Skuteczność i bezpieczeństwo egzosomów w porównaniu z osoczem bogatopłytkowym u pacjentów z łysieniem anderogennym

Łysienie androgenowe (AGA) to częsta przypadłość, która dotyka nawet 50 procent mężczyzn i kobiet. Charakteryzuje się postępującą utratą końcowych włosów na skórze głowy w dowolnym momencie po okresie dojrzewania. Ma bardzo typowy rozkład zarówno u mężczyzn, jak iu kobiet. U mężczyzn wypadanie włosów dotyczy głównie wierzchołków i okolic czołowo-skroniowych, podczas gdy u kobiet przednia linia włosów jest związana głównie z rozproszonym wypadaniem włosów na czubku głowy i czubku głowy. Obecnie zatwierdzonymi przez FDA terapiami są miejscowo stosowany minoksydyl i doustny finasteryd. Jednak ze względu na niekorzystne skutki większość pacjentów odmawia przyjmowania tego leku. Osocze bogatopłytkowe (PRP) jest obecnie skuteczną, bardzo powszechnie stosowaną terapią alternatywną. PRP to autologiczne stężenie płytek krwi zawierających wiele czynników wzrostu w granulkach alfa, wstrzykiwane śródskórnie w skórę głowy. Istnieje kolejna nowa metoda leczenia, którą są egzosomy. Egzosomy to pęcherzyki zewnątrzkomórkowe (EV) o długości 30–150 nm pochodzące z różnych mezenchymalnych komórek macierzystych (MSC). Egzosomy zawierają różne białka, kwasy nukleinowe oraz różne mediatory komórkowe i czynniki wzrostu. Mają takie same właściwości biologiczne jak komórki macierzyste, a także zalety: mały rozmiar, łatwe przenikanie przez błony biologiczne, niską immunogenność, łatwe przechowywanie i brak nowotworów. Niedawno egzosomy zostały zmodyfikowane genetycznie, dzięki czemu mogą wykazywać lepsze właściwości terapeutyczne, takie jak wzbogacone składniki aktywne, ukierunkowane dostarczanie i fizjologiczna bariera penetracji. Ze względu na swoje właściwości hamują porost włosów. Egzosomy dają obiecujące wyniki u pacjentów z łysieniem androgenowym. W różnych badaniach przeprowadzonych na całym świecie zarówno terapia PRP, jak i terapia egzosomami okazały się skuteczne. Szczególnie na świecie można znaleźć bardzo mało literatury na temat porównania tych dwóch metod leczenia.

Celem nauczania jest porównanie skuteczności i bezpieczeństwa PRP i egzosomów modyfikowanych biogenetycznie u pacjentów z łysieniem androgenowym.

Jest to randomizowane badanie kliniczne prowadzone na oddziale dermatologii szpitala usługowego Lahore w Pakistanie. Po uzyskaniu zgody Komisji ds. Przeglądu Etycznego do badania włączeni są wszyscy pacjenci z łysieniem androgenowym w wieku od 18 do 70 lat i dowolnej płci. Wykluczeni są pacjenci z zaburzeniami płytek krwi, małopłytkowością oraz stosujący terapię przeciwpłytkową. Do badania nie włączono stosowania leków farmakologicznych ukierunkowanych na AGA, takich jak finasteryd®, antyandrogeny, miejscowo stosowany Minoksydyl®, analogi prostaglandyn lub pacjenci z obniżoną odpornością.

Oceny przed leczeniem dokonuje się za pomocą testu wyrywania włosów, ogólnej oceny lekarza, ogólnej oceny pacjenta oraz gęstości włosów za pomocą trichoskopii dotkniętych obszarów skóry głowy. Pacjenci są losowo przydzielani do dwóch grup metodą loterii papierowej. Po regionalnej blokadzie nerwów w warunkach aseptycznych, pacjentom z grupy A wstrzykuje się śródskórnie egzosomy o stężeniu od 2 do 10 miliardów cząstek/5 ml, w dawce 0,1 ml/cm2 skóry głowy, a pacjentom z grupy B wstrzykuje się śródskórnie PRP w skórę głowy. Wykorzystane egzosomy to GFCCELLTM EXO SCALP KIT. PRP przygotowuje się z zachowaniem zasad aseptyki, około 10 ml krwi pobiera się z żyły pośrodkowej łokciowej i przenosi do probówki z cytrynianem sodu. Następnie probówki obraca się w wirówce przy 1500 obr./min przez 10 minut. To pierwsze wirowanie nazywa się „miękkim wirowaniem”, które dzieli krew na 2 warstwy: dolną warstwę krwinek czerwonych; górna warstwa osocza bezkomórkowego, która jest dalej podzielona na warstwę górną zawierającą osocze ubogopłytkowe i warstwę dolną zawierającą osocze bogatopłytkowe, zwane także kożuszkiem leukocytarnym. Kożuszek leukocytarny wraz z osoczem zebrano pipetą i przeniesiono do innej probówki. Probówkę tę ponownie poddano drugiemu wirowaniu przy 4000 obr./min. przez 10 minut, zwanemu „silnym wirowaniem”. Dzięki temu płytki krwi osiadają na dnie probówki. Zarówno górną warstwę zawierającą osocze ubogie w płytki krwi, jak i dolną warstwę PRP zebrano w innej czystej probówce. Osocze napełnia się strzykawką z insuliną, a następnie wstrzykuje równomiernie w dotknięte obszary skóry głowy. W każdym miejscu podano wielokrotne wstrzyknięcia PRP po 0,1 ml w układzie liniowym w odstępie 1 cm. Pacjenci są obserwowani co miesiąc po pierwszej sesji terapeutycznej przez 6 miesięcy. Głównymi punktami końcowymi skuteczności w tym badaniu są zmniejszenie wypadania włosów oceniane za pomocą dodatniego i ujemnego testu wyrywania włosów, odrastanie włosów oceniane na podstawie globalnej oceny lekarza i ogólnej oceny pacjenta w trzystopniowej skali (<25% jako zadowalające, 25–50% jako dobra odpowiedź , >50% jako doskonała odpowiedź), a liczbę włosów oblicza się metodą trichoskopii. Dane demograficzne i parametry obróbki wstępnej zapisywane są na wcześniej zaprojektowanej proformie. Dane wprowadza się i analizuje za pomocą SPSS vs 20.