Stato clonale del tumore paratiroideo

Per definire la frequenza dei tumori monoclonali-X e policlonali-X nei partecipanti all'iperparatiroidismo primario (PHPT) sottoposti a paratiroidectomia (PTX) e per definire la relazione tra lo stato clonale del tumore paratiroideo e la neoplasia della ghiandola multipla (MGN), i ricercatori confronteranno chirurgia e patologia esiti sullo stato clonale del tumore in una coorte multicentrica di partecipanti con esplorazione bilaterale del collo (BNE) e PTX.

I partecipanti allo studio saranno reclutati da quattro centri ad alto volume presso la Washington University di St. Louis (WU), l'Università della California di San Francisco, l'Università dell'Alabama-Birmingham e l'Università della Pennsylvania. I partecipanti idonei riceveranno un trattamento standard di cura (paratiroidectomia) e campioni di tumore non identificati fissati in formalina e inclusi in paraffina (FFPE) (colorati e non colorati da ciascuna ghiandola anormale) verranno inviati a WU per lo studio. Il DNA sarà estratto dai campioni FFPE e il test HUMARA sarà eseguito secondo il nostro protocollo stabilito. I nostri due studi pubblicati mostrano una concordanza superiore al 90% tra i dosaggi HUMARA replicati dello stesso tumore. Per ulteriore rigore, due regioni di ciascun tumore saranno analizzate indipendentemente per garantire la concordanza dello stato clonale. I tumori in cui la chiamata di clonalità dai due campioni all'interno del tumore sono discordanti saranno registrati come tali, e gli investigatori eseguiranno analisi di sensibilità, per scopi ove ciò sia rilevante, di assegnare l'uno o l'altro stato clonale a questi campioni.

Inoltre, i ricercatori impiegheranno un test secondario (Cytoscan HD array, ThermoFisher) per valutare la variazione del numero di copie del DNA (CNV) in un set casuale di campioni da 58 casi policlonali-X e 49 casi monoclonali-X (stimati 107 saggi totali). Dati pubblicati e non pubblicati hanno dimostrato che la CNV si verifica con notevole frequenza nei tumori paratiroidei, compresi gli adenomi. La valutazione del CNV può fornire una verifica indipendente di un riscontro di policlonalità basato sull'inattivazione dell'X identificando il CNV eterogeneo all'interno di un campione tumorale che indica la policlonalità o il CNV più uniforme che riflette la monoclonalità. I casi con risultati discordanti (stimati <10%) dai saggi HUMARA e CNV saranno studiati in modo completo negli obiettivi esplorativi.

I dati patologici anonimizzati, incluso il numero e il peso delle ghiandole anormali rimosse dai partecipanti, saranno registrati nei siti di studio locali e inseriti in un database REDCap gestito presso WU. Gli investigatori esamineranno quindi i rapporti operativi e patologici per la correlazione della clonalità del tumore e la presenza di neoplasia a ghiandola singola (SGN) o neoplasia a ghiandola multipla (MGN). Nei casi di MGN gli investigatori eseguiranno ms-PCR degli alleli HUMARA su tutti i tumori resecati per valutare la concordanza della clonalità. Gli investigatori determineranno anche l'impatto di due approcci chirurgici comuni sugli esiti nei tumori di diverso stato clonale. La frequenza di MGN stratificata per clonalità tumorale sarà esaminata nei partecipanti sottoposti a UNE con monitoraggio ioPTH e confrontata con BNE. Verranno esaminati i rapporti operativi e patologici, nonché i livelli di ioPTH tracciati prima e sia 5 che 10 minuti (PTH T1/2 = 5 min.) dopo la rimozione del tumore. La clonalità del tumore sottostante sarà determinata come descritto sopra e sarà confrontata con i risultati patologici (MGN contro SGN), così come la cinetica ioPTH (% di declino dai livelli preoperatori di PTH a 5 e 10 minuti dopo la rimozione finale del tumore).

Per definire la relazione tra lo stato clonale del tumore paratiroideo e gli esiti biochimici dopo PTX per PHPT, i ricercatori confronteranno le caratteristiche cliniche di base, i risultati chirurgici / patologici e gli esiti biochimici postoperatori dopo PTX con lo stato clonale tumorale in un'ampia coorte multicentrica di partecipanti con PTX. Un totale di 645 partecipanti con stato clonale tumorale noto avrà dati clinici e biochimici standard (calcio sierico, albumina, PTH intatto, 25 (OH) D e creatinina) registrati al basale (prima del PTX) e a 2 settimane, 3 mesi e 6 mesi dopo il PTX (non tutti i laboratori vengono registrati a ogni punto temporale del follow-up). Gli investigatori confronteranno la frequenza di PTH elevato (ePTH) in ogni momento nei partecipanti con tumori monoclonali-X e policlonali-X. I ricercatori hanno precedentemente dimostrato che lo stato della vitamina D influisce sull'ePTH dopo il PTX. Per studiare il metabolismo anormale della vitamina D, il meccanismo più comune dell'iperparatiroidismo secondario come causa della malattia policlonale-X, i ricercatori eseguiranno anche un'analisi completa dello stato della vitamina D in un sottogruppo di 111 partecipanti WUSM con monoclonale-X e policlonale-X tumori. La nostra analisi includerà gli indici biochimici del metabolismo della vitamina D (25-idrossivitamina D, 1,25-diidrossivitamina D e livelli di proteina legante la vitamina D).