Impacto do processamento da proteína de canola nas respostas de aminoácidos plasmáticos (CANOLAA)

Para avaliar se os voluntários são elegíveis para participar neste estudo, o investigador irá convidá-los para uma triagem na Universidade. No início da sessão de triagem, todo o ensaio experimental será explicado e quaisquer possíveis dúvidas serão respondidas. A partir daí, os voluntários são solicitados a ler, preencher e assinar o termo de consentimento livre e esclarecido. Após a assinatura do termo de consentimento livre e esclarecido, a elegibilidade do participante será avaliada com base nos critérios de entrada e exclusão. Para avaliar melhor sua elegibilidade, os participantes serão solicitados a preencher um questionário médico para avaliar sua saúde geral, uso de medicamentos, ingestão habitual de alimentos e atividade física. A seguir, a pressão arterial será avaliada. Serão determinadas a massa corporal (com precisão de 0,1 kg) e a altura (com precisão de 0,01 m). As sessões de triagem acontecerão pela manhã e os participantes são orientados a não tomar café da manhã para evitar perturbações no peso corporal e possivelmente no exame DEXA. No caso de um achado médico inesperado durante a triagem, os sujeitos serão sempre notificados. Se um sujeito não quiser receber esta notificação, ele não poderá participar do estudo. Quando a triagem for realizada com sucesso, os dias de teste serão agendados. O metabolismo de proteínas e aminoácidos nas mulheres pode ser influenciado pelo ciclo menstrual. Portanto, os dias de testes experimentais serão padronizados em um período específico do ciclo menstrual. Os dias de teste serão planejados nos primeiros 10 dias após o início da menstruação (dia 1 da fase folicular), quando os níveis de hormônios (ou seja, estrogênio) estão baixos. Na prática, isso significa que os dias de teste serão planejados com base no ciclo menstrual das participantes. Portanto, 2 dias de teste podem ser realizados dentro de 1 ciclo menstrual (permitindo 2 dias entre os dias de teste para padronização) e outros dias de teste serão planejados aproximadamente 28 dias depois. Isso permite que os investigadores concluam os testes para um único participante dentro de um período de tempo relativamente curto, ao mesmo tempo em que levam em consideração o ciclo menstrual e as influências hormonais que o acompanham. Uma abordagem semelhante foi utilizada em nosso laboratório em estudos anteriores que incluíram mulheres jovens saudáveis ​​(METC17-3-047 e METC19-087). Ao longo do período do estudo, os participantes também serão submetidos a uma absorciometria de raios X de dupla energia (DEXA) em jejum para avaliar a composição corporal. Uma varredura DEXA é um procedimento simples e não invasivo. No início do procedimento, os sujeitos serão solicitados a se deitarem em uma mesa de digitalização vestindo roupas íntimas e permanecerem imóveis durante as medições. À medida que o scanner se move, um feixe de energia duplo passa pela seção do músculo esquelético alvo e é medido por um detector. Este procedimento leva aproximadamente 3 minutos. A varredura DEXA fornece informações valiosas sobre a composição corporal dos participantes, com carga mínima de radiação.

Quando a triagem for realizada com sucesso, o dia do teste será agendado. Para evitar grandes impactos do ciclo menstrual nas medidas do metabolismo proteico, o dia do teste será agendado para ocorrer nos primeiros 10 dias da fase folicular.

Cada sujeito participará de 4 dias de teste experimental com duração de aproximadamente 5h. Os participantes serão instruídos a chegar à universidade às 8h45 em jejum e repouso durante a noite, o que significa que os participantes não estão autorizados a comer e beber (exceto água) a partir das 22h da noite anterior ao ensaio experimental. Eles serão instruídos a vir para a universidade de carro ou transporte público. Após a chegada dos sujeitos à Universidade, os sujeitos descansarão na posição sentada e um cateter de Teflon será inserido em uma veia dorsal aquecida da mão e colocado em uma caixa quente (60°C) para coleta de sangue arterializado. Uma amostra de sangue basal (soro + plasma = 20 mL) será coletada em t = 0 min para determinar as concentrações de aminoácidos antes da intervenção.

Em seguida, os participantes ingerirão a bebida designada (20g de proteína de canola nativa, 20g de proteína de canola processada nº 1, 20g de proteína de canola processada nº 2 ou 20g de proteína de soro de leite). Os indivíduos serão instruídos a consumir a bebida dentro de aproximadamente 5 min. Após a ingestão da bebida, o cronômetro será acionado (t = 0 min), e amostras de sangue arterializado (10mL) serão coletadas nos t = 15, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240 e 300 min. Durante todo o dia do teste experimental, a mão com o cateter dorsal será pré-aquecida por 10 minutos antes de cada coleta de sangue em uma caixa quente a 60°C para aumentar o fluxo sanguíneo. Isto facilita a coleta de sangue e minimiza a troca de nutrientes do sangue para outros tecidos. Portanto, permite que os investigadores coletem sangue rico em nutrientes (arterializado) de uma veia.

No total serão coletadas 10 amostras de sangue durante o dia do teste, a primeira amostra que será coletada será de 20mL e as amostras subsequentes serão de 10mL, perfazendo um total de 110mL.

Além disso, os sintomas gastrointestinais (GI) serão avaliados em t = 0, 30 e 180 minutos e a palatabilidade em t = 15 min por meio de questionários.