SVF pro léčbu plicní fibrózy po COVID-19 (SVFCOVID-19)

Nedávné propuknutí koronaviru 2 (SARS-CoV-2) se rychle rozšířilo po celém světě, což má za následek globální pandemii s ničivými socioekonomickými důsledky. Poté, co Světová zdravotnická organizace (WHO) vyhlásila stav nouze v oblasti veřejného zdraví, existuje naléhavá potřeba vyvinout účinné terapeutické strategie pro kriticky nemocné pacienty s COVID-19. Tento nový virový kmen způsobuje komplexní onemocnění s širokou škálou prezentací, od mírných příznaků až po multiorgánové selhání. Společným znakem těžkých případů je patologicky komplexní „cytokinová bouře“, která se projevuje jako nadměrná imunitní odpověď s rychlou progresí onemocnění a vysokou mortalitou. Zejména závažné následky SARS CoV-2 jsou spojeny se zvýšenou hladinou C-reaktivního proteinu a interleukinu-6 v plicích. Infekce COVID-19 se může rychle dekompenzovat v těžké respirační selhání vyžadující intubaci a mechanickou ventilaci. Potřeba mechanické ventilace přináší špatnou prognózu s uváděnou úmrtností až 88 %.

Přeživší pneumonie COVID-19 čelí následkům svého onemocnění, které postihují více orgánových systémů. Zejména významný počet má přetrvávající problémy s dušností a sníženým okysličováním, což z dříve zdravých pacientů dělá virem vyvolané plicní mrzáky. Mechanismem toho je intenzivní zjizvení a destrukce mikrocirkulace nalezené v plicích pacientů, kteří přežili COVID-19. Existuje naléhavá potřeba vyvinout léčebné protokoly, které jsou schopné snížit stupeň plicní fibrózy a podporovat lokální angiogenezi pro lepší podporu poraněných alveol.

V posledních desetiletích se mezenchymální stromální buňky (MSC) objevily jako potenciální terapeutické činidlo pro buněčné terapie díky příznivým účinkům na imunomodulaci a opravu/regeneraci tkání. Tyto buňky mají jedinečné vlastnosti sebeobnovy a schopnosti diferencovat se do více linií. MSC se nacházejí v malém množství v kostní dřeni (BMSC) a tkáni pupeční šňůry. MSC se také nacházejí v tukové tkáni (označované jako ASC), kde existují jako součást mnohobuněčné populace, stromální vaskulární frakce (SVF). Populace ASC jsou o 500-1000 početnější než jejich protějšky z kostní dřeně.

Tuková tkáň poskytuje zdroj stromální vaskulární frakce (SVF), kterou lze izolovat a transplantovat pacientovi během stejného chirurgického zákroku v místě péče. SVF je heterogenní směs stromálních progenitorových buněk, pericytů, endoteliálních prekurzorových buněk a makrofágů. Při společném působení bylo prokázáno, že SVF má široké protizánětlivé a regenerační vlastnosti. Ukázalo se, že SVF je bezpečný po IV podání a vykazuje slibné výsledky při obnově respiračních funkcí u pacientů se závažnými plicními poruchami. Na základě veřejné analýzy dat jednobuněčného sekvenování RNA (scRNA-seq) SVF prokazuje nepřítomnost exprese ACE2, což naznačuje jeho potenciál jako rezistentní fenotyp vůči infekci SARS-CoV-2. V souhrnu je IV podávání SVF odvozeného z tukové tkáně prezentováno jako nový léčebný přístup ke zlepšení klinického výsledku pacientů s respiračním onemocněním COVID-19.

Klinický dopad SVF na COVID-19 je založen na 5 mechanismech účinku. Ty byly široce zdokumentovány (viz přiložené publikace a bibliografii).

Protizánětlivá Imunomodulace, zejména T-regs Antifibróza. Matrixové metaloproteinázy a jaterní růstový faktor. Podpora regenerativních buněčných populací in situ. Plicní astma studuje angiogenezi za ischemických podmínek na základě uvolňování VEGF.

Terapie SVF buňkami z tukové tkáně je výhodná, protože z malých objemů (30-90 ccm) lze odstranit velké množství buněk pomocí minimálně invazivní liposukce.

Indikace pro rozšířený přístup

Toto je studie s rozšířeným přístupem k léčbě malé skupiny subjektů s plicními následky po zotavení z pneumonie COVID-19 autologního SVF odvozeného z tukové tkáně podané pomocí jedné intravenózní injekce.

Cíle klinického výzkumu

Hlavní cíl

Posoudit bezpečnost jedné injekce autologního SVF odvozeného z tukové tkáně vyrobeného pomocí zařízení GID SVF-2 pro léčbu respirační tísně.

spojené s COVID-19.

