Klonale status van bijschildkliertumor

Om de frequentie van monoklonale-X- en polyklonale-X-tumoren te bepalen bij deelnemers aan primaire hyperparathyreoïdie (PHPT) die parathyreoïdectomie (PTX) hebben ondergaan en om de relatie tussen de klonale status van de bijschildkliertumor en meervoudige klierneoplasie (MGN) te definiëren, zullen de onderzoekers chirurgische en pathologische uitkomsten van tumorklonale status in een multicenter cohort van deelnemers met bilaterale nekexploratie (BNE) en PTX.

Studiedeelnemers zullen worden gerekruteerd uit vier grote centra aan de Washington University in St. Louis (WU), University of California San Francisco, University of Alabama-Birmingham en de University of Pennsylvania. In aanmerking komende deelnemers krijgen een standaardbehandeling (parathyreoïdectomie) en geanonimiseerde formaline-gefixeerde paraffine-ingebedde (FFPE) tumormonsters (gekleurd en ongekleurd van elke abnormale klier) zullen voor onderzoek naar WU worden gestuurd. DNA zal worden geëxtraheerd uit FFPE-monsters en de HUMARA-assay zal worden uitgevoerd volgens ons vastgestelde protocol. Onze twee gepubliceerde studies laten >90% concordantie zien tussen herhaalde HUMARA-assays van dezelfde tumor. Voor extra strengheid zullen twee regio's van elke tumor onafhankelijk worden getest om concordantie van de klonale status te verzekeren. Tumoren waarbij de klonaliteitsoproep van de twee binnen-tumormonsters niet overeenstemt, zullen als zodanig worden geregistreerd en de onderzoekers zullen gevoeligheidsanalyses uitvoeren, voor doeleinden waar dit relevant is, om de ene of de andere klonale toestand aan deze monsters toe te wijzen.

Verder zullen de onderzoekers een secundaire test gebruiken (Cytoscan HD-array, ThermoFisher) om DNA-kopienummervariatie (CNV) te beoordelen in een willekeurige reeks monsters van 58 polyklonaal-X-gevallen en 49 monoklonaal-X-gevallen (naar schatting 107 totale assays). Gepubliceerde en niet-gepubliceerde gegevens hebben aangetoond dat CNV met aanzienlijke frequentie voorkomt in bijschildkliertumoren, waaronder adenomen. CNV-beoordeling kan onafhankelijke verificatie bieden van een op X-inactivatie gebaseerde bevinding van polyklonaliteit door heterogene CNV binnen een tumormonster te identificeren die polyklonaliteit aangeeft, of meer uniforme CNV die monoklonaliteit weerspiegelt. Gevallen met tegenstrijdige resultaten (geschat <10%) van HUMARA- en CNV-assays zullen uitgebreid worden bestudeerd in de verkennende doelstellingen.

Geanonimiseerde pathologische gegevens, waaronder het aantal en het gewicht van de bij de deelnemers verwijderde abnormale klieren, zullen worden geregistreerd op lokale onderzoekslocaties en worden ingevoerd in een REDCap-database die wordt bijgehouden op de WU. De onderzoekers zullen vervolgens de operatieve en pathologische rapporten beoordelen op correlatie tussen tumorklonaliteit en de aanwezigheid van neoplasie van een enkele klier (SGN) of neoplasie van meerdere klieren (MGN). In gevallen van MGN zullen de onderzoekers ms-PCR van HUMARA-allelen uitvoeren op alle gereseceerde tumoren om de concordantie van klonaliteit te beoordelen. De onderzoekers zullen ook de impact bepalen van twee gangbare chirurgische benaderingen op de resultaten bij tumoren met een verschillende klonale status. De frequentie van MGN gestratificeerd naar tumorklonaliteit zal worden onderzocht bij deelnemers die UNE ondergaan met ioPTH-monitoring en BNE vergelijken. Operatie- en pathologierapporten worden beoordeeld, evenals ioPTH-niveaus die vóór en zowel 5 als 10 minuten worden getrokken (PTH T1/2 = 5 min.) na verwijdering van de tumor. Onderliggende tumorklonaliteit zal worden bepaald zoals hierboven beschreven en zal worden vergeleken met pathologische resultaten (MGN versus SGN), evenals ioPTH-kinetiek (% afname van pre-operatieve PTH-niveaus op 5 en 10 minuten na definitieve verwijdering van de tumor).

Om de relatie tussen de klonale status van de bijschildkliertumor en de biochemische uitkomsten na PTX voor PHPT te definiëren, zullen de onderzoekers de basislijn klinische kenmerken, chirurgische/pathologische bevindingen en postoperatieve biochemische uitkomsten na PTX vergelijken met de klonale status van de tumor in een groot, multicenter cohort van deelnemers met PTX. Van in totaal 645 deelnemers met bekende tumorklonale status zullen standaard klinische en biochemische gegevens (serumcalcium, albumine, intact PTH, 25(OH)D en creatinine) worden geregistreerd bij baseline (vóór PTX) en na 2 weken, 3 maanden en 6 maanden na PTX (niet alle labs worden geregistreerd op elk follow-uptijdstip). De onderzoekers zullen de frequentie van verhoogde PTH (ePTH) op elk tijdstip vergelijken bij deelnemers met monoklonale-X- en polyklonale-X-tumoren. De onderzoekers hebben eerder aangetoond dat de vitamine D-status van invloed is op ePTH na PTX. Om abnormaal vitamine D-metabolisme te onderzoeken, het meest voorkomende mechanisme van secundaire hyperparathyreoïdie als oorzaak van polyklonaal-X-ziekte, zullen de onderzoekers ook een uitgebreide analyse uitvoeren van de vitamine D-status in een subgroep van 111 WUSM-deelnemers met monoklonaal-X en polyklonaal-X. tumoren. Onze analyse omvat biochemische indices van vitamine D-metabolisme (25-hydroxyvitamine D-, 1,25-dihydroxyvitamine D- en vitamine D-bindende eiwitniveaus).