Desentrañando la patogénesis del prurito en la colestasis intrahepática del embarazo

Como la enfermedad relacionada con el hígado más común durante el embarazo, la PIC afecta a un promedio del 4% de las mujeres embarazadas en todo el mundo. En un estudio de cohorte de 12.200 mujeres embarazadas chinas elegibles, la incidencia informada de PIC fue del 6,06%. La PIC es perjudicial para la salud tanto de las mujeres embarazadas como de los fetos. Para el feto, la PIC afecta directamente el crecimiento saludable y el parto sin problemas. Se han informado eventos adversos relacionados con la enfermedad, incluido parto prematuro, contaminación por meconio del líquido amniótico, hipoxia fetal, estancia prolongada en la unidad neonatal e incluso muerte fetal. La PIC tiene un impacto grave en la salud física y mental de las mujeres embarazadas, típicamente prurito severo. Este picor se produce principalmente en el segundo y tercer trimestre del embarazo (normalmente el tercer trimestre) y tiende a empeorar progresivamente a medida que avanza el embarazo. Está presente con mayor frecuencia en las palmas y plantas de los pies y algunos pacientes presentan picazón generalizada. Además, el picor se agravaba por la noche, provocando un insomnio severo. En el contexto de la defensa de los nacimientos múltiples en nuestro país, la prevención y el tratamiento eficaces de dichas enfermedades son particularmente importantes.

En la actualidad, no existen fármacos eficaces para el tratamiento de la PIC, especialmente los síntomas del prurito, porque el mecanismo molecular de la PIC y su prurito aún no está claro. En este estudio, hemos identificado varios pruritogénicos potenciales endógenos que pueden activar el MRGPRX4 humano, el posible receptor de picazón del prurito de la PIC, para mediar el prurito de la PIC según una gran cantidad de experimentos previos con células y animales. A partir de aclarar el mecanismo del prurito, este proyecto espera proporcionar nuevos biomarcadores y nuevas perspectivas para el diagnóstico e incluso la predicción de la enfermedad combinados con el análisis de muestras clínicas. Como tal, el seguimiento de la salud y la intervención temprana pueden permitirse durante el embarazo para beneficiar clínicamente el resultado del tratamiento tanto del paciente como del niño. Los métodos son los siguientes:

① Caracterizar los cambios dinámicos de los sulfatos de progesterona en pacientes con PIC durante el primer, segundo y tercer trimestre del embarazo. En cooperación con los equipos del Departamento de Obstetricia y Ginecología de los hospitales, se recolectarán muestras de sangre de mujeres embarazadas en tres momentos diferentes. puntos durante el embarazo (incluidas mujeres embarazadas sanas y mujeres embarazadas con PIC). Las mujeres embarazadas completarán un cuestionario en el tercer trimestre o mediante seguimiento telefónico después del parto. Se contabilizará el grado de prurito en mujeres embarazadas con PIC. Los cambios en los niveles de sulfato de progesterona y el grado de prurito se caracterizan por la progresión del ciclo del embarazo. Para el análisis de la composición de metabolitos en plasma, desarrollamos métodos de separación y cuantificación basados ​​en HPLC-MS, centrándonos en los metabolitos/derivados de progesterona de interés, incluidos los siguientes nueve sulfatos de progesterona: sulfato de isopregnanolona (3β5α) (PM5S), sulfato de epipregnanolona (3β5β ) (PM7S), sulfato de pregnanolona (3α5β) (PM6S), sulfato de alopregnanolona (3α5α) (PM4S), sulfato de pregnanodiol (3α5β) (PM3S), sulfato de isopregnanodiol (3β5α), 5β-pregnan-3α, 20α-diol-3, 20-disulfato (PM3DiS), 5α-pregnan-3α, 20α-diol-3, 20-disulfato (PM2DiS), sulfato de pregnenolona y sulfato de 17-hidroxipregnenolona. Se mezcla una muestra de plasma de 100 µl con 425 µl de metanol y se agita durante 10 minutos. Después de la centrifugación a 14 000 g durante 10 min, el sobrenadante se transfiere a un tubo nuevo y se almacena a -80 °C antes del análisis por HPLC-MS.

② Desarrollar modelos de diagnóstico y predicción temprana de la PIC o síntomas de prurito. Después de obtener una cantidad suficiente de muestras biológicas y los resultados del análisis de metabolitos, planeamos realizar análisis estadísticos efectivos y extracción de datos basados ​​en los datos de la muestra. Utilizando los datos de metabolitos relacionados en la sangre de pacientes con PIC y mujeres embarazadas sanas en el tercer trimestre, se utilizará el análisis de curvas de características operativas del receptor (ROC) y el modelo de regresión logística para encontrar una única molécula de metabolito característica o una combinación de varias moléculas de metabolito. , que podría distinguir eficazmente a los pacientes con PIC de las mujeres embarazadas normales y servir como un nuevo indicador con alta precisión para ayudar al diagnóstico clínico de la PIC. Además, basándose en el análisis de muestras de sangre en el primer y segundo trimestre, esperamos que se puedan extraer metabolitos característicos y que los cambios dinámicos en sus niveles puedan incluso predecir la probabilidad de PIC antes de la aparición de los síntomas de PIC, para así guiar la implementación de medidas preventivas con antelación y posiblemente reducir la probabilidad de eventos adversos.