Vliv zpracování řepkového proteinu na odezvu plazmatických aminokyselin (CANOLAA)

Aby bylo možné posoudit, zda jsou dobrovolníci způsobilí k účasti na této studii, pozve je zkoušející na univerzitu na screening. Na začátku screeningu bude vysvětlena celá experimentální studie a budou zodpovězeny případné otázky. Poté jsou dobrovolníci požádáni, aby si přečetli, vyplnili a podepsali formulář informovaného souhlasu. Po podepsání formuláře informovaného souhlasu bude způsobilost účastníka posouzena na základě kritérií pro zařazení a vyloučení. K dalšímu posouzení jejich způsobilosti budou účastníci požádáni, aby vyplnili lékařský dotazník k posouzení jejich celkového zdravotního stavu, užívání léků, obvyklého příjmu potravy a fyzické aktivity. Dále bude změřen krevní tlak. Stanoví se tělesná hmotnost (s přesností 0,1 kg) a výška (s přesností 0,01 m). Screeningová sezení se budou konat ráno a účastníci jsou instruováni, aby ráno nesnídali, aby se předešlo poruchám tělesné hmotnosti a případně i DEXA skenu. V případě neočekávaného lékařského nálezu během screeningu budou subjekty vždy upozorněny. Pokud si subjekt nepřeje dostávat toto oznámení, nemůže se studie zúčastnit. Po úspěšném provedení screeningu budou naplánovány testovací dny. Metabolismus bílkovin a aminokyselin u žen může být ovlivněn menstruačním cyklem. Proto budou experimentální testovací dny standardizovány v konkrétním období menstruačního cyklu. Testovací dny budou naplánovány na prvních 10 dní po začátku menstruace (1. den folikulární fáze), kdy jsou hladiny hormonů (tj. estrogenu) nízké. V praxi to znamená, že testovací dny budou naplánovány na základě menstruačního cyklu sledovaných. Proto mohou být v rámci 1 menstruačního cyklu provedeny 2 testovací dny (což umožňuje 2 dny mezi testovacími dny pro standardizaci) a další testovací dny budou naplánovány přibližně za 28 dní poté. To umožňuje výzkumníkům dokončit testování pro jednu účastnici v relativně krátkém časovém horizontu, přičemž stále berou v úvahu menstruační cyklus a doprovodné hormonální vlivy. Podobný přístup byl použit v naší laboratoři v předchozích studiích, které zahrnovaly mladé zdravé ženy (METC17-3-047 & METC19-087). Po celou dobu studie budou účastníci také na lačno podstupovat duální energetickou rentgenovou absorpciometrii (DEXA), aby se vyhodnotilo složení těla. Skenování DEXA je jednoduchý, neinvazivní postup. Na začátku procedury budou subjekty požádány, aby si lehly na skenovací stůl ve spodním prádle a během měření musí zůstat nehybné. Jak se skener pohybuje, duální energetický paprsek prochází cíleným úsekem kosterního svalstva a je měřen detektorem. Tento postup trvá přibližně 3 minuty. DEXA-scan poskytuje cenné informace o složení těla účastníků s minimální radiační zátěží.

Po úspěšném provedení screeningu bude naplánován testovací den. Aby se zabránilo velkému vlivu menstruačního cyklu na měření metabolismu bílkovin, bude testovací den naplánován na prvních 10 dnů folikulární fáze.

Každý subjekt se zúčastní 4 experimentálních testovacích dnů v délce ~5h. Subjekty budou instruovány, aby dorazily na univerzitu v 8:45 v noci nalačno a odpočívaly, což znamená, že účastníci nesmějí jíst a pít (kromě vody) od 22:00 v noci před experimentálním pokusem. Budou instruováni, aby přijeli na univerzitu autem nebo veřejnou dopravou. Poté, co subjekty dorazí na univerzitu, budou subjekty odpočívat v sedě a teflonový katétr bude zaveden do vyhřívané dorzální ruční žíly a umístěn do horkého boxu (60 °C) pro odběr arterializované krve. Základní vzorek krve (sérum + plazma = 20 ml) bude odebrán v t=0 min, aby se určily koncentrace aminokyselin před intervencí.

Poté subjekty požijí přidělený nápoj (20 g nativního řepkového proteinu, 20 g zpracovaného řepkového proteinu #1, 20 g zpracovaného kanolového proteinu #2 nebo 20 g syrovátkového proteinu). Subjekty budou instruovány, aby vypily nápoj do ~5 minut. Po požití nápoje se spustí stopky (t= 0 min) a vzorky arterializované krve (10 ml) budou odebírány v t = 15, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240 a 300 min. Během celého experimentálního testovacího dne bude ruka s dorzálním ručním katetrem předehřívána po dobu 10 minut před každým odběrem krve v horkém boxu při 60 °C, aby se zvýšil průtok krve. To usnadňuje odběr krve a minimalizuje výměnu živin z krve do jiných tkání. Proto umožňuje vyšetřovatelům odebírat z žíly krev bohatou na živiny (arterializovanou).

Během testovacího dne bude odebráno celkem 10 vzorků krve, první vzorek, který bude odebrán, bude mít 20 ml a další vzorky budou mít 10 ml, takže celkem 110 ml.

Kromě toho budou pomocí dotazníků hodnoceny gastrointestinální (GI) symptomy v čase t = 0, 30 a 180 minut a chutnost v čase t = 15 minut.