Odhalení patogeneze svědění při intrahepatální cholestáze těhotenství

Jako nejčastější onemocnění jater v těhotenství postihuje ICP celosvětově průměrně 4 % těhotných žen. V kohortové studii 12 200 vhodných čínských těhotných žen byla hlášená incidence ICP 6,06 %. ICP je škodlivý pro zdraví těhotných žen i plodů. U plodu ICP přímo ovlivňuje zdravý růst a bezproblémový porod plodu. Byly hlášeny nežádoucí příhody související s onemocněním, včetně předčasného porodu, kontaminace plodové vody mekoniem, hypoxie plodu, prodloužené doby pobytu na novorozeneckém oddělení a dokonce i narození mrtvého dítěte. ICP má vážný dopad na fyzické a duševní zdraví těhotných žen, typicky závažné svědění. Toto svědění se vyskytuje hlavně ve druhém a třetím trimestru těhotenství (obvykle ve třetím trimestru) a má tendenci se postupně zhoršovat, jak těhotenství postupuje. Nejčastěji se vyskytuje na dlaních a chodidlech a někteří pacienti mají celkové svědění. Navíc se svědění v noci zhoršilo, což vedlo k těžké nespavosti. Na pozadí prosazování vícečetných porodů u nás je zvláště důležitá účinná prevence a léčba těchto onemocnění.

V současné době neexistují účinné léky pro léčbu ICP, zejména symptomů svědění, protože molekulární mechanismus ICP a jeho svědění je stále nejasný. V této studii jsme na základě velkého počtu předchozích experimentů na buňkách a zvířatech identifikovali několik endogenních potenciálních pruritogenů, které mohou aktivovat lidský MRGPRX4, potenciální svědivý receptor ICP pruritu, ke zprostředkování ICP pruritu. Na základě objasnění mechanismu svědění tento projekt doufá, že poskytne nové biomarkery a nové perspektivy pro diagnostiku a dokonce predikci onemocnění v kombinaci s analýzou klinických vzorků. Monitorování zdravotního stavu a včasná intervence tak mohou být během těhotenství umožněny, aby byly klinicky přínosné pro výsledky léčby jak pacientky, tak dítěte. metody jsou následující:

① Charakterizovat dynamické změny progesteronsulfátů u pacientek s ICP během prvního, druhého a třetího trimestru těhotenství Ve spolupráci s týmy na Gynekologicko-porodnickém oddělení nemocnic budou odebírány vzorky krve těhotným ženám ve třech různých časech bodů během těhotenství (včetně zdravých těhotných žen a těhotných žen s ICP). Dotazník vyplní těhotné ženy ve třetím trimestru nebo telefonicky po porodu. Bude spočítán stupeň svědění u těhotných žen s ICP. Změny hladin progesteronsulfátu a stupeň svědění jsou charakterizovány progresí těhotenského cyklu. Pro analýzu složení metabolitů v plazmě jsme vyvinuli separační a kvantifikační metody založené na HPLC-MS se zaměřením na sledované metabolity/deriváty progesteronu, včetně následujících devíti sulfátů progesteronu: Isopregnanolon sulfát (3β5α) (PM5S), Epipregnanolon sulfát (3β5β ) (PM7S), pregnanolon sulfát (3α5β) (PM6S), allopregnanolon sulfát (3α5α) (PM4S), pregnandiol sulfát (3α5β) (PM3S), isopregnandiol sulfát (3β5α), 5β-pregnan-3α, 20α-diol-3, 20-disulfát (PM3DiS), 5α-pregnan-3α, 20α-diol-3, 20-disulfát (PM2DiS), pregnenolon sulfát a 17-hydroxypregnenolon sulfát. Vzorek plazmy o objemu 100 μl se smíchá s 425 μl methanolu a 10 minut se vortexuje. Po centrifugaci při 14 000 g po dobu 10 minut se supernatant přenese do nové zkumavky a před analýzou HPLC-MS se skladuje při -80 °C.

② Vyvinout diagnostické modely a modely včasné predikce pro příznaky ICP nebo svědění. Po získání dostatečného množství biologických vzorků a výsledků analýzy metabolitů plánujeme provést efektivní statistickou analýzu a dolování dat na základě údajů ze vzorků. S využitím dat souvisejících metabolitů v krvi pacientů s ICP a zdravých těhotných žen ve třetím trimestru bude analýza křivek provozních charakteristik přijímače (ROC) a logistický regresní model použita k nalezení jedné charakteristické molekuly metabolitu nebo kombinace několika molekul metabolitu. , který by mohl účinně odlišit pacienty s ICP od normálních těhotných žen a sloužit jako nový indikátor s vysokou přesností napomáhající klinické diagnostice ICP. Kromě toho na základě analýzy krevních vzorků v prvním a druhém trimestru očekáváme, že lze těžit charakteristické metabolity a dynamické změny v jejich hladinách mohou dokonce předpovědět pravděpodobnost ICP před nástupem příznaků ICP, aby bylo možné řídit provedení preventivních opatření v předstihu a případně snížení pravděpodobnosti nežádoucích událostí.