揭示妊娠期肝内胆汁淤积症瘙痒的发病机制

作为妊娠期最常见的肝脏相关疾病，ICP 平均影响全球 4% 的孕妇。 在一项针对 12200 名符合条件的中国孕妇的队列研究中，报告的 ICP 发生率为 6.06%。 ICP对孕妇和胎儿的健康都有害。 对于胎儿来说，ICP直接影响胎儿的健康成长和顺利分娩。 与疾病相关的不良事件已有报道，包括早产、羊水胎粪污染、胎儿缺氧、新生儿病房停留时间延长，甚至死产。 ICP对孕妇身心健康有严重影响，典型表现为严重瘙痒。 这种瘙痒主要发生在妊娠中期和晚期（通常是妊娠晚期），并且随着妊娠的进展往往会变得越来越严重。 最常见于手掌和脚底，部分患者有全身瘙痒。 而且夜间瘙痒加剧，导致严重失眠。 在我国提倡多胞胎的背景下，有效预防和治疗此类疾病显得尤为重要。

目前，对于ICP尤其是瘙痒症状的治疗尚无有效药物，因为ICP及其瘙痒的分子机制尚不清楚。 在本研究中，我们基于前期大量的细胞和动物实验，鉴定出了几种可以激活人类ICP瘙痒的潜在瘙痒受体MRGPRX4来介导ICP瘙痒的内源性潜在瘙痒原。 该项目希望在阐明瘙痒发病机制的基础上，结合临床样本的分析，为疾病的诊断甚至预测提供新的生物标志物和新视角。 因此，在怀孕期间可以进行健康监测和早期干预，从而有利于患者和儿童的临床治疗结果。 方法如下：

① 表征ICP患者孕早期、孕中期、孕晚期硫酸黄体酮的动态变化与医院妇产科团队合作，在三个不同时间采集孕妇的血样怀孕期间的要点（包括健康孕妇和ICP孕妇）。 孕妇将在妊娠晚期填写问卷，或在产后通过电话随访。 患有ICP的孕妇的瘙痒程度将被统计。 硫酸孕酮水平的变化和瘙痒程度随妊娠周期的进展而变化。 为了分析血浆中的代谢物组成，我们开发了基于 HPLC-MS 的分离和定量方法，重点关注感兴趣的孕酮代谢物/衍生物，包括以下九种孕酮硫酸盐：硫酸异孕酮 (3β5α) (PM5S)、硫酸表孕酮 (3β5β) ) (PM7S)、孕烯醇酮硫酸盐 (3α5β) (PM6S)、异孕烯醇酮硫酸盐 (3α5α) (PM4S)、孕二醇硫酸盐 (3α5β) (PM3S)、异孕二醇硫酸盐 (3β5α)、5β-pregnan-3α、20α-diol-3、 20-二硫酸盐 (PM3DiS)、5α-pregnan-3α、20α-diol-3、20-二硫酸盐 (PM2DiS)、孕烯醇酮硫酸盐和 17-羟基孕烯醇酮硫酸盐。 将 100 μl 血浆样品与 425 μl 甲醇混合并涡旋 10 分钟。 14 000 g 离心 10 min 后，将上清液转移至新管中，并在 HPLC-MS 分析前储存于 -80 °C。

② 开发ICP或瘙痒症状的诊断和早期预测模型。 在获得足够量的生物样本和代谢物分析结果后，我们计划根据样本数据进行有效的统计分析和数据挖掘。 利用ICP患者和健康孕妇妊娠晚期血液中相关代谢物的数据，采用受试者工作特征（ROC）曲线分析和逻辑回归模型来寻找单一特征代谢物分子或几种代谢物分子的组合能够有效地区分ICP患者与正常孕妇，可作为辅助ICP临床诊断的高精度新指标。 此外，基于对孕早期和孕中期血液样本的分析，我们期望能够挖掘出特征代谢物，其水平的动态变化甚至可以在ICP症状出现之前预测ICP的概率，从而指导提前实施预防措施，尽可能减少不良事件发生的概率。