甲状旁腺肿瘤克隆状态

为了确定接受甲状旁腺切除术（PTX）的原发性甲状旁腺功能亢进（PHPT）参与者中单克隆-X和多克隆-X肿瘤的频率，并确定甲状旁腺肿瘤克隆状态与多发性腺瘤（MGN）之间的关系，研究人员将比较手术和病理进行双侧颈部探查 (BNE) 和 PTX 的多中心参与者队列中肿瘤克隆状态的结果。

研究参与者将从圣路易斯华盛顿大学 (WU)、加州大学旧金山分校、阿拉巴马大学伯明翰分校和宾夕法尼亚大学的四个大容量中心招募。 符合条件的参与者将接受标准护理治疗（甲状旁腺切除术），并且将去识别的福尔马林固定石蜡包埋 (FFPE) 肿瘤样本（来自每个异常腺体的染色和未染色）发送到 WU 进行研究。 将从 FFPE 样品中提取 DNA，并根据我们既定的方案进行 HUMARA 测定。 我们发表的两项研究显示，同一肿瘤的重复 HUMARA 检测之间的一致性 >90%。 为了更加严格，每个肿瘤的两个区域将进行独立分析，以确保克隆状态的一致性。 两个肿瘤内样本的克隆性调用不一致的肿瘤将被记录下来，研究人员将进行敏感性分析，以达到相关的目的，将一种或另一种克隆状态分配给这些样本。

此外，研究人员将采用二次检测（Cytoscan HD 阵列，ThermoFisher）来评估来自 58 个多克隆 X 病例和 49 个单克隆 X 病例（估计总共 107 次检测）的随机样本组中的 DNA 拷贝数变异 (CNV)。 已发表和未发表的数据表明，CNV 在甲状旁腺肿瘤（包括腺瘤）中发生的频率相当高。 CNV 评估可以通过识别肿瘤样本中指示多克隆性的异质 CNV 或反映单克隆性的更均匀 CNV，为基于 X 失活的多克隆性发现提供独立验证。 HUMARA 和 CNV 检测结果不一致（估计<10%）的病例将在探索性目标中进行全面研究。

去识别的病理数据，包括从参与者身上摘除的异常腺体的数量和重量，将在当地研究地点进行记录，并输入到 WU 维护的 REDCap 数据库中。 然后，研究人员将审查手术和病理报告，以了解肿瘤克隆性与单腺瘤形成 (SGN) 或多发腺瘤形成 (MGN) 存在的相关性。 在 MGN 病例中，研究人员将对所有切除的肿瘤进行 HUMARA 等位基因的 ms-PCR，以评估克隆性的一致性。 研究人员还将确定两种常见手术方法对不同克隆状态肿瘤结果的影响。 将在接受 UNE 和 ioPTH 监测的参与者中检查按肿瘤克隆性分层的 MGN 频率，并比较 BNE。 将审查手术和病理报告以及之前 5 分钟和 10 分钟（PTH T1/2 = 5 分钟）绘制的 ioPTH 水平。 肿瘤切除后。 将如上所述确定基础肿瘤克隆性，并将其与病理结果（MGN 与 SGN）以及 ioPTH 动力学（最终肿瘤切除后 5 分钟和 10 分钟时与术前 PTH 水平相比下降的百分比）进行比较。

为了确定甲状旁腺肿瘤克隆状态与 PHPT PTX 后生化结果之间的关系，研究人员将在一个大型多中心 PTX 参与者队列中比较 PTX 后的基线临床特征、手术/病理结果和术后生化结果与肿瘤克隆状态。 总共 645 名已知肿瘤克隆状态的参与者将在基线（PTX 之前）以及 2 周、3 个月时记录标准临床和生化数据（血清钙、白蛋白、完整 PTH、25(OH)D 和肌酐） ，以及 PTX 后 6 个月（并非所有实验室都在每个随访时间点进行记录）。 研究人员将比较单克隆 X 肿瘤和多克隆 X 肿瘤参与者在每个时间点 PTH (ePTH) 升高的频率。 研究人员此前已表明维生素 D 状态会影响 PTX 后的 ePTH。 为了调查维生素 D 代谢异常（继发性甲状旁腺功能亢进症作为多克隆 X 疾病的最常见机制），研究人员还将对 111 名患有单克隆 X 和多克隆 X 的 WUSM 参与者的子集进行维生素 D 状态的全面分析肿瘤。 我们的分析将包括维生素 D 代谢的生化指标（25-羟基维生素 D、1,25-二羟基维生素 D 和维生素 D 结合蛋白水平）。