Canola-proteiinin prosessoinnin vaikutus plasman aminohappovasteisiin (CANOLAA)

Arvioidakseen, ovatko vapaaehtoiset oikeutettuja osallistumaan tähän tutkimukseen, tutkija kutsuu heidät yliopistoon seulontaan. Seulontaistunnon alussa koko kokeellinen koe selitetään ja mahdollisiin kysymyksiin vastataan. Sen jälkeen vapaaehtoisia pyydetään lukemaan, täyttämään ja allekirjoittamaan tietoinen suostumuslomake. Tietoisen suostumuslomakkeen allekirjoittamisen jälkeen osallistujan kelpoisuus arvioidaan osallistumis- ja poissulkemiskriteerien perusteella. Kelpoisuuden arvioimiseksi edelleen osallistujia pyydetään täyttämään lääketieteellinen kysely, jossa arvioidaan heidän yleistä terveyttään, lääkkeiden käyttöä, tavanomaista ravinnonsaantia ja fyysistä aktiivisuutta. Seuraavaksi mitataan verenpaine. Ruumiinpaino (0,1 kg:n tarkkuudella) ja pituus (0,01 m tarkkuudella) määritetään. Seulontaistunnot pidetään aamulla ja osallistujia kehotetaan olemaan syömättä aamiaista aamulla, jotta vältytään painon ja mahdollisesti DEXA-skannauksen häiriintymiseltä. Jos seulonnan aikana tulee odottamaton lääketieteellinen löydös, koehenkilöille ilmoitetaan aina. Jos tutkittava ei halua saada tätä ilmoitusta, hän ei voi osallistua tutkimukseen. Kun seulonta on suoritettu onnistuneesti, sovitaan testipäivät. Kuukautiskierto voi vaikuttaa naisten proteiini- ja aminohappoaineenvaihduntaan. Siksi kokeelliset testipäivät standardoidaan kuukautiskierron tietyssä jaksossa. Testipäivät suunnitellaan ensimmäisten 10 päivän aikana kuukautisten alkamisen jälkeen (follikulaarisen vaiheen 1. päivä), jolloin hormonitasot (eli estrogeeni) ovat alhaiset. Käytännössä tämä tarkoittaa, että testipäivät suunnitellaan koehenkilöiden kuukautiskierron perusteella. Siksi yhden kuukautiskierron sisällä voidaan tehdä 2 testipäivää (jolloin testipäivien välillä on 2 päivää standardointia varten), ja lisää testipäiviä suunnitellaan noin 28 päivän kuluttua sen jälkeen. Tämän ansiosta tutkijat voivat suorittaa yhden osallistujan testauksen loppuun suhteellisen lyhyessä ajassa ottaen kuitenkin huomioon kuukautiskierron ja siihen liittyvät hormonaaliset vaikutukset. Samanlaista lähestymistapaa käytettiin laboratoriossamme aiemmissa tutkimuksissa, joihin osallistui nuoria terveitä naisia ​​(METC17-3-047 & METC19-087). Koko tutkimusjakson ajan osallistujille tehdään myös paastonnetut Dual Energy X-ray Absorptiometry (DEXA) -skannaukset kehon koostumuksen arvioimiseksi. DEXA-skannaus on yksinkertainen, ei-invasiivinen toimenpide. Toimenpiteen alussa koehenkilöitä pyydetään makaamaan skannauspöydälle alusvaatteet päällä ja heidän tulee pysyä liikkumattomina mittausten aikana. Kun skanneri liikkuu, kaksoisenergiasäde kulkee kohdistetun luurankolihasosan läpi ja sen mittaa detektori. Tämä toimenpide kestää noin 3 minuuttia. DEXA-skannaus antaa arvokasta tietoa osallistujien kehon koostumuksesta minimaalisella säteilykuormalla.

Kun seulonta on suoritettu onnistuneesti, sovitaan testipäivä. Jotta kuukautiskierto ei vaikuttaisi merkittävästi proteiiniaineenvaihdunnan mittauksiin, testipäivä ajoitetaan follikulaarisen vaiheen 10 ensimmäisen päivän aikana.

Jokainen koehenkilö osallistuu 4 kokeelliseen testipäivään, jotka kestävät ~5 tuntia. Koehenkilöt ohjataan saapumaan yliopistoon kello 8.45 yön yli paastona ja levossa, mikä tarkoittaa, että osallistujat eivät saa syödä ja juoda (paitsi vettä) kokeellistä koetta edeltävänä iltana klo 22.00 alkaen. Heitä ohjataan tulemaan yliopistoon autolla tai julkisilla kulkuvälineillä. Kun tutkittavat saapuvat yliopistoon, koehenkilöt lepäävät istuma-asennossa ja teflonkatetri asetetaan lämmitettyyn selkäsuoneen ja sijoitetaan kuumalaatikkoon (60°C) valtimoverinäytteitä varten. Perusverinäyte (seerumi + plasma = 20 ml) kerätään t = 0 min aminohappopitoisuuksien määrittämiseksi ennen toimenpidettä.

Sitten koehenkilöt nauttivat määrätyn juoman (20 g luonnollista rapsiproteiinia, 20 g prosessoitua rapsiproteiinia nro 1, 20 g prosessoitua rapsiproteiinia nro 2 tai 20 g heraproteiinia). Koehenkilöitä neuvotaan nauttimaan juoma ~5 minuutin sisällä. Juoman nauttimisen jälkeen sekuntikello käynnistyy (t = 0 min) ja valtimoverinäytteet (10 ml) otetaan t = 15, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240 ja 300 min kohdalla. Koko kokeellisen testipäivän aikana kättä, jossa on dorsaalinen käsikatetri, esilämmitetään 10 minuuttia ennen jokaista verenottoa kuumassa laatikossa 60 °C:ssa verenkierron lisäämiseksi. Tämä helpottaa veren keräämistä ja minimoi ravinteiden vaihdon verestä muihin kudoksiin. Siksi sen avulla tutkijat voivat kerätä ravintorikasta (arterialisoitua) verta laskimosta.

Testipäivän aikana otetaan verinäytteitä yhteensä 10 kertaa, ensimmäinen kerättävä näyte on 20 ml ja seuraavat näytteet 10 ml, eli yhteensä 110 ml.

Lisäksi maha-suolikanavan (GI) oireet arvioidaan t = 0, 30 ja 180 minuutin kohdalla ja makuaisti t = 15 minuutin kohdalla kyselylomakkeilla.