Wpływ przetwarzania białka rzepaku na reakcje aminokwasowe w osoczu (CANOLAA)

Aby ocenić, czy ochotnicy kwalifikują się do udziału w tym badaniu, badacz zaprosi ich na Uniwersytet na badanie przesiewowe. Na początku sesji przesiewowej zostanie wyjaśniony cały przebieg badania eksperymentalnego i udzielone zostaną odpowiedzi na wszelkie potencjalne pytania. Następnie wolontariusze proszeni są o przeczytanie, wypełnienie i podpisanie formularza świadomej zgody. Po podpisaniu formularza świadomej zgody kwalifikowalność uczestnika zostanie oceniona na podstawie kryteriów włączenia i wykluczenia. Aby dokładniej ocenić, czy kwalifikują się do udziału w badaniu, uczestnicy zostaną poproszeni o wypełnienie kwestionariusza medycznego oceniającego ich ogólny stan zdrowia, stosowane leki, zwyczajowe spożywanie pokarmu i aktywność fizyczną. Następnie zostanie zbadane ciśnienie krwi. Określona zostanie masa ciała (z dokładnością do 0,1 kg) i wzrost (z dokładnością do 0,01 m). Sesje przesiewowe będą odbywać się rano, a uczestnicy są instruowani, aby nie spożywać rano śniadania, aby uniknąć zaburzeń masy ciała i ewentualnych zaburzeń w badaniu DEXA. W przypadku nieoczekiwanego odkrycia medycznego podczas badania przesiewowego, uczestnicy zostaną zawsze powiadomieni. Jeżeli pacjentka nie chce otrzymać tego powiadomienia, nie może uczestniczyć w badaniu. Po pomyślnym przeprowadzeniu badania przesiewowego zostaną wyznaczone dni badań. Cykl menstruacyjny może wpływać na metabolizm białek i aminokwasów u kobiet. Dlatego też dni badań eksperymentalnych zostaną ujednolicone w konkretnym okresie cyklu menstruacyjnego. Dni badania zostaną zaplanowane w ciągu pierwszych 10 dni po rozpoczęciu miesiączki (1. dzień fazy folikularnej), kiedy poziom hormonów (tj. estrogenu) jest niski. W praktyce oznacza to, że dni badania będą zaplanowane w oparciu o cykl menstruacyjny badanych. Dlatego też w ciągu 1 cyklu menstruacyjnego można przeprowadzić 2 dni testowe (pozwalając na 2 dni pomiędzy dniami testowymi w celu standaryzacji), a kolejne dni testowe zostaną zaplanowane około 28 dni później. Umożliwia to badaczom zakończenie badania pojedynczej uczestniczki w stosunkowo krótkim czasie, przy jednoczesnym uwzględnieniu cyklu miesiączkowego i towarzyszących mu wpływów hormonalnych. Podobne podejście zastosowano w naszym laboratorium w poprzednich badaniach obejmujących młode, zdrowe kobiety (METC17-3-047 i METC19-087). Przez cały okres badania uczestnicy będą również poddawani badaniu absorpcjometrii rentgenowskiej z podwójną energią (DEXA) na czczo w celu oceny składu ciała. Skan DEXA jest prostą i nieinwazyjną procedurą. Na początku badania pacjenci zostaną poproszeni o położenie się na stole skanującym w bieliźnie i podczas pomiarów muszą pozostać nieruchomi. Gdy skaner się porusza, wiązka podwójnej energii przechodzi przez docelowy odcinek mięśnia szkieletowego i jest mierzona przez detektor. Ta procedura trwa około 3 minut. Skan DEXA zapewnia cenny wgląd w skład ciała uczestników przy minimalnym obciążeniu promieniowaniem.

Po pomyślnym przeprowadzeniu badania przesiewowego zostanie wyznaczony dzień badania. Aby zapobiec dużemu wpływowi cyklu miesiączkowego na pomiary metabolizmu białek, dzień badania zostanie zaplanowany na pierwsze 10 dni fazy folikularnej.

Każdy uczestnik weźmie udział w 4 dniach testów eksperymentalnych trwających ~5h. Badani zostaną poinstruowani, aby przybyć na uniwersytet o godzinie 8:45 na czczo i wypoczętym, co oznacza, że ​​uczestnikom nie wolno jeść i pić (z wyjątkiem wody) od godziny 22:00 w noc poprzedzającą próbę eksperymentalną. Otrzymają polecenie przybycia na uczelnię samochodem lub komunikacją miejską. Po przybyciu pacjentów na Uniwersytet będą odpoczywać w pozycji siedzącej, a cewnik teflonowy zostanie wprowadzony do ogrzanej grzbietowej żyły dłoniowej i umieszczony w gorącej komorze (60°C) w celu pobrania krwi tętniczej. Wyjściowa próbka krwi (surowica + osocze = 20 ml) zostanie pobrana w czasie t = 0 minut w celu określenia stężenia aminokwasów przed interwencją.

Następnie badani spożywają przydzielony napój (20 g natywnego białka rzepaku, 20 g przetworzonego białka rzepaku nr 1, 20 g przetworzonego białka rzepaku nr 2 lub 20 g białka serwatki). Pacjenci zostaną poinstruowani, aby wypili napój w ciągu ~5 minut. Po spożyciu napoju zostanie uruchomiony stoper (t= 0 min), a próbki krwi tętniczej (10 ml) zostaną pobrane w t = 15, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240 i 300 min. Przez cały dzień badania eksperymentalnego dłoń z cewnikiem grzbietowym będzie wstępnie podgrzewana przez 10 minut przed każdym pobraniem krwi w gorącym pojemniku o temperaturze 60°C w celu zwiększenia przepływu krwi. Ułatwia to pobieranie krwi i minimalizuje wymianę składników odżywczych z krwi do innych tkanek. Umożliwia zatem badaczom pobranie z żyły bogatej w składniki odżywcze (arterializowanej) krwi.

W sumie w dniu badania zostaną pobrane 10 razy próbki krwi, pierwsza pobrana próbka będzie miała objętość 20 ml, a kolejne próbki będą miały objętość 10 ml, co daje w sumie 110 ml.

Dodatkowo za pomocą kwestionariuszy oceniane będą objawy żołądkowo-jelitowe (GI) po t = 0, 30 i 180 minutach, a smakowitość po t = 15 min.