienennettiin 20 %:sta 5 %:iin. Varhaiset nisäkäsalkiot kehittyivät nopeammin, niillä oli lyhyemmät solusyklit, suurempi blastokystien muodostumisnopeus ja parempi sisäisen solumassan (ICM) eheys verrattuna alkioihin, joita viljeltiin 20 % happipitoisuudella.
Viimeaikaiset tutkimukset ovat osoittaneet, että happipitoisuus naisen lisääntymiskanavassa ei ole staattinen. Korkeampien nisäkkäiden munanjohtimissa se on noin 8 %, kun taas kohdussa happipitoisuus on alkion istutushetkellä lähes hapeton (2 %).
Avustetun lisääntymistekniikan (ART) tavoitteena on jäljitellä sellaisia fysiologisia olosuhteita, jotka heijastavat paremmin ihmisen lisääntymiskanavan in vivo -ympäristöä.
Tämän tutkimuksen tavoitteena on arvioida, muuttuuko staattinen 5 % happi viiden päivän aikana in vitro alkioviljelyn aikana happigradienttiin, alkaen 8 %:sta päivästä 0 päivään 3 ja jatkuuko 5 %:lla päivänä 3. ja 2 % happea seuraamalla päivän 3 lopusta päivään 5, kuvastaa paremmin ihmisen lisääntymiskanavassa esiintyviä olosuhteita ja parantaa alkion kehitysominaisuuksia.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Vaihe
- Ei sovellettavissa
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
-
Maribor, Slovenia, 2000
- University Medical Centre Maribor
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
- Aikuinen
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- Naisten ikä 18-35 vuotta.
- Painoindeksi (BMI) on 18-30 kg/m².
- Vain potilaat, joille on tehty ICSI-menetelmä (miesten hedelmättömyystekijä, pois lukien atsoospermia) ja blastokystiviljelmä.
- Potilaat ensimmäisestä ja toisesta ICSI-syklin yrityksestä.
- Gonadotropiinihormonia vapauttavan hormonin (GnRH) antagonistisyklit.
Poissulkemiskriteerit:
- Endometrioosin esiintyminen.
- Aikaisempi kliininen interventio munasarjoihin.
- Liittyvät endokriiniset tai metaboliset sairaudet.
- Munasarjojen monirakkulatauti.
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Ensisijainen käyttötarkoitus: Muut
- Jako: Satunnaistettu
- Inventiomalli: Rinnakkaistehtävä
- Naamiointi: Yksittäinen
Aseet ja interventiot
Osallistujaryhmä / Arm |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Kokeellinen: 8-5-2 % happigradienttipitoisuus inkubaattorissa
Fysiologinen happigradienttipitoisuus inkubaattorissa (8-5-2 % O2).
|
Munasolujen talteenoton ja inseminoinnin jälkeen puolet tietyn potilaan alkioista jaetaan satunnaisesti inkubaattoriin, joka on asetettu happipainegradienttiin (8-5-2 %).
Alkiot pysyvät inkubaattorissa, kunnes niiden kehitysarviointi tapahtuu päivänä 5.
|
|
Ei väliintuloa: Ohjaus (ei väliintuloa)
Mielivaltaiset viljelyolosuhteet (staattinen 5 % 02).
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Päivän 5 morfologisesti optimaalisiin blastokysteihin kehitettyjen meremäisten munasolujen osuus 5
Aikaikkuna: Alkioita merkitään 5. päivän jälkeisen siemennyksen jälkeisenä (klo 8.00).
|
Ensisijainen tulosmitta on munasolujen osuus, jotka kehittyvät morfologisesti optimaalisiin päivä-5-blastokysteihin, pisteytettiin Gardner-kriteerien mukaan 4-5AA.
Gardnerin pisteytysjärjestelmän mukaan blastokyst-morfologiaparametrit, kuten blastokoelin laajennusaste (1-5), sisäsolun massa (ICM) (A, B, C) morfologinen ulkonäkö ja tropheektodermin (TE) (A, B, C) yhtenäisyys.
|
Alkioita merkitään 5. päivän jälkeisen siemennyksen jälkeisenä (klo 8.00).
