副甲状腺腫瘍のクローン状態

副甲状腺切除術（PTX）を受けた原発性副甲状腺機能亢進症（PHPT）参加者におけるモノクローナルX腫瘍およびポリクローナルX腫瘍の頻度を明らかにするため、また副甲状腺腫瘍のクローン状態と多発性腺腫瘍（MGN）との関係を明らかにするために、研究者らは外科的腫瘍と病理学的腫瘍を比較する予定である。両側頸部探索（BNE）およびPTXを受けた参加者の多施設コホートにおける腫瘍クローン状態の結果。

研究参加者は、セントルイスのワシントン大学（WU）、カリフォルニア大学サンフランシスコ校、アラバマ大学バーミンガム校、ペンシルベニア大学の4つの大規模センターから募集される。 適格な参加者は標準治療（副甲状腺切除術）を受け、匿名化されたホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）腫瘍サンプル（各異常腺の染色済みおよび未染色）が研究のためにWUに送られます。 DNA は FFPE サンプルから抽出され、確立されたプロトコールに従って HUMARA アッセイが実行されます。 私たちが発表した 2 つの研究では、同じ腫瘍の反復 HUMARA アッセイ間で 90% 以上の一致が示されています。 さらに厳密にするために、各腫瘍の 2 つの領域を独立してアッセイして、クローン状態の一致を確認します。 2つの腫瘍内サンプルからのクローン性コールが一致しない腫瘍は、そのように記録され、研究者は、これが関連する目的で、これらのサンプルに一方または他方のクローン状態を割り当てる感度分析を実行します。

さらに、研究者らは二次アッセイ (Cytoscan HD アレイ、ThermoFisher) を使用して、58 件のポリクローナル X 症例と 49 件のモノクローナル X 症例からのサンプルのランダムセットにおける DNA コピー数変動 (CNV) を評価します (合計 107 件のアッセイと推定)。 発表されたデータと未発表のデータは、CNV が腺腫を含む副甲状腺腫瘍でかなりの頻度で発生することを示しています。 CNV 評価は、ポリクローナリティを示す腫瘍サンプル内の不均一な CNV、またはモノクローナリティを反映するより均一な CNV を特定することにより、X 不活化に基づくポリクローナリティの所見を独立して検証できます。 HUMARA および CNV アッセイの結果が一致しない症例 (推定 <10%) は、探索目的で包括的に研究されます。

参加者から切除された異常な腺の数と重量を含む匿名化された病理学的データは、地元の研究施設で記録され、WU で維持される REDCap データベースに入力されます。 その後、治験責任医師は、腫瘍のクローン性と単腺腫瘍 (SGN) または複数腺腫瘍 (MGN) の存在との相関関係について、手術報告書および病理学的報告書を検討します。 MGN の場合、研究者はすべての切除腫瘍に対して HUMARA 対立遺伝子の ms-PCR を実行し、クローン性の一致を評価します。 研究者らはまた、異なるクローン状態の腫瘍の転帰に対する 2 つの一般的な外科的アプローチの影響を判断する予定です。 腫瘍クローン性によって層別化されたMGNの頻度は、ioPTHモニタリングを伴うUNEを受け、BNEと比較された参加者において検査される。 手術レポートと病理レポートは、5 分前と 10 分前に採取された ioPTH レベルと同様に検討されます (PTH T1/2 = 5 分)。 腫瘍切除後。 根底にある腫瘍のクローン性は上記のように決定され、病理学的結果（MGN 対 SGN）および ioPTH 動態（最終腫瘍除去後 5 分および 10 分における術前 PTH レベルからの減少率）と比較されます。

PHPTに対する副甲状腺腫瘍のクローン状態とPTX後の生化学的転帰との関係を定義するために、研究者らは、PTXを有する大規模な多施設コホートにおけるPTX後のベースラインの臨床的特徴、外科的/病理学的所見および術後の生化学的転帰を腫瘍のクローン状態と比較する。 腫瘍のクローン状態が既知の合計 645 人の参加者は、ベースライン (PTX 前) および 2 週間、3 か月後に標準的な臨床および生化学データ (血清カルシウム、アルブミン、インタクト PTH、25(OH)D、およびクレアチニン) を記録されます。 、PTX 後 6 か月 (各追跡時点ですべての検査が記録されているわけではありません)。 研究者らは、モノクローナル X 腫瘍とポリクローナル X 腫瘍を有する参加者における各時点での PTH (ePTH) 上昇の頻度を比較します。 研究者らは、ビタミンDの状態がPTX後のePTHに影響を与えることを以前に示している。 ポリクローナルX疾患の原因として二次性副甲状腺機能亢進症の最も一般的な機序であるビタミンD代謝の異常を調査するために、研究者らはまた、モノクローナルXおよびポリクローナルXを持つ111人のWUSM参加者のサブセットにおけるビタミンD状態の包括的な分析も実施する予定である。腫瘍。 私たちの分析には、ビタミン D 代謝の生化学的指標 (25-ヒドロキシビタミン D、1,25-ジヒドロキシビタミン D、およびビタミン D 結合タンパク質レベル) が含まれます。