Culture d'embryons sous une concentration constante de 5 % par rapport à un gradient de 8 %, 5 %, 2 % d'oxygène
L'effet d'une concentration d'oxygène constante de 5 % par rapport à un gradient de 8 %, 5 %, 2 % sur le développement d'embryons humains frères et sœurs in vitro
Aperçu de l'étude
Statut
Intervention / Traitement
Description détaillée
Plusieurs études ont montré que les paramètres morphologiques embryonnaires s'amélioraient lorsque la concentration en oxygène dans la culture d'embryons était réduite de 20 % à 5 %. Les premiers embryons de mammifères se sont développés plus rapidement, avaient des cycles cellulaires plus courts, un taux de formation de blastocystes plus élevé et une meilleure intégrité de la masse cellulaire interne (ICM) par rapport aux embryons cultivés à une concentration d'oxygène de 20 %.
Des études récentes ont montré que la concentration d'oxygène dans l'appareil reproducteur féminin n'est pas statique. Dans les trompes de Fallope des mammifères supérieurs, elle est d'environ 8 %, alors que dans l'utérus, au moment de l'implantation de l'embryon, la concentration en oxygène est quasiment anoxique (2 %).
L'objectif de la technologie de reproduction assistée (ART) est d'imiter de telles conditions physiologiques qui reflètent mieux l'environnement in vivo dans l'appareil reproducteur humain.
Le but de cette étude est d'évaluer si le changement de 5% d'oxygène statique pendant cinq jours de culture d'embryons in vitro au gradient d'oxygène, en commençant par 8% du jour 0 au jour 3, en continuant avec 5% le jour 3 et ensuite avec 2% d'oxygène de la fin du jour 3 au jour 5, reflète mieux les conditions trouvées dans l'appareil reproducteur humain et améliore les caractéristiques de développement de l'embryon.
Type d'étude
Inscription (Réel)
Phase
- N'est pas applicable
Contacts et emplacements
Lieux d'étude
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Maribor, Slovénie, 2000
- University Medical Centre Maribor
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Critères de participation
Critère d'éligibilité
Âges éligibles pour étudier
- Adulte
Accepte les volontaires sains
La description
Critère d'intégration:
- Age des femmes entre 18 et 35 ans.
- Indice de masse corporelle (IMC) entre 18 et 30 kg/m².
- Seuls les patients avec procédure ICSI (facteur masculin d'infertilité, à l'exclusion de l'azoospermie) et culture de blastocystes.
- Patients de la première et de la deuxième tentative de cycle ICSI.
- Cycles antagonistes de l'hormone de libération de l'hormone gonadotrophine (GnRH).
Critère d'exclusion:
- Présence d'endométriose.
- Intervention clinique antérieure sur les ovaires.
- Maladies endocriniennes ou métaboliques connexes.
- Présence d'un syndrome des ovaires polykystiques.
Plan d'étude
Comment l'étude est-elle conçue ?
Détails de conception
- Objectif principal: Autre
- Répartition: Randomisé
- Modèle interventionnel: Affectation parallèle
- Masquage: Seul
Armes et Interventions
Groupe de participants / Bras |
Intervention / Traitement |
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Expérimental: 8-5-2 % de concentration en gradient d'oxygène dans l'incubateur
Un gradient de concentration physiologique en oxygène dans l'incubateur (8-5-2% O2).
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Autre: Intervention expérimentale : 8-5-2 % de concentration en gradient d'oxygène dans l'incubateur
Après le prélèvement d'ovocytes et l'insémination, la moitié des embryons d'une patiente donnée seront répartis au hasard dans un incubateur réglé à un gradient de tension d'oxygène (8-5-2%).
Les embryons resteront dans l'incubateur jusqu'à leurs évaluations de développement au jour 5.
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Aucune intervention: Contrôle (pas d'intervention)
Conditions de culture arbitraires (statique 5% 02).
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Que mesure l'étude ?
Principaux critères de jugement
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
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Proportion d'ovocytes inséminés développés aux blastocystes morphologiquement optimaux le jour 5
Délai: Les embryons seront annotés le jour 5, l'insémination du poste (à 8h00).
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La principale mesure des résultats sera la proportion d'ovocytes qui se développeront aux blastocystes du jour 5 morphologiquement optimaux, marqués 4-5AA selon les critères de Gardner.
Selon le système de notation de Gardner, les paramètres de morphologie des blastocystes tels que le degré d'expansion des blastocoels (1-5), l'apparence morphologique de la masse cellulaire interne (ICM) (A, B, C) et la cohésivité du trophectoderme (TE) (A, B, C) seront mesurées.
