Účinnost a bezpečnost exozomů versus plazma bohatá na krevní destičky u pacientů s anderogenetickou alopecií

Androgenetická alopecie (AGA) je běžný stav, který postihuje až 50 procent mužů a žen. Je charakterizována progresivní ztrátou terminálních vlasů na temeni hlavy kdykoli po pubertě. Má velmi typické rozšíření u samců i samic. U mužů je ztráta vlasů většinou na vertexu a frontotemporálních oblastech, zatímco u žen je frontální vlasová linie většinou spojena s difúzním vypadáváním vlasů na temeni a temeni hlavy. V současné době jsou léčbami schválenými FDA topický minoxidil a perorální finasterid. Ale kvůli jeho nepříznivým účinkům většina pacientů odmítá tento lék užívat. Plazma bohatá na krevní destičky (PRP) je v současnosti účinná alternativní terapie používaná velmi běžně. PRP je autologní koncentrace krevních destiček, které mají ve svých alfa granulích více růstových faktorů, aplikované intradermálně do pokožky hlavy. Existuje další nově vznikající léčebná modalita, kterou jsou exosomy. Exozomy jsou 30-150nm extracelulární vezikuly (EV) odvozené z různých mezenchymálních kmenových buněk (MSC). Exozomy obsahují různé proteiny, nukleové kyseliny a různé buněčné mediátory a růstové faktory. Mají stejné biologické vlastnosti jako jejich rodičovská odvozená buňka spolu s výhodami malé velikosti, snadného pronikání biologickými membránami, nízké imunogenicity, snadného skladování a žádné tumorizace. V poslední době byly exosomy geneticky modifikovány tak, aby mohly vykazovat lepší terapeutické vlastnosti, jako jsou obohacené aktivní složky, cílené dodávání a fyziologická bariéra pro penetraci. Díky svým vlastnostem podporují růst vlasů. Exosomy poskytují slibné výsledky u pacientů s androgenní alopecií. PRP i exosomová terapie se ukázaly být účinné v různých studiích po celém světě. Speciálně ve světě je o srovnání těchto dvou léčebných modalit nalezeno velmi méně literatury.

Cílem výuky je porovnat účinnost a bezpečnost PRP a biogeneticky upravených exosomů u pacientů s androgenní alopecií.

Jde o randomizovanou klinickou studii probíhající na dermatologickém oddělení nemocnice služeb Lahore v Pákistánu. Po získání souhlasu rady pro etické hodnocení jsou zahrnuti všichni pacienti s androgenní alopecií ve věku mezi 18 a 70 lety a jakéhokoli pohlaví. Pacienti s poruchami krevních destiček, trombocytopenií a ti, kteří užívají antiagregační léčbu, jsou vyloučeni. Použití farmakologických terapeutik cílených na AGA jako Finasterid®, antiandrogeny, topický Minoxidil®, analogy prostaglandinu nebo imunokompromitované pacienty nejsou zahrnuty.

Hodnocení před ošetřením se provádí testem vytažení vlasů, globálním hodnocením lékařem, celkovým hodnocením pacienta a hustotou vlasů trichoskopií dotčených oblastí pokožky hlavy. Pacienti jsou náhodně rozděleni do dvou skupin metodou papírové loterie. Po regionální nervové blokádě za aseptických podmínek jsou pacientům skupiny A intradermálně injikovány exosomy v síle 2 až 10 miliard částic/5 ml v dávce 0,1 ml/cm2 pokožky hlavy a pacientům skupiny B je intradermálně do pokožky hlavy injikován PRP. Použité exozomy jsou GFCCELLTM EXO SCALP KIT. PRP se připravuje za aseptických opatření, ze střední kubitální žíly se odebere asi 10 ml krve a přenese se do zkumavky s citrátem sodným. Poté se zkumavky otáčejí v odstředivce při 1500 otáčkách za minutu po dobu 10 minut. Tato první centrifugace se nazývá "soft spin", která rozděluje krev do 2 vrstev: spodní RBC vrstva; horní acelulární vrstva plazmy, která je dále rozdělena na horní vrstvu, která obsahuje plazmu chudou na destičky, a spodní vrstvu, která obsahuje plazmu bohatou na destičky, také známou jako buffy coat. Buffy coat spolu s plazmou byly odebrány pipetou a přeneseny do jiné zkumavky. Tato zkumavka byla znovu podrobena druhé centrifugaci při 4000 ot./min po dobu 10 minut, nazývané "tvrdé odstřeďování". To umožňuje krevním destičkám usadit se na dně zkumavky. Jak horní vrstva obsahující plazmu chudou na destičky, tak spodní vrstva PRP byly shromážděny v další čisté zkumavce. Plazma se naplní do inzulínové stříkačky a poté se rovnoměrně vstříkne do postižených oblastí pokožky hlavy. Vícenásobné injekce PRP o objemu 0,1 ml byly podávány do každého místa v lineárním vzoru 1 cm od sebe. Pacienti jsou sledováni měsíčně po prvním léčebném sezení po dobu 6 měsíců. Primárními cílovými body účinnosti této studie jsou snížení vypadávání vlasů hodnocené pozitivním a negativním testem vytrhávání vlasů, opětovný růst vlasů hodnocený globálním hodnocením lékaře a celkové hodnocení pacientů na stupnici tři (<25 % jako uspokojivá, 25-50 % jako dobrá odpověď , >50 % jako vynikající odezva) a počet vlasů se vypočítá trichoskopií. Demografické údaje a parametry předúpravy se zaznamenávají na předem navržený proforma. Data se zadávají a analyzují pomocí SPSS vs 20.