Desvendando a patogênese do prurido na colestase intra-hepática da gravidez

Sendo a doença hepática mais comum na gravidez, a PIC afecta uma média de 4% das mulheres grávidas em todo o mundo. Num estudo de coorte com 12.200 mulheres grávidas chinesas elegíveis, a incidência relatada de PIC foi de 6,06%. A PIC é prejudicial à saúde das mulheres grávidas e dos fetos. Para o feto, a PIC afeta diretamente o crescimento saudável e o parto tranquilo do feto. Foram relatados eventos adversos relacionados à doença, incluindo nascimento prematuro, contaminação meconial do líquido amniótico, hipóxia fetal, tempo prolongado de permanência na unidade neonatal e até mesmo natimorto. A PIC tem um sério impacto na saúde física e mental das mulheres grávidas, geralmente prurido grave. Essa coceira ocorre principalmente no segundo e terceiro trimestres da gravidez (geralmente no terceiro trimestre) e tende a piorar progressivamente à medida que a gravidez avança. Está mais comumente presente nas palmas das mãos e nas solas dos pés, e alguns pacientes apresentam coceira generalizada. Além disso, a coceira piorava à noite, causando insônia grave. No contexto da defesa da natalidade múltipla no nosso país, a prevenção e o tratamento eficazes de tais doenças são particularmente importantes.

Atualmente, não existem medicamentos eficazes para o tratamento da PIC, especialmente dos sintomas de prurido, porque o mecanismo molecular da PIC e do seu prurido ainda não está claro. Neste estudo, identificamos vários pruritogênios potenciais endógenos que podem ativar o MRGPRX4 humano, o potencial receptor de coceira do prurido da PIC, para mediar o prurido da PIC com base em um grande número de experimentos anteriores com células e animais. A partir do esclarecimento do mecanismo do prurido, este projeto espera fornecer novos biomarcadores e novas perspectivas para o diagnóstico e até mesmo predição da doença aliado à análise de amostras clínicas. Como tal, a monitorização da saúde e a intervenção precoce podem ser possibilitadas durante a gravidez para beneficiar clinicamente o resultado do tratamento tanto do paciente como da criança. os métodos são os seguintes:

① Caracterizar as mudanças dinâmicas dos sulfatos de progesterona em pacientes com PIC durante o primeiro, segundo e terceiro trimestres de gravidez. Em cooperação com equipes do Departamento de Obstetrícia e Ginecologia dos hospitais, amostras de sangue serão coletadas de mulheres grávidas em três momentos diferentes pontos durante a gravidez (incluindo mulheres grávidas saudáveis ​​e mulheres grávidas com PIC). Um questionário será preenchido pelas gestantes no terceiro trimestre ou por acompanhamento telefônico após o parto. Será contabilizado o grau de prurido em gestantes com PIC. As alterações nos níveis de sulfato de progesterona e no grau de prurido são caracterizadas pela progressão do ciclo gravídico. Para a análise da composição de metabólitos no plasma, desenvolvemos métodos de separação e quantificação baseados em HPLC-MS, com foco nos metabólitos/derivados de interesse da progesterona, incluindo os seguintes nove sulfatos de progesterona: Sulfato de isopregnanolona (3β5α) (PM5S), Sulfato de epipregnanolona (3β5β ) (PM7S), sulfato de pregnanolona (3α5β) (PM6S), sulfato de alopregnanolona (3α5α) (PM4S), sulfato de pregnanodiol (3α5β) (PM3S), sulfato de isopregnanodiol (3β5α), 5β-pregnan-3α, 20α-diol-3, 20-dissulfato (PM3DiS), 5α-pregnan-3α, 20α-diol-3, 20-dissulfato (PM2DiS), sulfato de pregnenolona e sulfato de 17-hidroxipregnenolona. Uma amostra de plasma de 100 μl é misturada com 425 μl de metanol e agitada em vórtex por 10 min. Após centrifugação a 14.000 g por 10 min, o sobrenadante é transferido para um novo tubo e armazenado a -80°C antes da análise por HPLC-MS.

② Desenvolver modelos de diagnóstico e predição precoce para PIC ou sintomas de prurido. Após obter uma quantidade suficiente de amostras biológicas e os resultados da análise de metabólitos, planejamos realizar análises estatísticas e mineração de dados eficazes com base nos dados da amostra. Usando os dados de metabólitos relacionados no sangue de pacientes com PIC e mulheres grávidas saudáveis ​​no terceiro trimestre, a análise das curvas Receiver Operating Characteristic (ROC) e o modelo de regressão logística serão usados ​​para encontrar uma única molécula de metabólito característica ou uma combinação de várias moléculas de metabólito , o que poderia efetivamente distinguir pacientes com PIC de gestantes normais e servir como um novo indicador com alta precisão para auxiliar no diagnóstico clínico de PIC. Além disso, com base na análise de amostras de sangue no primeiro e segundo trimestres, esperamos que metabólitos característicos possam ser extraídos, e as mudanças dinâmicas em seus níveis possam até prever a probabilidade de PIC antes do início dos sintomas de PIC, de modo a orientar a implementação de medidas preventivas antecipadamente e possivelmente reduzir a probabilidade de eventos adversos.