Svelare la patogenesi del prurito nella colestasi intraepatica della gravidanza

Essendo la malattia epatica più comune in gravidanza, l’ICP colpisce in media il 4% delle donne incinte in tutto il mondo. In uno studio di coorte su 12.200 donne cinesi incinte ammissibili, l'incidenza riportata di ICP è stata del 6,06%. L'ICP è dannoso per la salute sia delle donne in gravidanza che dei feti. Per il feto, l’ICP influisce direttamente sulla crescita sana e sul parto regolare del feto. Sono stati segnalati eventi avversi correlati alla malattia, tra cui parto pretermine, contaminazione da meconio del liquido amniotico, ipossia fetale, degenza prolungata nell'unità neonatale e persino nati morti. L'ICP ha un grave impatto sulla salute fisica e mentale delle donne in gravidanza, in genere un forte prurito. Questo prurito si manifesta soprattutto nel secondo e terzo trimestre di gravidanza (solitamente il terzo trimestre) e tende a peggiorare progressivamente con il progredire della gravidanza. È più comunemente presente sui palmi delle mani e sulle piante dei piedi e alcuni pazienti presentano prurito generalizzato. Inoltre, il prurito si aggravava durante la notte, provocando una grave insonnia. Nel contesto della promozione delle nascite multiple nel nostro Paese, la prevenzione e il trattamento efficaci di tali malattie sono particolarmente importanti.

Al momento non esistono farmaci efficaci per il trattamento della ICP, in particolare dei sintomi del prurito, poiché il meccanismo molecolare della ICP e del suo prurito non è ancora chiaro. In questo studio, abbiamo identificato diversi potenziali pruritogeni endogeni che possono attivare MRGPRX4 umano, il potenziale recettore del prurito del prurito ICP, per mediare il prurito ICP sulla base di un gran numero di precedenti esperimenti su cellule e animali. Basandosi sul chiarimento del meccanismo del prurito, questo progetto spera di fornire nuovi biomarcatori e nuove prospettive per la diagnosi e persino la previsione della malattia combinata con l'analisi di campioni clinici. Pertanto, il monitoraggio della salute e l’intervento precoce possono essere consentiti durante la gravidanza per favorire clinicamente l’esito del trattamento sia del paziente che del bambino. i metodi sono i seguenti:

① Caratterizzare i cambiamenti dinamici del progesterone solfato nei pazienti con ICP durante il primo, secondo e terzo trimestre di gravidanza. In collaborazione con i team del Dipartimento di Ostetricia e Ginecologia degli ospedali, verranno raccolti campioni di sangue da donne in gravidanza in tre momenti diversi punti durante la gravidanza (comprese le donne incinte sane e le donne incinte con ICP). Un questionario verrà compilato dalle donne incinte nel terzo trimestre o tramite follow-up telefonico dopo il parto. Verrà conteggiato il grado di prurito nelle donne in gravidanza con ICP. I cambiamenti dei livelli di progesterone solfato e il grado di prurito sono caratterizzati dalla progressione del ciclo di gravidanza. Per l'analisi della composizione dei metaboliti nel plasma, abbiamo sviluppato metodi di separazione e quantificazione basati su HPLC-MS, concentrandoci sui metaboliti/derivati ​​del progesterone di interesse, inclusi i seguenti nove solfati di progesterone: isopregnanolone solfato (3β5α) (PM5S), epipregnanolone solfato (3β5β ) (PM7S), pregnanolone solfato (3α5β) (PM6S), allopregnanolone solfato (3α5α) (PM4S), pregnandiolo solfato (3α5β) (PM3S), isopregnandiolo solfato (3β5α), 5β-pregnan-3α, 20α-diolo-3, 20-disolfato (PM3DiS), 5α-pregnan-3α, 20α-diolo-3, 20-disolfato (PM2DiS), pregnenolone solfato e 17-idrossipregnenolone solfato. Un campione di plasma da 100 μl viene miscelato con 425 μl di metanolo e agitato in vortex per 10 minuti. Dopo la centrifugazione a 14.000 g per 10 minuti, il surnatante viene trasferito in una nuova provetta e conservato a -80°C prima dell'analisi HPLC-MS.

② Sviluppare modelli diagnostici e di previsione precoce dei sintomi di ICP o prurito. Dopo aver ottenuto una quantità sufficiente di campioni biologici e i risultati dell'analisi dei metaboliti, prevediamo di condurre analisi statistiche efficaci e data mining basati sui dati del campione. Utilizzando i dati dei metaboliti correlati nel sangue dei pazienti con ICP e delle donne incinte sane nel terzo trimestre, l'analisi delle curve ROC (Receiver Operating Characteristic) e il modello di regressione logistica verranno utilizzati per trovare una singola molecola di metabolita caratteristica o una combinazione di diverse molecole di metaboliti , che potrebbe distinguere efficacemente i pazienti con ICP dalle normali donne in gravidanza e fungere da nuovo indicatore con elevata precisione per assistere la diagnosi clinica di ICP. Inoltre, sulla base dell'analisi di campioni di sangue nel primo e nel secondo trimestre, ci aspettiamo che i metaboliti caratteristici possano essere estratti e che i cambiamenti dinamici nei loro livelli possano persino predire la probabilità di ICP prima della comparsa dei sintomi di ICP, in modo da guidare l’attuazione di misure preventive in anticipo e possibilmente ridurre la probabilità di eventi avversi.