Odkrywanie patogenezy świądu w wewnątrzwątrobowej cholestazie ciężarnych

Jako najczęstsza choroba wątroby w ciąży, ICP dotyka średnio 4% kobiet w ciąży na całym świecie. W badaniu kohortowym obejmującym 12200 kwalifikujących się chińskich kobiet w ciąży, zgłoszona częstość występowania ICP wyniosła 6,06%. ICP jest szkodliwe dla zdrowia zarówno kobiet w ciąży, jak i płodów. W przypadku płodu ICP bezpośrednio wpływa na zdrowy wzrost i płynny poród płodu. Zgłaszano działania niepożądane związane z chorobą, w tym poród przedwczesny, zanieczyszczenie płynu owodniowego smółką, niedotlenienie płodu, przedłużony pobyt na oddziale noworodkowym, a nawet poród martwego dziecka. ICP ma poważny wpływ na zdrowie fizyczne i psychiczne kobiet w ciąży, zwykle powoduje silny świąd. Swędzenie to występuje głównie w drugim i trzecim trymestrze ciąży (zwykle w trzecim trymestrze) i ma tendencję do nasilania się w miarę postępu ciąży. Najczęściej występuje na dłoniach i podeszwach stóp, a u niektórych pacjentów występuje uogólniony świąd. Ponadto swędzenie nasilało się w nocy, co prowadziło do ciężkiej bezsenności. W kontekście propagowania w naszym kraju porodów mnogich, szczególnie istotna jest skuteczna profilaktyka i leczenie tego typu chorób.

Obecnie nie ma skutecznych leków do leczenia ICP, zwłaszcza objawów świądu, ponieważ mechanizm molekularny ICP i jego świądu jest nadal niejasny. W tym badaniu zidentyfikowaliśmy kilka endogennych potencjalnych czynników wywołujących świąd, które mogą aktywować ludzki MRGPRX4, potencjalny receptor swędzenia świądu ICP, w celu pośredniczenia w świądzie ICP, w oparciu o dużą liczbę wcześniejszych eksperymentów na komórkach i zwierzętach. Opierając się na wyjaśnieniu mechanizmu świądu, projekt ten ma nadzieję dostarczyć nowych biomarkerów i nowych perspektyw diagnozowania, a nawet przewidywania choroby w połączeniu z analizą próbek klinicznych. W związku z tym monitorowanie stanu zdrowia i wczesna interwencja mogą być możliwe w czasie ciąży, co przyniesie kliniczną poprawę wyników leczenia zarówno pacjentki, jak i dziecka. metody są następujące:

① Charakterystyka dynamicznych zmian siarczanów progesteronu u pacjentek z ICP w pierwszym, drugim i trzecim trymestrze ciąży. We współpracy z zespołami oddziału położniczo-ginekologicznego szpitali, próbki krwi będą pobierane od kobiet w ciąży w trzech różnych terminach punkty w czasie ciąży (w tym zdrowe kobiety w ciąży i kobiety w ciąży z ICP). Ankietę wypełniają kobiety w trzecim trymestrze ciąży lub podczas kontroli telefonicznej po porodzie. Uwzględniony zostanie stopień świądu u kobiet w ciąży z ICP. Zmiany poziomu siarczanu progesteronu i nasilenia świądu charakteryzują się postępem cyklu ciążowego. Do analizy składu metabolitów w osoczu opracowaliśmy metody separacji i oznaczania ilościowego oparte na HPLC-MS, koncentrując się na metabolitach/pochodnych progesteronu będących przedmiotem zainteresowania, w tym na następujących dziewięciu siarczanach progesteronu: siarczan izopregnanolonu (3β5α) (PM5S), siarczan epipregnanolonu (3β5β ) (PM7S), siarczan pregnanolonu (3α5β) (PM6S), siarczan allopregnanolonu (3α5α) (PM4S), siarczan pregnanodiolu (3α5β) (PM3S), siarczan izopregnanodiolu (3β5α), 5β-pregnan-3α, 20α-diol-3, 20-disiarczan (PM3DiS), 5α-pregnan-3α, 20α-diol-3,20-disiarczan (PM2DiS), siarczan pregnenolonu i siarczan 17-hydroksypregnenolonu. Próbkę osocza o objętości 100 µl miesza się z 425 µl metanolu i wiruje przez 10 minut. Po odwirowaniu przy 14 000 g przez 10 minut supernatant przenosi się do nowej probówki i przechowuje w temperaturze -80°C przed analizą HPLC-MS.

② Opracuj modele diagnostyczne i modele wczesnego przewidywania objawów ICP lub świądu. Po uzyskaniu wystarczającej ilości próbek biologicznych i wyników analizy metabolitów planujemy przeprowadzić skuteczną analizę statystyczną i eksplorację danych na podstawie danych próbki. Wykorzystując dane dotyczące powiązanych metabolitów we krwi pacjentów z ICP i zdrowych kobiet w ciąży w trzecim trymestrze ciąży, zostanie wykorzystana analiza krzywych charakterystyki operacyjnej odbiornika (ROC) i model regresji logistycznej w celu znalezienia pojedynczej charakterystycznej cząsteczki metabolitu lub kombinacji kilku cząsteczek metabolitu , które mogłoby skutecznie odróżnić pacjentki z ICP od zdrowych kobiet w ciąży i służyć jako nowy wskaźnik o dużej dokładności, pomocny w diagnostyce klinicznej ICP. Co więcej, na podstawie analizy próbek krwi w pierwszym i drugim trymestrze ciąży spodziewamy się, że możliwe będzie wydobycie charakterystycznych metabolitów, a dynamiczne zmiany w ich poziomach mogą nawet przewidzieć prawdopodobieństwo wystąpienia ICP przed wystąpieniem objawów ICP, tak aby ukierunkować wdrożenie środków zapobiegawczych z wyprzedzeniem i możliwie zmniejszenie prawdopodobieństwa wystąpienia zdarzeń niepożądanych.