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Mitatut ajat siemennyksestä eri alkion vaiheisiin
Aikaikkuna: Morfokineettiset ajoitukset rekisteröitiin jatkuvasti (5 minuutin välein) koko alkion kulttuurin ajan, jopa 124 tuntia (päivä 5) elvyttämisen jälkeen.
|
Aikaviivaohjelmistoa käyttämällä alkion kehitysvideoita tarkistettiin edistämällä kuvan kehystä manuaalisesti. Morfokineettiset ajoitukset rekisteröitiin jatkuvasti (5 minuutin välein) koko alkion kulttuurin ajan, jopa 124 tuntia (päivä 5) elvyttämisen jälkeen. Jokaiselle kliinisesti käytetylle alkiolle, joka saavutti blastosyst -vaiheen (kylmäsäilytetty tai siirretty), rekisteröitiin seuraavat kehitysmuodot:: TPNA - Yksittäisen pronuclein ulkonäkö T2 - Aika 2 -soluvaiheeseen T3 - Aika 3 -soluvaiheeseen T4 - Aika 4 -soluvaiheeseen T5 - Aika 5 -soluvaiheeseen T6 - Aika 6 -soluvaiheeseen T7 - Aika 7 -soluvaiheeseen T8 - Aika 8 -soluvaiheeseen TSC - Ensimmäinen todiste tiivistyksestä TM - Tiivistysprosessin valmistuminen (Morula Stage) TSB - Blastoinnin aloittaminen TB - Täysi blastosysti (viimeinen kehys ennen kuin Zona Pellucida alkaa ohentaa) TEB - Blastosystin laajennuksen aloittaminen (ensimmäinen kehys, joka näyttää Zonan ohenemisen) |
Morfokineettiset ajoitukset rekisteröitiin jatkuvasti (5 minuutin välein) koko alkion kulttuurin ajan, jopa 124 tuntia (päivä 5) elvyttämisen jälkeen.
|
|
Blastokystin ja sisäsolumassan (ICM) pinta -alan mittaus päivänä 5
Aikaikkuna: Korjaa aika (116 tuntia) siemennyksen jälkeen
|
Blastokystien ja sisäsolumassan (ICM) pintamittaukset tallennetaan aikarajoissa 116 tunnissa siemennyksen jälkeen.
Pinnat mitataan neliömikrometreinä käyttämällä Primo Vision -ohjelmiston mittaustyökalua.
Trofektodermin ulkoreunan tai sisäsolumassan ympärille syntyy ellipsi.
Nämä mittaukset sulkevat Zona Pellucida.
Mittaukset tehdään tarkennustasossa suurimman pinta -alan kanssa.
|
Korjaa aika (116 tuntia) siemennyksen jälkeen
|
|
Trofektodermisolujen lukumäärä päivänä 5
Aikaikkuna: Korjaaika (116 tuntia) siemennyksen jälkeen.
|
116 tunnin kuluttua keinosiemennyksestä trophektodermisolujen lukumäärä lasketaan aikataulun valokuvien avulla.
Kuvat keskittyvät trophektodermin uloimpaan reunaan kunkin solun rajojen määrittämiseksi paremmin.
|
Korjaaika (116 tuntia) siemennyksen jälkeen.
|
|
Epätyypillisten alkion pilkkoutumisen esiintyvyys
Aikaikkuna: Jatkuvasti (kuva otetaan 5 minuutin välein) 5 päivän alkion kulttuurin aikana.
|
Jokaisen alkion aikaviiva videoita tarkistetaan epätyypillisten pilkkoutumisominaisuuksien, kuten; PseudoFurrows, suora pilkkoutuminen, käänteinen pilkkoutuminen, monisydämen, epäsäännöllinen kaoottinen jako, solujen poissulkeminen ja blastosystin romahtaminen, käyttämällä Primo Vision -ohjelmistoa välittämällä kuvien kehyksen manuaalisesti kehyksen mukaan.
Epänormaalien pilkkoutumiskuvioiden esiintymistiheys tallennetaan.
|
Jatkuvasti (kuva otetaan 5 minuutin välein) 5 päivän alkion kulttuurin aikana.
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Muut tutkimustunnusnumerot
- 0120-405/2021/4
- P3-0327 (Muu apuraha/rahoitusnumero: Slovenian Research Agency)
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .