Alkioviljelmä vakiona 5 % vs. gradientti 8 %, 5 %, 2 % happipitoisuus
perjantai 9. kesäkuuta 2023 päivittänyt: Borut Kovačič, University Medical Centre Maribor
Vakion 5 %:n ja 8 %:n, 5 %:n, 2 %:n happipitoisuuden vaikutus sisarusten ihmisalkioiden kehitykseen in vitro
Tämän tutkimuksen tarkoituksena on tutkia ihmisalkioiden kehitystä in vitro kahdessa eri happipitoisuudessa; staattinen 5 % kaikkien viiden viljelypäivän aikana tai happigradientissa alkaen 8 %:sta päivästä 0 päivään 3, jatkuen 5 %:lla päivänä 3 ja sen jälkeen 2 %:lla happea päivän lopusta. 3 - päivä - 5.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Valmis
Interventio / Hoito
Yksityiskohtainen kuvaus
Useat tutkimukset ovat osoittaneet, että alkion morfologiset parametrit paranivat, kun alkioviljelmän happipitoisuus pienennettiin 20 %:sta 5 %:iin. Varhaiset nisäkäsalkiot kehittyivät nopeammin, niillä oli lyhyemmät solusyklit, suurempi blastokystien muodostumisnopeus ja parempi sisäisen solumassan (ICM) eheys verrattuna alkioihin, joita viljeltiin 20 % happipitoisuudella.
Viimeaikaiset tutkimukset ovat osoittaneet, että happipitoisuus naisen lisääntymiskanavassa ei ole staattinen. Korkeampien nisäkkäiden munanjohtimissa se on noin 8 %, kun taas kohdussa happipitoisuus on alkion istutushetkellä lähes hapeton (2 %).
Avustetun lisääntymistekniikan (ART) tavoitteena on jäljitellä sellaisia fysiologisia olosuhteita, jotka heijastavat paremmin ihmisen lisääntymiskanavan in vivo -ympäristöä.
Tämän tutkimuksen tavoitteena on arvioida, muuttuuko staattinen 5 % happi viiden päivän aikana in vitro alkioviljelyn aikana happigradienttiin, alkaen 8 %:sta päivästä 0 päivään 3 ja jatkuuko 5 %:lla päivänä 3. ja 2 % happea seuraamalla päivän 3 lopusta päivään 5, kuvastaa paremmin ihmisen lisääntymiskanavassa esiintyviä olosuhteita ja parantaa alkion kehitysominaisuuksia.
Opintotyyppi
Interventio
Ilmoittautuminen (Todellinen)
44
Vaihe
- Ei sovellettavissa
Yhteystiedot ja paikat
Tässä osiossa on tutkimuksen suorittajien yhteystiedot ja tiedot siitä, missä tämä tutkimus suoritetaan.
Opiskelupaikat
-
-
-
Maribor, Slovenia, 2000
- University Medical Centre Maribor
-
-
Osallistumiskriteerit
Tutkijat etsivät ihmisiä, jotka sopivat tiettyyn kuvaukseen, jota kutsutaan kelpoisuuskriteereiksi. Joitakin esimerkkejä näistä kriteereistä ovat henkilön yleinen terveydentila tai aiemmat hoidot.
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
- Aikuinen
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Joo
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- Naisten ikä 18-35 vuotta.
- Painoindeksi (BMI) on 18-30 kg/m².
- Vain potilaat, joille on tehty ICSI-menetelmä (miesten hedelmättömyystekijä, pois lukien atsoospermia) ja blastokystiviljelmä.
- Potilaat ensimmäisestä ja toisesta ICSI-syklin yrityksestä.
- Gonadotropiinihormonia vapauttavan hormonin (GnRH) antagonistisyklit.
Poissulkemiskriteerit:
- Endometrioosin esiintyminen.
- Aikaisempi kliininen interventio munasarjoihin.
- Liittyvät endokriiniset tai metaboliset sairaudet.
- Munasarjojen monirakkulatauti.
Opintosuunnitelma
Tässä osiossa on tietoja tutkimussuunnitelmasta, mukaan lukien kuinka tutkimus on suunniteltu ja mitä tutkimuksella mitataan.
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Ensisijainen käyttötarkoitus: Muut
- Jako: Satunnaistettu
- Inventiomalli: Rinnakkaistehtävä
- Naamiointi: Yksittäinen
Aseet ja interventiot
Osallistujaryhmä / Arm |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Kokeellinen: 8-5-2 % happigradienttipitoisuus inkubaattorissa
Fysiologinen happigradienttipitoisuus inkubaattorissa (8-5-2 % O2).
|
Munasolujen talteenoton ja inseminoinnin jälkeen puolet tietyn potilaan alkioista jaetaan satunnaisesti inkubaattoriin, joka on asetettu happipainegradienttiin (8-5-2 %).
Alkiot pysyvät inkubaattorissa, kunnes niiden kehitysarviointi tapahtuu päivänä 5.
|
|
Ei väliintuloa: Ohjaus (ei väliintuloa)
Mielivaltaiset viljelyolosuhteet (staattinen 5 % 02).
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Siemennettyjen munasolujen osuus, joka kehittyi morfologisesti optimaalisiin blastokysteihin päivänä 5
Aikaikkuna: Alkiot merkitään 5 päivänä inseminoinnin jälkeen (klo 8.00).
|
Ensisijainen tulosmitta on oosyyttien osuus, jotka kehittyvät morfologisesti optimaalisesti 5. päivän blastokysteiksi, pisteytyksenä 4-5AA Gardnerin kriteerien mukaan.
