Klonální stav parathyroidního tumoru

K definování frekvence monoklonálních-X a polyklonálních-X tumorů u účastníků primární hyperparatyreózy (PHPT) s paratyreoidektomií (PTX) a k definování vztahu mezi klonálním stavem tumoru příštítných tělísek a mnohočetnou neoplazií žláz (MGN) budou vyšetřovatelé porovnávat chirurgické a patologické výsledky na klonální stav nádoru v multicentrické kohortě účastníků s bilaterální explorací krku (BNE) a PTX.

Účastníci studie se budou rekrutovat ze čtyř velkoobjemových center na Washington University v St. Louis (WU), University of California San Francisco, University of Alabama-Birmingham a University of Pennsylvania. Způsobilým účastníkům bude poskytnuta standardní péče (paratyreoidektomie) a deidentifikované vzorky nádoru zalité ve formalínu fixovaném v parafínu (FFPE) (obarvené a nebarvené z každé abnormální žlázy) budou odeslány na WU ke studiu. DNA bude extrahována ze vzorků FFPE a test HUMARA bude proveden podle našeho zavedeného protokolu. Naše dvě publikované studie ukazují > 90% shodu mezi replikovanými testy HUMARA stejného nádoru. Pro další přísnost budou dvě oblasti každého nádoru testovány nezávisle, aby se zajistila shoda klonálního stavu. Nádory, u kterých je volání klonality ze dvou vzorků uvnitř nádoru nesouhlasné, budou jako takové zaznamenány a vyšetřovatelé provedou analýzy citlivosti za účelem, kde je to relevantní, přiřadit těmto vzorkům jeden nebo druhý klonální stav.

Dále vyšetřovatelé použijí sekundární test (Cytoscan HD array, ThermoFisher) k posouzení variace počtu kopií DNA (CNV) v náhodné sadě vzorků z 58 polyklonálních případů X a 49 monoklonálních případů X (odhadem 107 celkových testů). Publikované i nepublikované údaje ukázaly, že CNV se vyskytuje se značnou frekvencí u nádorů příštítných tělísek, včetně adenomů. Hodnocení CNV může poskytnout nezávislé ověření nálezu polyklonality založeného na X-inaktivaci identifikací heterogenní CNV ve vzorku nádoru indikující polyklonalitu nebo jednotnější CNV odrážející monoklonalitu. Případy s nesouhlasnými výsledky (odhadované <10 %) z testů HUMARA a CNV budou komplexně studovány v rámci výzkumných cílů.

Deidentifikovaná patologická data včetně počtu a hmotnosti abnormálních žláz odstraněných účastníkům budou zaznamenána na místních místech studie a vložena do databáze REDCap udržované na WU. Vyšetřovatelé poté zhodnotí operativní a patologické zprávy pro korelaci klonality tumoru a přítomnosti neoplazie jediné žlázy (SGN) nebo mnohočetné neoplazie žlázy (MGN). V případech MGN vyšetřovatelé provedou ms-PCR alel HUMARA na všech resekovaných nádorech, aby se vyhodnotila shoda klonality. Vyšetřovatelé také určí dopad dvou běžných chirurgických přístupů na výsledky u nádorů různého klonálního stavu. Frekvence MGN stratifikovaná podle nádorové klonality bude zkoumána u účastníků, kteří podstoupili UNE s monitorováním ioPTH a porovnávali BNE. Budou zkontrolovány operační a patologické zprávy, stejně jako hladiny ioPTH odebrané před a 5 i 10 minut (PTH T1/2 = 5 min.) po odstranění nádoru. Základní nádorová klonalita bude stanovena, jak je popsáno výše, a bude porovnána s patologickými výsledky (MGN versus SGN), stejně jako kinetika ioPTH (% poklesu od pre-op hladin PTH v 5 a 10 minutách po konečném odstranění nádoru).

Aby bylo možné definovat vztah mezi klonálním stavem parathyroidního tumoru a biochemickými výsledky po PTX pro PHPT, výzkumníci porovnají základní klinické rysy, chirurgické/patologické nálezy a pooperační biochemické výsledky po PTX s klonálním stavem tumoru u velké, multicentrické kohorty účastníků s PTX. Celkem 645 účastníků se známým klonálním stavem nádoru bude mít standardní klinická a biochemická data (sérový vápník, albumin, intaktní PTH, 25(OH)D a kreatinin) zaznamenaná na začátku (před PTX) a po 2 týdnech a 3 měsících a 6 měsíců po PTX (ne všechny laboratoře jsou zaznamenány v každém časovém bodě sledování). Výzkumníci budou porovnávat frekvenci zvýšeného PTH (ePTH) v každém časovém bodě u účastníků s monoklonálními-X a polyklonálními-X tumory. Výzkumníci již dříve prokázali, že stav vitaminu D ovlivňuje ePTH po PTX. Aby vyšetřovatelé prozkoumali abnormální metabolismus vitaminu D, nejběžnější mechanismus sekundární hyperparatyreózy jako příčiny onemocnění polyklonálním-X, provedou komplexní analýzu stavu vitaminu D u podskupiny 111 účastníků WUSM s monoklonálním-X a polyklonálním-X. nádory. Naše analýza bude zahrnovat biochemické ukazatele metabolismu vitaminu D (hladiny 25-hydroxyvitaminu D, 1,25-dihydroxyvitaminu D a hladiny vazebných proteinů vitaminu D).