Stan klonalny guza przytarczyc

Aby określić częstość występowania guzów monoklonalnych X i poliklonalnych X u pacjentów z pierwotną nadczynnością przytarczyc (PHPT) po usunięciu przytarczyc (PTX) oraz określić związek między statusem klonalnym guza przytarczyc a neoplazją mnogich gruczołów (MGN), badacze porównają chirurgiczne i patologiczne wyniki dla statusu klonalnego guza w wieloośrodkowej kohorcie uczestników po obustronnej eksploracji szyi (BNE) i PTX.

Uczestnicy badania będą rekrutowani z czterech dużych ośrodków na Uniwersytecie Waszyngtońskim w St. Louis (WU), Uniwersytecie Kalifornijskim w San Francisco, Uniwersytecie Alabama-Birmingham i Uniwersytecie Pensylwanii. Kwalifikujący się uczestnicy otrzymają standardowe leczenie (wycięcie przytarczyc), a próbki guza utrwalone w formalinie i zatopione w parafinie (FFPE) (wybarwione i niewybarwione z każdego nieprawidłowego gruczołu) zostaną wysłane do WU w celu zbadania. DNA zostanie wyekstrahowane z próbek FFPE, a test HUMARA zostanie przeprowadzony zgodnie z naszym ustalonym protokołem. Nasze dwa opublikowane badania wykazują ponad 90% zgodność między powtórzonymi testami HUMARA tego samego guza. W celu uzyskania dodatkowego rygoru dwa regiony każdego guza będą badane niezależnie w celu zapewnienia zgodności statusu klonalnego. Guzy, w których wywołanie klonalności z dwóch próbek w obrębie guza jest niezgodne, zostaną zarejestrowane jako takie, a badacze przeprowadzą analizy wrażliwości, w celach, w których jest to istotne, przypisania jednego lub drugiego stanu klonalnego do tych próbek.

Ponadto badacze zastosują test wtórny (macierz Cytoscan HD, ThermoFisher) do oceny zmienności liczby kopii DNA (CNV) w losowym zestawie próbek z 58 przypadków poliklonalnego X i 49 przypadków monoklonalnego X (szacunkowo 107 testów ogółem). Opublikowane i niepublikowane dane wykazały, że CNV występuje ze znaczną częstością w guzach przytarczyc, w tym gruczolakach. Ocena CNV może zapewnić niezależną weryfikację stwierdzenia poliklonalności opartego na inaktywacji X poprzez identyfikację heterogennej CNV w próbce guza wskazującej na poliklonalność lub bardziej jednorodną CNV odzwierciedlającą monoklonalność. Przypadki z niezgodnymi wynikami (szacunkowo <10%) z testów HUMARA i CNV będą kompleksowo badane w celach eksploracyjnych.

Dane patologiczne pozbawione cech identyfikacyjnych, w tym liczba i waga nieprawidłowych gruczołów usuniętych uczestnikom, zostaną zarejestrowane w lokalnych ośrodkach badawczych i wprowadzone do bazy danych REDCap prowadzonej w WU. Następnie badacze dokonają przeglądu raportów operacyjnych i patologicznych pod kątem korelacji klonalności guza i obecności neoplazji pojedynczego gruczołu (SGN) lub neoplazji wielu gruczołów (MGN). W przypadku MGN badacze wykonają ms-PCR alleli HUMARA na wszystkich wyciętych guzach w celu oceny zgodności klonalności. Badacze określą również wpływ dwóch powszechnych podejść chirurgicznych na wyniki w przypadku guzów o różnym statusie klonalnym. Częstość MGN stratyfikowana przez klonalność guza zostanie zbadana u uczestników, którzy przechodzą UNE z monitorowaniem ioPTH i porównają BNE. Raporty operacyjne i patologiczne zostaną przejrzane, a także poziomy ioPTH pobrane przed i zarówno 5, jak i 10 minut (PTH T1/2 = 5 min.) po usunięciu guza. Klonalność leżącego u podstaw guza zostanie określona w sposób opisany powyżej i zostanie porównana z wynikami patologicznymi (MGN w porównaniu z SGN), jak również z kinetyką ioPTH (% spadek poziomu PTH przed operacją po 5 i 10 minutach od ostatecznego usunięcia guza).

Aby określić związek między statusem klonalnym guza przytarczyc a wynikami biochemicznymi po PTX w przypadku PHPT, badacze porównają wyjściowe cechy kliniczne, wyniki chirurgiczne/patologiczne i pooperacyjne wyniki biochemiczne po PTX ze statusem klonalnym guza w dużej, wieloośrodkowej kohorcie uczestników z PTX. W sumie 645 uczestników ze znanym statusem klonalnym nowotworu będzie miało standardowe dane kliniczne i biochemiczne (wapń w surowicy, albumina, nienaruszony PTH, 25(OH)D i kreatynina) zapisane na początku badania (przed podaniem PTX) oraz po 2 tygodniach, 3 miesiącach i 6 miesięcy po PTX (nie wszystkie laboratoria są rejestrowane w każdym punkcie czasowym obserwacji). Badacze porównają częstość podwyższonego PTH (ePTH) w każdym punkcie czasowym u uczestników z guzami monoklonalnymi X i poliklonalnymi X. Badacze wykazali wcześniej, że status witaminy D wpływa na ePTH po PTX. Aby zbadać nieprawidłowy metabolizm witaminy D, najczęstszy mechanizm wtórnej nadczynności przytarczyc jako przyczyny choroby poliklonalnej X, badacze przeprowadzą również kompleksową analizę stanu witaminy D w podgrupie 111 uczestników WUSM z monoklonalnymi X i poliklonalnymi X. guzy. Nasza analiza obejmie wskaźniki biochemiczne metabolizmu witaminy D (poziom 25-hydroksywitaminy D, 1,25-dihydroksywitaminy D oraz białka wiążącego witaminę D).