SVF для лечения легочного фиброза после COVID-19 (SVFCOVID-19)

Недавняя вспышка коронавируса 2 (SARS-CoV-2) быстро распространилась по всему миру, что привело к глобальной пандемии с разрушительными социально-экономическими последствиями. После объявления Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) чрезвычайной ситуации в области общественного здравоохранения возникла острая необходимость в разработке эффективных терапевтических стратегий для пациентов с COVID-19, находящихся в критическом состоянии. Этот новый штамм вируса вызывает сложное заболевание с широким спектром проявлений: от легких симптомов до полиорганной недостаточности. Общей чертой тяжелых случаев является патологически сложный «цитокиновый шторм», который проявляется как чрезмерный иммунный ответ с быстрым прогрессированием заболевания и высокой смертностью. В частности, тяжелые исходы SARS CoV-2 связаны с повышенным уровнем С-реактивного белка и интерлейкина-6 в легких. Инфекция COVID-19 может быстро декомпенсировать тяжелую дыхательную недостаточность, требующую интубации и искусственной вентиляции легких. Потребность в искусственной вентиляции легких предвещает плохой прогноз: зарегистрированный уровень смертности достигает 88%.

Выжившие после пневмонии COVID-19 сталкиваются с последствиями заболевания, которые поражают несколько систем органов. В частности, у значительного числа пациентов продолжаются проблемы с одышкой и снижением оксигенации, что превращает ранее здоровых пациентов в вызванных вирусом легочных инвалидов. Механизмом этого является интенсивное рубцевание и разрушение микроциркуляции, обнаруженное в легких у перенесших Covid-19. Существует острая необходимость в разработке протоколов лечения, способных снизить степень легочного фиброза и стимулировать местный ангиогенез для лучшей поддержки поврежденных альвеол.

В последние десятилетия мезенхимальные стромальные клетки (МСК) стали потенциальным терапевтическим агентом для клеточной терапии благодаря благотворному влиянию на иммуномодуляцию и восстановление/регенерацию тканей. Эти клетки обладают уникальными свойствами самообновления и способностью дифференцироваться в несколько линий. МСК обнаруживаются в небольших количествах в костном мозге (КМСК) и ткани пуповины. МСК также обнаруживаются в жировой ткани (называемой АСК), где они существуют как часть многоклеточной популяции, стромально-сосудистой фракции (СВФ). Популяции ASC на 500-1000 более многочисленны, чем их костномозговые аналоги.

Жировая ткань является источником стромально-сосудистой фракции (СВФ), которую можно выделить и трансплантировать пациенту во время той же хирургической процедуры в месте оказания медицинской помощи. СВФ представляет собой гетерогенную смесь стромальных клеток-предшественников, перицитов, эндотелиальных клеток-предшественников и макрофагов. Было показано, что, действуя коллективно, СВФ обладает широкими противовоспалительными и регенеративными свойствами. Было показано, что СВФ безопасен после внутривенного введения и показал некоторые многообещающие результаты в восстановлении дыхательной функции у пациентов с тяжелыми заболеваниями легких. На основании общедоступного анализа данных секвенирования одноклеточной РНК (scRNA-seq) SVF демонстрирует отсутствие экспрессии ACE2, что указывает на его потенциал как фенотипа устойчивости к инфекции SARS-CoV-2. В совокупности внутривенное введение SVF, полученного из жировой ткани, представлено как новый подход к лечению, позволяющий улучшить клинические результаты у пациентов с респираторными нарушениями, вызванными COVID-19.

Клиническое воздействие СВФ на COVID-19 основано на 5 механизмах действия. Они широко документированы (см. прилагаемые публикации и библиографию).

Противовоспалительная иммуномодуляция, особенно Т-рег. Антифиброз. Матриксные металлопротеиназы и фактор роста печени. Поддержка регенеративных популяций клеток in situ. Легочная астма изучает ангиогенез в ишемических условиях, основанный на высвобождении VEGF.

Терапия клетками SVF из жировой ткани имеет преимущества, поскольку большое количество клеток можно удалить из небольших объемов (30–90 куб.см) с помощью минимально инвазивной процедуры липосакции.

Индикация расширенного доступа

Это исследование расширенного доступа для лечения небольшой группы пациентов с легочными последствиями после выздоровления от пневмонии, вызванной COVID-19, с использованием аутологичного СВФ, полученного из жировой ткани, в виде однократной внутривенной инъекции.

Цели клинических исследований

Главная цель

Оценить безопасность однократной инъекции аутологичного СВФ, полученного из жировой ткани, полученного с помощью устройства GID SVF-2, для лечения респираторного дистресс-синдрома.

связанные с COVID-19.

