Клональный статус опухоли паращитовидной железы

Чтобы определить частоту моноклональных-X и поликлональных-X опухолей у участников первичного гиперпаратиреоза (PHPT), перенесших паратиреоидэктомию (PTX), и определить взаимосвязь между клональным статусом опухоли паращитовидной железы и неоплазией множественных желез (MGN), исследователи будут сравнивать хирургические и патологические результаты клонального статуса опухоли в многоцентровой когорте участников, перенесших двустороннее исследование шеи (BNE) и PTX.

Участники исследования будут набраны из четырех крупных центров Вашингтонского университета в Сент-Луисе (WU), Калифорнийского университета в Сан-Франциско, Университета Алабамы в Бирмингеме и Пенсильванского университета. Приемлемые участники получат стандартное лечение (паратиреоидэктомия), а деидентифицированные, фиксированные формалином и залитые парафином (FFPE) образцы опухолей (окрашенные и неокрашенные из каждой аномальной железы) будут отправлены в WU для исследования. ДНК будет извлечена из образцов FFPE, и анализ HUMARA будет выполнен в соответствии с нашим установленным протоколом. Наши два опубликованных исследования показывают >90% соответствие между повторными анализами HUMARA для одной и той же опухоли. Для дополнительной строгости две области каждой опухоли будут проанализированы независимо, чтобы обеспечить соответствие клонального статуса. Опухоли, в которых вызов клональности из двух внутриопухолевых образцов не согласуется, будут зарегистрированы как таковые, и исследователи проведут анализы чувствительности для целей, где это уместно, для присвоения тем или иным клональным состояниям этим образцам.

Кроме того, исследователи будут использовать вторичный анализ (массив Cytoscan HD, ThermoFisher) для оценки вариации числа копий ДНК (CNV) в случайном наборе образцов из 58 случаев поликлонального X и 49 случаев моноклонального X (всего предполагается 107 анализов). Опубликованные и неопубликованные данные показали, что CNV встречается со значительной частотой в опухолях паращитовидной железы, включая аденомы. Оценка CNV может обеспечить независимую проверку обнаружения поликлональности на основе X-инактивации путем выявления гетерогенных CNV в образце опухоли, указывающих на поликлональность, или более однородных CNV, отражающих моноклональность. Случаи с противоречивыми результатами (оценка <10%) анализов HUMARA и CNV будут всесторонне изучены в рамках исследовательских целей.

Деидентифицированные патологические данные, включая количество и массу аномальных желез, удаленных у участников, будут регистрироваться в местных центрах исследования и вводиться в базу данных REDCap, которая ведется в WU. Затем исследователи просматривают оперативные и патологоанатомические отчеты на предмет корреляции клональности опухоли и наличия неоплазии одной железы (SGN) или неоплазии множественной железы (MGN). В случаях MGN исследователи будут выполнять ms-PCR аллелей HUMARA на всех резецированных опухолях, чтобы оценить соответствие клональности. Исследователи также определят влияние двух распространенных хирургических подходов на исходы при опухолях разного клонального статуса. Частота МГН, стратифицированная по клональности опухоли, будет исследована у участников, перенесших ННЭ с мониторингом иоПТГ, и сравнится с НЭ. Будут рассмотрены отчеты об операции и патологии, а также уровни иоПТГ, полученные до и через 5 и 10 минут (ПТГ T1/2 = 5 мин.). после удаления опухоли. Клональность лежащей в основе опухоли будет определяться, как описано выше, и будет сравниваться с патологическими результатами (MGN по сравнению с SGN), а также кинетикой ioPTH (% снижения от дооперационных уровней PTH через 5 и 10 минут после окончательного удаления опухоли).

Чтобы определить взаимосвязь между клональным статусом опухоли паращитовидной железы и биохимическими результатами после PTX для PHPT, исследователи будут сравнивать исходные клинические признаки, хирургические/патологические данные и послеоперационные биохимические результаты после PTX с клональным статусом опухоли в большой многоцентровой когорте участников с PTX. В общей сложности 645 участников с известным клональным статусом опухоли будут иметь стандартные клинические и биохимические данные (сывороточный кальций, альбумин, интактный ПТГ, 25(OH)D и креатинин), зарегистрированные на исходном уровне (до ПТ), а также через 2 недели, 3 месяца. и через 6 месяцев после PTX (не все лабораторные анализы регистрируются в каждый момент времени последующего наблюдения). Исследователи будут сравнивать частоту повышенного ПТГ (рПТГ) в каждый момент времени у участников с моноклональными-Х и поликлональными-Х опухолями. Исследователи ранее показали, что статус витамина D влияет на ePTH после PTX. Чтобы исследовать аномальный метаболизм витамина D, наиболее распространенный механизм вторичного гиперпаратиреоза как причину поликлональной Х-болезни, исследователи также проведут всесторонний анализ статуса витамина D в подгруппе из 111 участников WUSM с моноклональной Х- и поликлональной Х-хромосомой. опухоли. Наш анализ будет включать биохимические показатели метаболизма витамина D (уровни 25-гидроксивитамина D, 1,25-дигидроксивитамина D и белка, связывающего витамин D).