Parathyroid tumor klonal status

For å definere frekvensen av monoklonal-X og polyklonal-X-svulster i primær hyperparathyroidisme (PHPT) deltakere som har parathyroidectomy (PTX) og for å definere forholdet mellom parathyroid tumor klonal status og multippel kjertel neoplasi (MGN), vil etterforskerne sammenligne kirurgisk og patologisk utfall av tumorklonal status i en multisenterkohort av deltakere som har bilateral nakkeutforskning (BNE) og PTX.

Studiedeltakere vil bli rekruttert fra fire høyvolumsentre ved Washington University i St. Louis (WU), University of California San Francisco, University of Alabama-Birmingham og University of Pennsylvania. Kvalifiserte deltakere vil motta standardbehandling (paratyreoidektomi) og avidentifiserte formalinfikserte parafininnstøpte (FFPE) tumorprøver (farget og ufarget fra hver unormal kjertel) vil bli sendt til WU for studier. DNA vil bli ekstrahert fra FFPE-prøver og HUMARA-analysen vil bli utført i henhold til vår etablerte protokoll. Våre to publiserte studier viser >90 % samsvar mellom replikat HUMARA-analyser av samme svulst. For ytterligere strenghet, vil to regioner av hver tumor bli analysert uavhengig for å sikre samsvar med klonal status. Tumorer der klonalitetsoppkallingen fra de to innen-tumorprøvene er uenige vil bli registrert som sådan, og etterforskerne vil utføre sensitivitetsanalyser, for mål der dette er relevant, for å tildele en eller annen klonal tilstand til disse prøvene.

Videre vil etterforskerne bruke en sekundær analyse (Cytoscan HD-array, ThermoFisher) for å vurdere DNA-kopinummervariasjon (CNV) i et tilfeldig sett med prøver fra 58 polyklonale-X-tilfeller og 49 monoklonale-X-tilfeller (estimert 107 totale analyser). Publiserte og upubliserte data har vist at CNV forekommer med betydelig hyppighet i parathyreoideasvulster, inkludert adenomer. CNV-vurdering kan gi uavhengig verifisering av et X-inaktiveringsbasert funn av polyklonalitet ved å identifisere heterogen CNV i en tumorprøve som indikerer polyklonalitet, eller mer ensartet CNV som reflekterer monoklonalitet. Tilfeller med uoverensstemmende resultater (estimert <10%) fra HUMARA- og CNV-analyser vil bli grundig studert i de utforskende målene.

Avidentifiserte patologiske data inkludert antall og vekt av unormale kjertler fjernet fra deltakerne vil bli registrert på lokale studiesteder og lagt inn i en REDCap-database som vedlikeholdes ved WU. Etterforskerne vil deretter gjennomgå operative og patologiske rapporter for korrelasjon av tumorklonalitet og tilstedeværelsen av enkeltkjertelneoplasi (SGN) eller multippelkjertelneoplasi (MGN). I tilfeller av MGN vil etterforskerne utføre ms-PCR av HUMARA-alleler på alle reseksjonerte svulster for å vurdere for samsvar med klonalitet. Etterforskerne vil også bestemme virkningen av to vanlige kirurgiske tilnærminger på utfall i svulster med ulik klonal status. Frekvensen av MGN stratifisert etter tumorklonalitet vil bli undersøkt hos deltakere som gjennomgår UNE med ioPTH-overvåking og sammenlignet BNE. Operativ- og patologirapporter vil bli gjennomgått, samt ioPTH-nivåer som er tegnet før og både 5 og 10 minutter (PTH T1/2 = 5 min.) etter svulstfjerning. Underliggende tumorklonalitet vil bli bestemt som beskrevet ovenfor og vil bli sammenlignet med patologiske resultater (MGN versus SGN), samt ioPTH-kinetikk (% nedgang fra pre-op PTH-nivåer 5 og 10 minutter etter endelig tumorfjerning).

For å definere forholdet mellom parathyroid tumor klonal status og biokjemiske utfall etter PTX for PHPT, vil etterforskerne sammenligne baseline kliniske egenskaper, kirurgiske/patologiske funn og postoperative biokjemiske utfall etter PTX med tumor klonal status i en stor, multisenter kohort av deltakere som har PTX. Totalt 645 deltakere med kjent tumorklonal status vil ha standard kliniske og biokjemiske data (serumkalsium, albumin, intakt PTH, 25(OH)D og kreatinin) registrert ved baseline (før PTX), og etter 2 uker, 3 måneder , og 6 måneder etter PTX (ikke alle laboratorier blir registrert ved hvert oppfølgingstidspunkt). Etterforskerne vil sammenligne frekvensen av forhøyet PTH (ePTH) på hvert tidspunkt hos deltakere med monoklonal-X og polyklonal-X-svulster. Etterforskerne har tidligere vist at vitamin D-status påvirker ePTH etter PTX. For å undersøke unormal vitamin D-metabolisme, den vanligste mekanismen for sekundær hyperparatyreoidisme som årsak til polyklonal-X sykdom, vil etterforskerne også utføre en omfattende analyse av vitamin D-status i en undergruppe av 111 WUSM-deltakere med monoklonal-X og polyklonal-X svulster. Vår analyse vil inkludere biokjemiske indekser for vitamin D-metabolisme (25-hydroksyvitamin D, 1,25-dihydroksyvitamin D og vitamin D bindende proteinnivåer).