Вторичная цель

Для оценки эффективности путем (1) поддержания насыщения SaO2 ≥ на существующем уровне при неинвазивной кислородной поддержке, (2) достижения снижения уровня кислородной поддержки, необходимого для поддержания SaO2 ≥ 92, с помощью внутривенной инъекции аутологичного SVF, полученного из жировой ткани, полученного с использованием система устройств ГИД СВФ-2 для лечения респираторного дистресс-синдрома, связанного с COVID-19.

Ожидаемая продолжительность клинического исследования

Последующий контроль через 3, 6, 9 и 12 месяцев. Общая продолжительность обучения – 1 год.

Клинический протокол

Дизайн исследования

Общий дизайн исследования

Это проспективное многоцентровое интервенционное исследование расширенного доступа с участием пациентов с COVID-19. Лечение прошли сорок (40) субъектов с подтвержденным COVID-19 и SaO2 ≤ 92. Субъектам вводили внутривенную инъекцию аутологичного SVF, полученного из жировой ткани. За субъектами будут наблюдать в течение 6 недель.

Процедуры исследования

Процедуры обнаружения

Первоначальная оценка проводилась в местном Центре спасения. Затем субъектов направляли в HEODRA или HECAM для подтверждения диагноза и дополнительных тестов.

Сопутствующие препараты

Принимаются все сопутствующие лекарства, считающиеся стандартом лечения. Форма отчета о случае сопутствующего приема лекарств будет заполняться при каждом последующем визите субъекта.

Краткое описание исследуемого лечения

40 нерандомизированных пациентов будут лечиться аутологичным СВФ. Минимальная дозировка: 45x106 ± 5x106 клеток. План лечения: однократное вмешательство.

Контрольные образцы сыворотки (20 куб.см) – факторы воспаления: 1 месяц, 3 месяца, 6 месяцев PFT + DLco: до операции, 1 месяц, 3 месяца, 6 месяцев, недели и 12 месяцев КТ: до операции, 3 месяца, 6 месяцев, 12-месячный опросник качества жизни SF-36 SF-36 (Medical Outcomes Trust): предоперационный, 12-месячный респираторный опросник SGRQ-C SGRQ-C (St. Университет Джорджа): до операции, 12 месяцев.

Жировая ткань субъекта будет получена путем липосакции живота или боков и помещена непосредственно в устройство GID SVF-2. Собранную жировую ткань ферментативно расщепляют в том же устройстве GID SVF-2 с использованием фермента GIDZyme-2-70 и центрифугируют в том же устройстве GID SVF-2 для концентрирования клеток SVF. Клетки SVF будут удалены, и активная лечебная доза 45 x 106 (±5 x 106) клеток SVF будет введена в пакет для внутривенного вливания емкостью 100 мл, содержащий LR. Жидкости будут вводиться через внутривенный катетер через фильтр крови в течение 10 минут.

Дозировка

Приготовление дозы

Используя LunaStem® Nucleocounter «Концентрация клеток и коэффициент разведения 100», рассчитайте необходимый объем, используя следующее уравнение, и перенесите это количество ресуспензии в шприц емкостью 10 мл.

#мл = доза = 40 x 106 (+/- 5x106)

Введение дозы Способ введения SVF для сосудистого применения одинаков как внутривенный (IV), так и внутривенный (IA).

Лечение проводилось внутривенно с использованием внутривенного катетера с кровяным фильтром.

Добавьте дозу в пакетик LR емкостью 100 мл, нагретый до 37°C, и хорошо перемешайте. Вводить 100 мл в течение 10 минут.

Приверженность лечению

У каждого участника было время прочитать форму согласия и задать вопросы об исследовании, прежде чем подписать информированное согласие. Субъекты должны связаться с врачом или персоналом, если у участника возникнут какие-либо проблемы во время исследования. Будет подчеркнуто, что субъект должен соблюдать протокол и честно рассказывать о своих симптомах.

Отстранение субъектов за несоответствие

Субъекты могут быть исключены из исследования по усмотрению главного исследователя только по причинам, связанным с исследованиями исследования, которые могут поставить под угрозу здоровье и/или благополучие субъекта, если участники продолжат участие в исследовании. Субъекты могут добровольно выйти из исследования в любое время без ущерба для себя.

• Субъекты, исключенные из участия, не будут заменены, если участник получал исследуемое лечение.

График учебных визитов

Первоначальная оценка и информированное согласие проводились в больницах. Перед лечением субъектов оценивали, чтобы определить, соответствуют ли участники критериям включения/исключения. Если это еще не было предоставлено, собирались демографические данные, история болезни, сопутствующие лекарства, SaO2 и газы артериальной крови. Субъект был включен в исследование, если участник соответствовал всем критериям отбора и подписал информированное согласие.

Время между регистрацией и лечением не превышало 48 часов.

В день лечения каждого субъекта повторно оценивали для включения в исследование.