Impatto della lavorazione delle proteine ​​di canola sulle risposte degli aminoacidi plasmatici (CANOLAA)

Per valutare se i volontari sono idonei a partecipare a questo studio, il ricercatore li inviterà all'Università per uno screening. All'inizio della sessione di screening verrà spiegato l'intero studio sperimentale e verrà data risposta a eventuali domande. Successivamente, ai volontari viene chiesto di leggere, compilare e firmare il modulo di consenso informato. Dopo aver firmato il modulo di consenso informato, l'idoneità del partecipante sarà valutata in base ai criteri di inclusione ed esclusione. Per valutare ulteriormente la loro idoneità, ai partecipanti verrà chiesto di compilare un questionario medico per valutare la loro salute generale, l'uso di farmaci, l'assunzione abituale di cibo e l'attività fisica. Successivamente verrà valutata la pressione arteriosa. Verranno determinate la massa corporea (con precisione di 0,1 kg) e l'altezza (con precisione di 0,01 m). Le sessioni di screening si svolgeranno al mattino e ai partecipanti verrà chiesto di non fare colazione al mattino per evitare perturbazioni nel peso corporeo ed eventualmente nella scansione DEXA. In caso di riscontro medico inaspettato durante lo screening, i soggetti verranno sempre avvisati. Se un soggetto non desidera ricevere questa notifica, non potrà partecipare allo studio. Una volta eseguito con successo lo screening, verranno programmate le giornate di prova. Il metabolismo delle proteine ​​e degli aminoacidi nelle donne può essere influenzato dal ciclo mestruale. Pertanto, i giorni di prova sperimentale saranno standardizzati in un periodo specifico del ciclo mestruale. I giorni di test saranno pianificati nei primi 10 giorni dopo l'inizio delle mestruazioni (giorno 1 della fase follicolare), quando i livelli ormonali (cioè gli estrogeni) sono bassi. In pratica, ciò significa che i giorni di prova verranno pianificati in base al ciclo mestruale delle soggetti. Pertanto, è possibile eseguire 2 giorni di test nell'ambito di 1 ciclo mestruale (lasciando 2 giorni tra i giorni di test per la standardizzazione) e ulteriori giorni di test saranno pianificati circa 28 giorni dopo. Ciò consente ai ricercatori di terminare il test per un singolo partecipante in un periodo di tempo relativamente breve, tenendo comunque in considerazione il ciclo mestruale e le relative influenze ormonali. Un approccio simile è stato utilizzato nel nostro laboratorio in studi precedenti che includevano giovani donne sane (METC17-3-047 e METC19-087). Durante tutto il periodo di studio, i partecipanti verranno sottoposti anche a una scansione DEXA (Dual Energy X-ray Absorptiometry) a digiuno per valutare la composizione corporea. Una scansione DEXA è una procedura semplice e non invasiva. All'inizio della procedura, ai soggetti verrà chiesto di sdraiarsi su un tavolo di scansione indossando biancheria intima e dovranno rimanere immobili durante le misurazioni. Mentre lo scanner si muove, un doppio raggio di energia passa attraverso la sezione del muscolo scheletrico target e viene misurato da un rilevatore. Questa procedura richiede circa 3 minuti. La scansione DEXA fornisce informazioni preziose sulla composizione corporea dei partecipanti, con un carico di radiazioni minimo.

Una volta eseguito con successo lo screening, verrà programmata la giornata del test. Per evitare un impatto maggiore del ciclo mestruale sulle misurazioni del metabolismo proteico, il giorno del test verrà programmato nei primi 10 giorni della fase follicolare.

Ciascun soggetto parteciperà a 4 giornate di test sperimentali della durata di ~5h. Ai soggetti verrà chiesto di arrivare all'università alle 8:45 in uno stato di digiuno e riposo durante la notte, il che significa che ai partecipanti non è consentito mangiare e bere (ad eccezione dell'acqua) dalle 22:00 della notte prima della prova sperimentale. Verrà loro chiesto di venire all'università in auto o con i mezzi pubblici. Dopo che i soggetti arrivano all'Università, i soggetti riposeranno in posizione seduta e un catetere di Teflon verrà inserito in una vena dorsale riscaldata della mano e posto in una hot-box (60°C) per il prelievo di sangue arterializzato. Un campione di sangue basale (siero + plasma = 20 mL) verrà raccolto a t = 0 min per determinare le concentrazioni di aminoacidi prima dell'intervento.

Quindi, i soggetti ingeriranno la bevanda assegnata (20 g di proteine ​​di canola native, 20 g di proteine ​​di canola trasformate n. 1, 20 g di proteine ​​di canola trasformate n. 2 o 20 g di proteine ​​di siero di latte). Ai soggetti verrà chiesto di consumare la bevanda entro ~ 5 minuti. Dopo l'ingestione della bevanda, verrà avviato il cronometro (t = 0 min) e verranno raccolti campioni di sangue arterializzato (10 ml) a t = 15, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240 e 300 min. Durante l'intera giornata di test sperimentale, la mano con il catetere dorsale verrà preriscaldata per 10 minuti prima di ogni prelievo di sangue in una scatola calda a 60°C per aumentare il flusso sanguigno. Ciò rende più semplice la raccolta del sangue e riduce al minimo lo scambio di nutrienti dal sangue ad altri tessuti. Pertanto, consente agli investigatori di raccogliere sangue ricco di sostanze nutritive (arterializzato) da una vena.

In totale verranno prelevati 10 campioni di sangue durante il giorno del test, il primo campione che verrà raccolto sarà di 20 ml e i campioni successivi saranno di 10 ml, per un totale di 110 ml.

Inoltre, i sintomi gastrointestinali (GI) saranno valutati a t = 0, 30 e 180 minuti e l'appetibilità a t = 15 minuti mediante questionari.