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Les embryons seront annotés le jour 5, l'insémination du poste (à 8h00).
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Mesures de résultats secondaires
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
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Les temps mesurés de l'insémination à différents stades embryonnaires atteignent
Délai: Les délais morphokinétiques ont été enregistrés en continu (toutes les 5 minutes) tout au long de la culture des embryons, jusqu'à 124 heures (jour 5) après l'insémination.
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À l'aide d'un logiciel Time-lapse, les vidéos de développement d'embryons ont été examinées en faisant progresser manuellement les images caréties par image. Les délais morphokinétiques ont été enregistrés en continu (toutes les 5 minutes) tout au long de la culture des embryons, jusqu'à 124 heures (jour 5) après l'insémination. Les jalons de développement suivants ont été enregistrés pour chaque embryon utilisé cliniquement qui a atteint le stade blastocyste (cryoconservé ou transféré): TPNA - Apparence de pronuclei individuel T2 - Temps à la scène à 2 cellules T3 - Temps à 3 cellules Stage T4 - Temps à 4 cellules. T5 - Temps à 5 cellules Stage T6 - Temps à 6 cellules Stage T7 - Temps à 7 cellules Stage T8 - Temps à 8 cellules Stage TSC - Première preuve de compactage TM - Achèvement du processus de compactage (stade Morula) TSB - Initiation de la blastulation TB - Blastocyste complet (dernier cadre avant que Zona Pellucida ne commence à s'arrêter) TEB - Initiation de l'expansion des blastocystes (premier cadre montrant une amincissement de la zona) |
Les délais morphokinétiques ont été enregistrés en continu (toutes les 5 minutes) tout au long de la culture des embryons, jusqu'à 124 heures (jour 5) après l'insémination.
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Blastocyste et masse intérieure de la masse des cellules (ICM) Mesure de surface le jour 5
Délai: Correction du temps (116 heures) après l'insémination
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Les mesures de surface des blastocystes et de la masse des cellules intérieures (ICM) seront enregistrées sur des photos en accéléré à 116 heures après l'insémination.
Les surfaces seront mesurées en micromètres carrés à l'aide de l'outil de mesure du logiciel Primo Vision.
Une ellipse sera générée autour du bord extérieur du trophectoderme ou de la masse cellulaire intérieure.
Ces mesures excluront la zona pellucida.
Les mesures seront prises au plan de mise au point avec la plus grande surface.
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Correction du temps (116 heures) après l'insémination
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Nombre de cellules trophectodermes le jour 5
Délai: Correction du temps (116 heures) après l'insémination.
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À 116 heures après l'insémination, le nombre de cellules troptodermes sera compté à l'aide de photos en accéléré.
Les images seront axées sur le bord le plus externe du trophectoderme pour mieux déterminer les limites de chaque cellule individuelle.
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Correction du temps (116 heures) après l'insémination.
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Incidence des clivages d'embryons atypiques
Délai: En continu (une photo sera prise toutes les 5 minutes) pendant 5 jours de culture d'embryons.
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Les vidéos en accéléré pour chaque embryon seront examinées pour les fonctionnalités de clivage atypique, telles que; Pseudofurrows, clivage direct, clivage inverse, multinucléation, division chaotique irrégulière, exclusion cellulaire et effondrement des blastocystes, en utilisant le logiciel Primo Vision en transmettant manuellement les images cadre par image.
La fréquence des modèles de clivage anormales sera enregistrée.
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En continu (une photo sera prise toutes les 5 minutes) pendant 5 jours de culture d'embryons.
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Collaborateurs et enquêteurs
Parrainer
Dates d'enregistrement des études
Dates principales de l'étude
Début de l'étude (Réel)
Achèvement primaire (Réel)
Achèvement de l'étude (Réel)
Dates d'inscription aux études
Première soumission
Première soumission répondant aux critères de contrôle qualité
Première publication (Réel)
Mises à jour des dossiers d'étude
Dernière mise à jour publiée (Réel)
Dernière mise à jour soumise répondant aux critères de contrôle qualité
Dernière vérification
Plus d'information
Termes liés à cette étude
Autres numéros d'identification d'étude
- 0120-405/2021/4
- P3-0327 (Autre subvention/numéro de financement: Slovenian Research Agency)
Informations sur les médicaments et les dispositifs, documents d'étude
Étudie un produit pharmaceutique réglementé par la FDA américaine
Étudie un produit d'appareil réglementé par la FDA américaine
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