Estado clonal del tumor de paratiroides

Para definir la frecuencia de los tumores monoclonal-X y policlonal-X en participantes con hiperparatiroidismo primario (HPPT) sometidos a paratiroidectomía (PTX) y para definir la relación entre el estado clonal del tumor paratiroideo y la neoplasia de glándulas múltiples (MGN), los investigadores compararán los resultados quirúrgicos y patológicos. resultados del estado clonal del tumor en una cohorte multicéntrica de participantes sometidos a exploración bilateral del cuello (BNE) y PTX.

Los participantes del estudio serán reclutados de cuatro centros de alto volumen en la Universidad de Washington en St. Louis (WU), la Universidad de California en San Francisco, la Universidad de Alabama-Birmingham y la Universidad de Pensilvania. Los participantes elegibles recibirán tratamiento de atención estándar (paratiroidectomía) y muestras tumorales fijadas en formalina e incluidas en parafina (FFPE) no identificadas (teñidas y no teñidas de cada glándula anormal) se enviarán a WU para su estudio. El ADN se extraerá de muestras FFPE y el ensayo HUMARA se realizará de acuerdo con nuestro protocolo establecido. Nuestros dos estudios publicados muestran una concordancia >90 % entre ensayos HUMARA replicados del mismo tumor. Para mayor rigor, se analizarán dos regiones de cada tumor de forma independiente para garantizar la concordancia del estado clonal. Los tumores en los que la llamada de clonalidad de las dos muestras intratumorales sea discordante se registrarán como tales, y los investigadores realizarán análisis de sensibilidad, con el fin, en su caso, de asignar uno u otro estado clonal a dichas muestras.

Además, los investigadores emplearán un ensayo secundario (matriz Cytoscan HD, ThermoFisher) para evaluar la variación del número de copias de ADN (CNV) en un conjunto aleatorio de muestras de 58 casos de policlonal-X y 49 casos de monoclonal-X (un total estimado de 107 ensayos). Los datos publicados y no publicados han demostrado que la CNV ocurre con una frecuencia considerable en los tumores paratiroideos, incluidos los adenomas. La evaluación de CNV puede proporcionar una verificación independiente de un hallazgo de policlonalidad basado en la inactivación de X al identificar CNV heterogéneo dentro de una muestra de tumor que indica policlonalidad, o CNV más uniforme que refleja monoclonalidad. Los casos con resultados discordantes (estimados <10 %) de los ensayos HUMARA y CNV se estudiarán exhaustivamente en los objetivos exploratorios.

Los datos patológicos no identificados, incluido el número y el peso de las glándulas anormales extraídas de los participantes, se registrarán en los sitios de estudio locales y se ingresarán en una base de datos REDCap mantenida en WU. Luego, los investigadores revisarán los informes operativos y patológicos para determinar la correlación entre la clonalidad del tumor y la presencia de neoplasia de glándula única (SGN) o neoplasia de glándula múltiple (MGN). En casos de GNM, los investigadores realizarán ms-PCR de alelos HUMARA en todos los tumores resecados para evaluar la concordancia de la clonalidad. Los investigadores también determinarán el impacto de dos enfoques quirúrgicos comunes sobre los resultados en tumores de diferente estado clonal. Se examinará la frecuencia de MGN estratificada por clonalidad tumoral en participantes que se sometan a UNE con monitorización de ioPTH y BNE comparada. Se revisarán los informes operatorios y de patología, así como los niveles de ioPTH antes y tanto a los 5 como a los 10 minutos (PTH T1/2 = 5 min.) después de la extirpación del tumor. La clonalidad del tumor subyacente se determinará como se describió anteriormente y se comparará con los resultados patológicos (MGN versus SGN), así como con la cinética de ioPTH (% de disminución de los niveles de PTH preoperatorios a los 5 y 10 minutos después de la extirpación final del tumor).

Para definir la relación entre el estado clonal del tumor paratiroideo y los resultados bioquímicos después de la PTX para el HPTP, los investigadores compararán las características clínicas iniciales, los hallazgos quirúrgicos/patológicos y los resultados bioquímicos posoperatorios después de la PTX con el estado clonal del tumor en una gran cohorte multicéntrica de participantes que tienen PTX. Un total de 645 participantes con estado clonal tumoral conocido tendrán datos clínicos y bioquímicos estándar (calcio sérico, albúmina, PTH intacta, 25(OH)D y creatinina) registrados al inicio (antes de la PTX) y a las 2 semanas, 3 meses , y 6 meses después de la PTX (no todos los laboratorios se registran en cada momento de seguimiento). Los investigadores compararán la frecuencia de PTH elevada (ePTH) en cada momento en participantes con tumores monoclonal-X y policlonal-X. Los investigadores han demostrado previamente que el estado de la vitamina D afecta la ePTH después de la PTX. Para investigar el metabolismo anormal de la vitamina D, el mecanismo más común del hiperparatiroidismo secundario como causa de la enfermedad policlonal-X, los investigadores también realizarán un análisis exhaustivo del estado de la vitamina D en un subconjunto de 111 participantes de WUSM con monoclonal-X y policlonal-X. tumores Nuestro análisis incluirá índices bioquímicos del metabolismo de la vitamina D (25-hidroxivitamina D, 1,25-dihidroxivitamina D y niveles de proteína fijadora de vitamina D).