Vliv časově omezeného stravování na výsledky spojené se syndromem polycystických vaječníků

Do studie bude přijato 52 žen ve věku 18-40 let. Velikost vzorku jsme vypočítali pomocí softwaru G*Power (RRID:SCR_013726); velikost vzorku účastníků byla také stanovena v souladu s Li et al. 2021. Velikost účinku byla vypočtena na 1,04 na základě rozdílů v množství tělesného tuku mezi výchozími hodnotami a hodnotami po 6 týdnech aplikace časově omezeného stravování ženami s PCOS. Při hodnotě alfa 0,05 by velikost vzorku osmi myší na skupinu poskytla mocninu 0,95.

Ženám vybraným do studie budou poskytnuty podrobné informace týkající se: účelu studie, protokolu studie, provedených měření a doby trvání studie. Nábor bude probíhat přes stránky sociálních sítí, tzn. Facebook, kde se najdou cílové skupiny sdružující ženy s PCOS a budou tam umístěny příspěvky s oznámením a kontaktním formulářem. Po získání souhlasu s účastí ve studii podstoupí skupina kvalifikovaných žen všeobecný lékařský pohovor s Jakubem Noskiewiczem, Ph.D., který bude zahrnovat osobní pohovor, včetně aktuálně užívaných léků a doplňků stravy, anamnézy a základního fyzikálního vyšetření - zkouška, perkuse. Pokud pohovor odhalí existující infekci, chronické onemocnění v akutní fázi, podezření např. anémie, infekční kožní onemocnění nebo podvýživa nebo příjem léků tvořících vylučovací kritérium, pacient nebude pro studii způsobilý. Během tohoto rozhovoru budou účastníci požádáni, aby poskytli lékařskou dokumentaci potvrzující, že trpí PCOS.

Účastníci budou náhodně rozděleni (pomocí specializovaného programu) do dvou skupin – kontrolní a intervenční. Účastníci výzkumu zařazení do kontrolní skupiny obdrží dietní doporučení v souladu s talířem zdravé výživy. Doporučený denní energetický příjem bude navíc stanoven individuálně pro každého pacienta. Účastníci zařazení do skupiny TRF budou instruováni, aby během experimentu pokračovali v jídle své obvyklé stravy (bez jakýchkoli kvalitativních nebo kvantitativních omezení), ale aby ji jedli v omezeném časovém rámci – od 9:00 do 17:00 a poté půst do druhého dne (protokol 8/16). Délka studie bude 3 měsíce (12 týdnů).

Bude provedeno nutriční posouzení stravy (dotazník KomPAN). Nutriční posouzení bude navíc doplněno pohovorem z posledních 24 hodin. Poté budou rekrutované ženy náhodně rozděleny do intervenční skupiny s časově omezenou výživou nebo do kontrolní skupiny podle zásad zdravého jídelního talíře. Doba trvání experimentu bude 12 týdnů, přičemž následné návštěvy budou naplánovány ve 4týdenních intervalech. Na začátku experimentu a při následných návštěvách bude ženám odebrána krev (na 18 ml) k posouzení biochemických parametrů. Pokaždé bude také odebrán vzorek stolice pro posouzení složení střevní mikrobioty a mastných kyselin s krátkým řetězcem a bude provedena analýza tělesného složení, hustoty kostí a antropometrických parametrů. Při poslední návštěvě ve 12. týdnu budou ženy opět požádány o vyplnění dotazníku KomPAN, který bude doplněn o rozhovor z posledních 24 hodin. Pokaždé bude veden rozhovor týkající se blaha žen a dodržování poskytnutých doporučení. Úroveň dodržování stravovacího okna bude ověřena pomocí deníku, do kterého si ženy každý den zapisují, kdy snědly první a poslední jídlo.

Byly naplánovány následující konkrétní analýzy:

• Posouzení antropometrických parametrů (tělesná hmotnost, výška, obvod pasu, obvod boků) a také tělesného složení a hustoty kostí.
• Hodnocení parametrů metabolismu sacharidů (koncentrace glukózy, inzulínu, výpočet HOMA-IR, HOMA-β, QUICKI), metabolismu lipidů (koncentrace celkového cholesterolu (T-C), LDL cholesterolu (LDL-C), HDL cholesterolu (HDL-C ), non-HDL cholesterol (non-HDL-C) a triglyceridy)
• Stanovení hormonálních parametrů (FSH, LH, testosteron, SHBG) a lipopolysacharidů v krvi.
• Stanovení neurohormonálních parametrů (kisspeptin, kyselina gama-aminomáselná) v krvi.
• Posouzení složení střevní mikrobioty a mastných kyselin s krátkým řetězcem ve stolici žen.

Normalita distribuce získaných dat bude testována pomocí Shapiro-Wilkova testu. Kruskal-Wallisův test pak bude použit pro nenormálně distribuovaná data a Tukey HSD test bude použit pro normálně distribuovaná data. Statisticky byla uvažována hodnota p menší než 0,05. Složení mikroflóry bude analyzováno pomocí RStudio (R verze 4.0.3 (2020-10-10)) s balíčky obsahujícími phyloseq, mikrobiom a vegan. Taxony budou filtrovány odstraněním všech taxonů, které nejsou přiřazeny k žádnému kmenu. V datovém souboru zůstanou pouze taxony s abundancemi nad 0,25 % v alespoň jednom vzorku. Všechny analýzy složení střevní mikroflóry budou prováděny na základě relativní abundance (RA) OTU.

Data shromážděná v plánovaných studiích budou zahrnovat výsledky měření a jejich statistické analýzy. Všechna data budou shromažďována přímo členy týmu a zakódována. Podrobné pokyny ke sběru dat připraví vedoucí týmu a každý člen si bude muset přečíst a absolvovat příslušné školení. Všechna biochemická a antropometrická měření budou provedena minimálně ve dvou opakováních a budou kontrolována dalším členem týmu. Všechna používaná specializovaná zařízení budou před každým použitím řádně zkalibrována (váha, analyzátor složení těla, spektrofotometr Nanodrop).