Gardnerin pisteytysjärjestelmän mukaan blastokystan morfologiset parametrit, kuten blastokoelin laajenemisaste (1-5), sisäisen solumassan (ICM) morfologinen ulkonäkö (A, B, C) ja trofektodermin koheesio (TE) (A, B, C) mitataan.
|
Alkiot merkitään 5 päivänä inseminoinnin jälkeen (klo 8.00).
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Mitatut ajat inseminaatiosta eri alkiovaiheisiin
Aikaikkuna: : Morfokineettisiä ajoituksia tallennetaan jatkuvasti (kuva otetaan 5 minuutin välein) 5 päivän alkioviljelyn aikana.
|
Time-lapse-ohjelmiston avulla videot tarkistetaan suoraan siirtämällä kuvia manuaalisesti kehys ruudulta.
Siten morfokineettiset ajoitukset, kuten: t2 - aika 2-soluiseen vaiheeseen, t3 - aika 3-soluvaiheeseen, t4 - aika 4-soluvaiheeseen, t5- aika 5-soluvaiheeseen, t6 - aika 6-soluvaiheeseen , t7 - aika 7 solun vaiheeseen, t8 - aika 8 solun vaiheeseen, tSC - aika tiivistymisen alkamiseen, tM - aika morulan valmistumiseen, tSB - aika räjäytyksen alkamiseen, tEB - aika laajenemisen alkamiseen , tB - aika täyteen blastokytaan, kirjataan jokaiselle alkiolle.
|
: Morfokineettisiä ajoituksia tallennetaan jatkuvasti (kuva otetaan 5 minuutin välein) 5 päivän alkioviljelyn aikana.
|
|
Blastokystin ja sisäsolumassan (ICM) pinta-alan mittaus päivänä 5
Aikaikkuna: Kiinnitä aika (116 tuntia) siemennyksen jälkeen
|
Blastokystien pintamittaukset ja sisäinen solumassa (ICM) tallennetaan ajastettuihin valokuviin 116 tunnin kuluttua keinosiemennyksestä.
Pinnat mitataan neliömikrometreinä Primo vision -ohjelmiston mittaustyökalulla.
Trofektodermin ulkoreunan tai sisäsolumassan ympärille muodostuu ellipsi.
Nämä mittaukset sulkevat pois zona pellucidan.
Mittaukset tehdään tarkennustasolla, jolla on suurin pinta-ala.
|
Kiinnitä aika (116 tuntia) siemennyksen jälkeen
|
|
Trofektodermisolujen lukumäärä päivänä 5
Aikaikkuna: Kiinnitä aika (116 tuntia) siemennyksen jälkeen.
|
116 tuntia inseminoinnin jälkeen trofektodermisolujen lukumäärä lasketaan käyttämällä aikajaksovalokuvia.
Kuvat kohdistetaan trofektodermin uloimpaan reunaan, jotta kunkin yksittäisen solun rajat voidaan määrittää paremmin.
|
Kiinnitä aika (116 tuntia) siemennyksen jälkeen.
|
|
Epätyypillisten alkion halkeamien esiintyvyys
Aikaikkuna: Jatkuvasti (kuva otetaan 5 minuutin välein) 5 päivän alkioviljelyn aikana.
|
Kunkin alkion aikaviivevideot tarkistetaan epätyypillisten pilkkoutumisominaisuuksien, kuten; pseudourat, suora katkaisu, käänteinen katkaisu, monituma, epäsäännöllinen kaoottinen jakautuminen, solujen poissulkeminen ja blastokystien romahtaminen Primo vision -ohjelmistolla lähettämällä kuvat manuaalisesti kehys ruudulta.
Epänormaalien katkaisukuvioiden taajuus tallennetaan.
|
Jatkuvasti (kuva otetaan 5 minuutin välein) 5 päivän alkioviljelyn aikana.
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Täältä löydät tähän tutkimukseen osallistuvat ihmiset ja organisaatiot.
Sponsori
Opintojen ennätyspäivät
Nämä päivämäärät seuraavat ClinicalTrials.gov-sivustolle lähetettyjen tutkimustietueiden ja yhteenvetojen edistymistä. National Library of Medicine (NLM) tarkistaa tutkimustiedot ja raportoidut tulokset varmistaakseen, että ne täyttävät tietyt laadunvalvontastandardit, ennen kuin ne julkaistaan julkisella verkkosivustolla.
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Lauantai 1. tammikuuta 2022
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Sunnuntai 1. tammikuuta 2023
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Sunnuntai 1. tammikuuta 2023
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Keskiviikko 26. huhtikuuta 2023
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Perjantai 9. kesäkuuta 2023
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Maanantai 12. kesäkuuta 2023
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Maanantai 12. kesäkuuta 2023
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Perjantai 9. kesäkuuta 2023
Viimeksi vahvistettu
Maanantai 1. toukokuuta 2023
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Muut tutkimustunnusnumerot
- 0120-405/2021/4
- P3-0327 (Muu apuraha/rahoitusnumero: Slovenian Research Agency)
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Ei
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Ei
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .
Kliiniset tutkimukset Alkion kehitys
-
Johns Hopkins Bloomberg School of Public HealthValmisEarly Childhood Development (ECD)
-
The University of New South WalesNational Health and Medical Research Council, Australia; Novo Nordisk A/S; Sydney Children's Hospitals NetworkValmisTyypin 1 diabetes | Murrosikä: >Tanner 2 Breast Development tai kivekset >4mlAustralia