Het ontrafelen van de pathogenese van pruritus bij intrahepatische cholestase tijdens de zwangerschap

ICP is de meest voorkomende levergerelateerde ziekte tijdens de zwangerschap en treft wereldwijd gemiddeld 4% van de zwangere vrouwen. In een cohortstudie onder 12.200 in aanmerking komende Chinese zwangere vrouwen bedroeg de gerapporteerde incidentie van ICP 6,06%. ICP is schadelijk voor de gezondheid van zowel zwangere vrouwen als foetussen. Voor de foetus heeft ICP rechtstreeks invloed op de gezonde groei en een vlotte bevalling van de foetus. Er zijn ziektegerelateerde bijwerkingen gemeld, waaronder vroeggeboorte, meconiumbesmetting van het vruchtwater, foetale hypoxie, langere verblijfsduur op de neonatale afdeling en zelfs doodgeboorte. ICP heeft ernstige gevolgen voor de lichamelijke en geestelijke gezondheid van zwangere vrouwen, doorgaans ernstige jeuk. Deze jeuk komt vooral voor in het tweede en derde trimester van de zwangerschap (meestal het derde trimester) en heeft de neiging steeds erger te worden naarmate de zwangerschap vordert. Het komt meestal voor op de handpalmen en voetzolen, en sommige patiënten hebben algemene jeuk. Bovendien werd de jeuk 's nachts verergerd, wat leidde tot ernstige slapeloosheid. Tegen de achtergrond van het bepleiten van meerlinggeboorten in ons land is de effectieve preventie en behandeling van dergelijke ziekten bijzonder belangrijk.

Op dit moment zijn er geen effectieve medicijnen voor de behandeling van ICP, vooral de symptomen van jeuk, omdat het moleculaire mechanisme van ICP en de jeuk ervan nog steeds onduidelijk is. In deze studie hebben we verschillende endogene potentiële pruritogenen geïdentificeerd die menselijk MRGPRX4, de potentiële jeukreceptor van ICP-pruritus, kunnen activeren om ICP-pruritus te mediëren op basis van een groot aantal eerdere cel- en dierexperimenten. Gebaseerd op het ophelderen van het mechanisme van jeuk, hoopt dit project nieuwe biomarkers en nieuwe perspectieven te bieden voor de diagnose en zelfs voorspelling van de ziekte, gecombineerd met de analyse van klinische monsters. Als zodanig kunnen gezondheidsmonitoring en vroegtijdige interventie tijdens de zwangerschap mogelijk worden gemaakt om de behandelresultaten van zowel de patiënt als het kind klinisch ten goede te komen. methoden zijn als volgt:

① Om de dynamische veranderingen van progesteronsulfaten bij patiënten met ICP tijdens het eerste, tweede en derde trimester van de zwangerschap te karakteriseren. In samenwerking met teams van de afdeling Verloskunde en Gynaecologie van ziekenhuizen zullen op drie verschillende tijdstippen bloedmonsters worden verzameld van zwangere vrouwen. punten tijdens de zwangerschap (inclusief gezonde zwangere vrouwen en zwangere vrouwen met ICP). Een vragenlijst wordt door de zwangere vrouw ingevuld in het derde trimester of telefonisch na de bevalling. De mate van jeuk bij zwangere vrouwen met ICP wordt geteld. De veranderingen in de progesteronsulfaatspiegels en de mate van jeuk worden gekenmerkt door de progressie van de zwangerschapscyclus. Voor de analyse van de metabolietensamenstelling in plasma hebben we op HPLC-MS gebaseerde scheidings- en kwantificatiemethoden ontwikkeld, waarbij we ons concentreren op de progesteronmetabolieten/derivaten van belang, waaronder de volgende negen progesteronsulfaten: isopregnanolonsulfaat (3β5α) (PM5S), epipregnanolonsulfaat (3β5β ) (PM7S), pregnanolonsulfaat (3α5β) (PM6S), allopregnanolonsulfaat (3α5α) (PM4S), pregnandiolsulfaat (3α5β) (PM3S), isopregnandiolsulfaat (3β5α), 5β-pregnan-3α, 20α-diol-3, 20-disulfaat (PM3DiS), 5α-pregnan-3α, 20α-diol-3, 20-disulfaat (PM2DiS), Pregnenolonesulfaat en 17-Hydroxypregnenolonesulfaat. Een plasmamonster van 100 μl wordt gemengd met 425 μl methanol en gedurende 10 minuten gewerveld. Na 10 minuten centrifugeren bij 14.000 g wordt het supernatant overgebracht naar een nieuwe buis en bewaard bij -80 ° C vóór HPLC-MS-analyse.

② Ontwikkel diagnostische en vroege voorspellingsmodellen voor ICP- of jeuksymptomen. Nadat we een voldoende hoeveelheid biologische monsters en de resultaten van de metabolietenanalyse hebben verkregen, zijn we van plan effectieve statistische analyses en datamining uit te voeren op basis van de monstergegevens. Gebruikmakend van de gegevens van gerelateerde metabolieten in het bloed van ICP-patiënten en gezonde zwangere vrouwen in het derde trimester, zullen Receiver Operating Characteristic (ROC) curves-analyse en logistisch regressiemodel worden gebruikt om een ​​enkel karakteristiek metabolietmolecuul of een combinatie van verschillende metabolietmoleculen te vinden. , die ICP-patiënten effectief zou kunnen onderscheiden van normale zwangere vrouwen, en zou kunnen dienen als een nieuwe indicator met hoge nauwkeurigheid om de klinische diagnose van ICP te ondersteunen. Bovendien verwachten we, op basis van de analyse van bloedmonsters in het eerste en tweede trimester, dat karakteristieke metabolieten kunnen worden gewonnen, en dat de dynamische veranderingen in hun niveaus zelfs de waarschijnlijkheid van ICP vóór het begin van ICP-symptomen kunnen voorspellen, om zo de kans op ICP te voorspellen. de implementatie van preventieve maatregelen vooraf en mogelijk de kans op bijwerkingen verkleinen.