Udredning af patogenesen af ​​pruritus i intrahepatisk kolestase af graviditet

Som den mest almindelige leverrelaterede sygdom i graviditeten påvirker ICP i gennemsnit 4% af gravide kvinder på verdensplan. I en kohorteundersøgelse af 12200 kvalificerede kinesiske gravide kvinder var den rapporterede forekomst af ICP 6,06 %. ICP er sundhedsskadeligt for både gravide og fostre. For fosteret påvirker ICP direkte den sunde vækst og glatte levering af fosteret. Sygdomsrelaterede uønskede hændelser er blevet rapporteret, herunder for tidlig fødsel, meconiumkontaminering af fostervand, føtal hypoxi, forlænget ophold i neonatalafdelingen og endda dødfødsel. ICP har en alvorlig indvirkning på den fysiske og mentale sundhed hos gravide kvinder, typisk svær kløe. Denne kløe opstår hovedsageligt i andet og tredje trimester af graviditeten (normalt tredje trimester) og har en tendens til at blive gradvist værre, efterhånden som graviditeten skrider frem. Det er oftest til stede på håndflader og fodsåler, og nogle patienter har generaliseret kløe. Desuden blev kløen forværret om natten, hvilket førte til alvorlig søvnløshed. På baggrund af fortaler for flere fødsler i vores land er effektiv forebyggelse og behandling af sådanne sygdomme særlig vigtig.

På nuværende tidspunkt er der ingen effektive lægemidler til behandling af ICP, især pruritussymptomer, fordi den molekylære mekanisme af ICP og dens kløe stadig er uklar. I denne undersøgelse har vi identificeret flere endogene potentielle pruritogener, der kan aktivere human MRGPRX4, den potentielle kløereceptor for ICP pruritus, til at mediere ICP pruritus baseret på et stort antal tidligere celle- og dyreforsøg. Baseret på at afklare kløemekanismen, håber dette projekt at give nye biomarkører og nye perspektiver til diagnosticering og endda forudsigelse af sygdommen kombineret med analyse af kliniske prøver. Som sådan kan helbredsovervågning og tidlig indgriben således aktiveres under graviditeten for at gavne behandlingsresultatet for både patienten og barnet klinisk. metoder er som følger:

① For at karakterisere de dynamiske ændringer af progesteronsulfater hos patienter med ICP i løbet af graviditetens første, andet og tredje trimester I samarbejde med teams i afdelingen for obstetrik og gynækologi på hospitaler, vil der blive indsamlet blodprøver fra gravide kvinder på tre forskellige tidspunkter point under graviditeten (inklusive raske gravide og gravide med ICP). Et spørgeskema vil blive udfyldt af de gravide i tredje trimester eller ved telefonisk opfølgning efter fødslen. Graden af ​​pruritus hos gravide kvinder med ICP tælles. Ændringerne af progesteronsulfatniveauer og graden af ​​kløe er karakteriseret ved progressionen af ​​graviditetscyklussen. Til analyse af metabolitsammensætning i plasma udviklede vi HPLC-MS-baserede separations- og kvantificeringsmetoder med fokus på progesteronmetabolitter/derivater af interesse, herunder følgende ni progesteronsulfater: Isopregnanolonsulfat (3β5α) (PM5S), Epipregnanolonsulfat (3β5β) ) (PM7S), Pregnanolonsulfat (3α5β) (PM6S), Allopregnanolonsulfat (3α5α) (PM4S), Pregnanediolsulfat (3α5β) (PM3S), Isopregnandiolsulfat (3β5α), 5β-pregnan-3-a, 2α-diol-30, 2a 20-disulfat (PM3DiS), 5a-pregnan-3a, 20a-diol-3, 20-disulfat (PM2DiS), Pregnenolonsulfat og 17-Hydroxypregnenolonsulfat. En 100 μl plasmaprøve blandes med 425 μl methanol og vortexes i 10 min. Efter centrifugering ved 14.000 g i 10 minutter overføres supernatanten til et nyt rør og opbevares ved -80°C før HPLC-MS-analyse.

② Udvikle diagnostiske og tidlige forudsigelsesmodeller for ICP- eller pruritussymptomer. Efter at have opnået en tilstrækkelig mængde biologiske prøver og metabolitanalyseresultaterne planlægger vi at udføre effektiv statistisk analyse og data mining baseret på prøvedataene. Ved at bruge data fra relaterede metabolitter i blodet hos ICP-patienter og raske gravide kvinder i tredje trimester, vil Receiver Operating Characteristic (ROC) kurveanalyse og logistisk regressionsmodel blive brugt til at finde et enkelt karakteristisk metabolitmolekyle eller en kombination af flere metabolitmolekyler , som effektivt kunne skelne ICP-patienter fra normale gravide kvinder og tjene som en ny indikator med høj nøjagtighed til at hjælpe den kliniske diagnose af ICP. Baseret på analysen af ​​blodprøver i første og andet trimester forventer vi endvidere, at karakteristiske metabolitter kan udvindes, og de dynamiske ændringer i deres niveauer kan endda forudsige sandsynligheden for ICP før starten af ​​ICP-symptomer, for at vejlede implementering af forebyggende foranstaltninger på forhånd og muligvis reducere sandsynligheden for uønskede hændelser.