Parathyroid tumor klonal status

For at definere hyppigheden af ​​monoklonal-X og polyklonal-X-tumorer i primær hyperparathyroidisme (PHPT) deltagere, der har parathyroidectomy (PTX) og for at definere forholdet mellem parathyroid tumor klonal status og multipel kirtel neoplasi (MGN), vil efterforskerne sammenligne kirurgiske og patologiske resultater for tumorklonal status i en multicenterkohorte af deltagere, der har bilateral nakkeudforskning (BNE) og PTX.

Studiedeltagere vil blive rekrutteret fra fire højvolumencentre ved Washington University i St. Louis (WU), University of California San Francisco, University of Alabama-Birmingham og University of Pennsylvania. Kvalificerede deltagere vil modtage standardbehandling (parathyreoidektomi) og afidentificerede formalinfikserede paraffinindlejrede (FFPE) tumorprøver (farvet og ufarvet fra hver unormal kirtel) vil blive sendt til WU til undersøgelse. DNA vil blive ekstraheret fra FFPE-prøver, og HUMARA-analysen vil blive udført i henhold til vores etablerede protokol. Vores to publicerede undersøgelser viser >90% overensstemmelse mellem replikat HUMARA-assays af den samme tumor. For yderligere stringens vil to regioner af hver tumor blive analyseret uafhængigt for at sikre overensstemmelse af klonal status. Tumorer, hvor klonalitetskaldet fra de to inden-tumorprøver er uoverensstemmende, vil blive registreret som sådan, og efterforskerne vil udføre sensitivitetsanalyser med det formål, hvor dette er relevant, at tildele den ene eller den anden klonale tilstand til disse prøver.

Yderligere vil efterforskerne anvende et sekundært assay (Cytoscan HD-array, ThermoFisher) til at vurdere DNA-kopinummervariation (CNV) i et tilfældigt sæt prøver fra 58 polyklonale-X-tilfælde og 49 monoklonale-X-tilfælde (estimeret 107 assays i alt). Publicerede og upublicerede data har vist, at CNV forekommer med betydelig hyppighed i parathyroidtumorer, herunder adenomer. CNV-vurdering kan give uafhængig verifikation af et X-inaktiveringsbaseret fund af polyklonalitet ved at identificere heterogen CNV i en tumorprøve, der indikerer polyklonalitet eller mere ensartet CNV, der afspejler monoklonalitet. Tilfælde med uoverensstemmende resultater (estimeret <10%) fra HUMARA- og CNV-assays vil blive grundigt undersøgt i de eksplorative mål.

De-identificerede patologiske data, herunder antallet og vægten af ​​unormale kirtler fjernet fra deltagerne, vil blive registreret på lokale undersøgelsessteder og indtastet i en REDCap-database, der vedligeholdes på WU. Efterforskerne vil derefter gennemgå operative og patologiske rapporter for korrelation af tumorklonalitet og tilstedeværelsen af ​​enkeltkirtelneoplasi (SGN) eller multipelkirtelneoplasi (MGN). I tilfælde af MGN vil efterforskerne udføre ms-PCR af HUMARA-alleller på alle resekerede tumorer for at vurdere for overensstemmelse mellem klonalitet. Efterforskerne vil også bestemme virkningen af ​​to almindelige kirurgiske tilgange på resultater i tumorer med forskellig klonal status. Hyppigheden af ​​MGN stratificeret efter tumorklonalitet vil blive undersøgt hos deltagere, der gennemgår UNE med ioPTH-monitorering og sammenlignet BNE. Operations- og patologirapporter vil blive gennemgået samt ioPTH-niveauer tegnet før og både 5 og 10 minutter (PTH T1/2 = 5 min.) efter tumorfjernelse. Underliggende tumorklonalitet vil blive bestemt som beskrevet ovenfor og vil blive sammenlignet med patologiske resultater (MGN versus SGN) såvel som ioPTH-kinetik (% fald fra præ-op PTH-niveauer 5 og 10 minutter efter endelig tumorfjernelse).

For at definere forholdet mellem parathyroid tumor klonal status og biokemiske resultater efter PTX for PHPT, vil efterforskerne sammenligne baseline kliniske træk, kirurgiske/patologiske fund og postoperative biokemiske resultater efter PTX med tumor klonal status i en stor, multicenter kohorte af deltagere med PTX. I alt 645 deltagere med kendt tumorklonal status vil have standard kliniske og biokemiske data (serumcalcium, albumin, intakt PTH, 25(OH)D og kreatinin) registreret ved baseline (før PTX) og efter 2 uger, 3 måneder , og 6 måneder efter PTX (ikke alle laboratorier registreres ved hvert opfølgningstidspunkt). Forskerne vil sammenligne hyppigheden af ​​forhøjet PTH (ePTH) på hvert tidspunkt hos deltagere med monoklonale X- og polyklonale X-tumorer. Efterforskerne har tidligere vist, at D-vitaminstatus påvirker ePTH efter PTX. For at undersøge unormal vitamin D-metabolisme, den mest almindelige mekanisme for sekundær hyperparathyroidisme som årsag til polyklonal-X-sygdom, vil efterforskerne også udføre en omfattende analyse af vitamin D-status i en undergruppe af 111 WUSM-deltagere med monoklonal-X og polyklonal-X tumorer. Vores analyse vil omfatte biokemiske indeks for vitamin D-metabolisme (25-hydroxyvitamin D, 1,25-dihydroxyvitamin D og vitamin D bindende proteinniveauer).