Sekundární cíl

K posouzení účinnosti (1) udržením saturace SaO2 ≥ na stávající úrovni na neinvazivní podpoře kyslíkem, (2) dosažením snížení úrovně podpory kyslíku potřebné k udržení SaO2 ≥ 92 pomocí intravenózní injekce autologního SVF odvozeného z tukové tkáně vyrobeného za použití systém zařízení GID SVF-2 pro léčbu respiračních potíží spojených s COVID-19.

Předpokládaná doba trvání klinické zkoušky

Následné kontroly ve 3, 6, 9 a 12 měsících. Celková délka studia je 1 rok.

Klinický protokol

Studovat design

Obecný design studie

Toto je prospektivní, multicentrická intervenční studie s rozšířeným přístupem u subjektů s COVID-19. Bylo léčeno čtyřicet (40) subjektů s potvrzeným COVID-19 a SaO2 ≤ 92. Subjekty dostaly intravenózní injekci autologního SVF odvozeného z tukové tkáně. Subjekty budou sledovány po dobu 6 týdnů.

Studijní postupy

Detekční postupy

Počáteční hodnocení bylo provedeno v místním Centro de Salud. Subjekty byly poté odeslány do HEODRA nebo HECAM pro potvrzení diagnózy a další testy.

Doprovodné léky

Všechny souběžně podávané léky považované za standardní péči jsou akceptovány. Při každé následné návštěvě subjektu bude vyplněn formulář zprávy o případu souběžné medikace.

Shrnutí studijní léčby

40 nerandomizovaných pacientů bude léčeno autologní SVF. Minimální dávka: 45x106 ± 5x106 buněk Plán léčby: jednorázový zásah

Kontrolní vzorky séra (20 ccm) - zánětlivé faktory: 1 měsíc, 3 měsíce, 6 měsíců PFT + DLco: preop, 1 měsíc, 3 měsíce, 6 měsíců, týdny a 12 měsíců CT: preop, 3 měsíce, 6 měsíců, 12měsíční dotazník kvality života SF-36 SF-36 (Medical Outcomes Trust): předoperační, 12měsíční respirační dotazník SGRQ-C SGRQ-C (St. George's University): předoperační, 12 měsíců

Tuková tkáň subjektu bude získána liposukcí břicha nebo boků a umístěna přímo do zařízení GID SVF-2. Odebraná tuková tkáň bude enzymaticky štěpena ve stejném zařízení GID SVF-2 pomocí enzymu GIDZyme-2-70 a centrifugována ve stejném zařízení GID SVF-2, aby se koncentrovaly buňky SVF. Buňky SVF budou odstraněny a dávka aktivní léčby 45 x 106 (±5 x 106) buněk SVF bude injikována do 100 ml IV vaku obsahujícího LR. Tekutiny budou podávány IV katétrem přes krevní filtr po dobu 10 minut.

Dávkování

Příprava dávky

Pomocí LunaStem® Nucleocounter Cell Concentration and Dilution Factor 100 vypočítejte potřebný objem pomocí následující rovnice a přeneste toto množství resuspenze do 10ml injekční stříkačky.

#ml = dávka = 40 x 106 (+/- 5 x 106)

Podání dávky Způsob podání SVF pro vaskulární použití je stejný, ať už jde o intravenózní (IV) nebo intravenózní (IA).

Léčba byla podávána intravenózně pomocí intravenózního katétru s krevním filtrem.

Přidejte dávku do 100 ml sáčku LR zahřátého na 37 °C a dobře promíchejte. Podávejte 100 ml během 10 minut.

Dodržování léčby

Každý subjekt měl čas si přečíst formulář souhlasu a položit otázky týkající se studie před podpisem informovaného souhlasu. Subjekty by měly kontaktovat lékaře nebo personál, pokud má účastník během studie nějaké obavy. Bude zdůrazněno, že subjekt musí dodržovat protokol a být upřímný ohledně svých symptomů.

Odebrání subjektů za nedodržení

Subjekty mohou být ukončeny ze studie na základě uvážení hlavního zkoušejícího pouze z důvodů souvisejících se studijními zkouškami, které by ohrozily zdraví a/nebo pohodu subjektu, pokud by účastníci ve studii pokračovali. Subjekty mohou kdykoli dobrovolně odstoupit ze studie bez předsudků.

• Vyřazení jedinci nebudou nahrazeni, pokud účastník absolvoval studijní léčbu.

Harmonogram studijních pobytů

Prvotní vyhodnocení a informovaný souhlas probíhaly v nemocnicích. Před léčbou byly subjekty hodnoceny, aby se určilo, zda účastník splňuje kritéria pro zařazení/vyloučení. Pokud již nebyly poskytnuty, byly shromážděny demografické údaje, anamnéza, souběžné léky, SaO2 a arteriální krevní plyny. Subjekt byl zapsán, pokud účastník splnil všechna kritéria způsobilosti a podepsal informovaný souhlas.

Doba mezi zařazením a ošetřením nepřesáhla 48 hodin.

V den léčby byl každý subjekt znovu posouzen pro zařazení do studie.