Status clonal do tumor de paratireoide

Para definir a frequência de tumores monoclonais-X e policlonais-X em participantes com hiperparatireoidismo primário (PHPT) submetidos a paratireoidectomia (PTX) e para definir a relação entre o status clonal do tumor da paratireoide e a neoplasia de múltiplas glândulas (MGN), os investigadores compararão os resultados cirúrgicos e patológicos resultados para o status clonal do tumor em uma coorte multicêntrica de participantes com exploração bilateral do pescoço (BNE) e PTX.

Os participantes do estudo serão recrutados em quatro centros de alto volume na Washington University em St. Louis (WU), University of California San Francisco, University of Alabama-Birmingham e University of Pennsylvania. Os participantes elegíveis receberão tratamento padrão (paratireoidectomia) e amostras de tumor fixadas em formalina e embebidas em parafina (FFPE) não identificadas (coradas e não coradas de cada glândula anormal) serão enviadas para WU para estudo. O DNA será extraído de amostras FFPE e o ensaio HUMARA será realizado de acordo com nosso protocolo estabelecido. Nossos dois estudos publicados mostram >90% de concordância entre os ensaios HUMARA replicados do mesmo tumor. Para rigor adicional, duas regiões de cada tumor serão analisadas independentemente para garantir a concordância do estado clonal. Os tumores em que a chamada de clonalidade das duas amostras intratumorais forem discordantes serão registados como tal, e os investigadores farão análises de sensibilidade, para fins onde for relevante, de atribuir um ou outro estado clonal a essas amostras.

Além disso, os investigadores empregarão um ensaio secundário (array Cytoscan HD, ThermoFisher) para avaliar a variação do número de cópias de DNA (CNV) em um conjunto aleatório de amostras de 58 casos policlonais-X e 49 casos monoclonais-X (estimativa de 107 ensaios totais). Dados publicados e não publicados mostraram que a CNV ocorre com frequência considerável em tumores de paratireoide, incluindo adenomas. A avaliação de CNV pode fornecer verificação independente de um achado de policlonalidade baseado na inativação do X, identificando CNV heterogênea dentro de uma amostra de tumor indicando policlonalidade, ou CNV mais uniforme refletindo monoclonalidade. Casos com resultados discordantes (estimados <10%) dos ensaios HUMARA e CNV serão estudados de forma abrangente nos objetivos exploratórios.

Dados patológicos não identificados, incluindo o número e o peso das glândulas anormais removidas dos participantes, serão registrados nos locais de estudo locais e inseridos em um banco de dados REDCap mantido na WU. Os investigadores, então, revisarão os relatórios operatórios e patológicos para correlação da clonalidade do tumor e a presença de neoplasia de glândula única (SGN) ou neoplasia de múltiplas glândulas (MGN). Em casos de MGN, os investigadores realizarão ms-PCR dos alelos HUMARA em todos os tumores ressecados para avaliar a concordância da clonalidade. Os investigadores também determinarão o impacto de duas abordagens cirúrgicas comuns nos resultados de tumores de diferentes status clonais. A frequência de MGN estratificada por clonalidade do tumor será examinada em participantes que se submeterão a UNE com monitoramento ioPTH e BNE comparado. Os relatórios operatórios e de patologia serão revisados, bem como os níveis de ioPTH obtidos antes e 5 e 10 minutos (PTH T1/2 = 5 min.) após a remoção do tumor. A clonalidade do tumor subjacente será determinada conforme descrito acima e será comparada aos resultados patológicos (MGN versus SGN), bem como à cinética de ioPTH (% de declínio dos níveis de PTH pré-operatórios em 5 e 10 minutos após a remoção final do tumor).

Para definir a relação entre o estado clonal do tumor da paratireoide e os resultados bioquímicos após PTX para PHPT, os investigadores irão comparar características clínicas basais, achados cirúrgicos/patológicos e resultados bioquímicos pós-operatórios após PTX ao status clonal do tumor em uma grande coorte multicêntrica de participantes com PTX. Um total de 645 participantes com status clonal de tumor conhecido terá dados clínicos e bioquímicos padrão (cálcio sérico, albumina, PTH intacto, 25(OH)D e creatinina) registrados no início do estudo (antes de PTX) e em 2 semanas, 3 meses , e 6 meses pós-PTX (nem todos os exames laboratoriais são registrados em cada ponto de acompanhamento). Os investigadores irão comparar a frequência de PTH elevado (ePTH) em cada ponto de tempo em participantes com tumores monoclonais-X e policlonais-X. Os pesquisadores mostraram anteriormente que o status de vitamina D afeta o ePTH após o PTX. Para investigar o metabolismo anormal da vitamina D, o mecanismo mais comum do hiperparatireoidismo secundário como causa da doença policlonal-X, os pesquisadores também realizarão uma análise abrangente do status da vitamina D em um subconjunto de 111 participantes WUSM com monoclonal-X e policlonal-X tumores. Nossa análise incluirá índices bioquímicos do metabolismo da vitamina D (25-hidroxivitamina D, 1,25-diidroxivitamina D e níveis de proteína de ligação à vitamina D).