Å avdekke patogenesen til pruritus i intrahepatisk kolestase av svangerskapet

Som den vanligste leverrelaterte sykdommen i svangerskapet, påvirker ICP i gjennomsnitt 4 % av gravide kvinner over hele verden. I en kohortstudie av 12200 kvalifiserte kinesiske gravide kvinner, var den rapporterte forekomsten av ICP 6,06 %. ICP er helseskadelig for både gravide og fostre. For fosteret påvirker ICP direkte den sunne veksten og jevn levering av fosteret. Sykdomsrelaterte bivirkninger er rapportert, inkludert prematur fødsel, mekoniumkontaminering av fostervann, føtal hypoksi, lengre oppholdstid i neonatalavdelingen og til og med dødfødsel. ICP har en alvorlig innvirkning på den fysiske og mentale helsen til gravide kvinner, vanligvis alvorlig kløe. Denne kløen oppstår hovedsakelig i andre og tredje trimester av svangerskapet (vanligvis tredje trimester) og har en tendens til å bli gradvis verre etter hvert som svangerskapet skrider frem. Det er oftest tilstede på håndflatene og fotsålene, og noen pasienter har generalisert kløe. Dessuten ble kløen forverret om natten, noe som førte til alvorlig søvnløshet. På bakgrunn av å gå inn for flere fødsler i vårt land, er effektiv forebygging og behandling av slike sykdommer spesielt viktig.

For tiden finnes det ingen effektive legemidler for behandling av ICP, spesielt pruritussymptomer, fordi den molekylære mekanismen til ICP og dens kløe fortsatt er uklar. I denne studien har vi identifisert flere endogene potensielle kløe som kan aktivere human MRGPRX4, den potensielle kløereseptoren for ICP pruritus, for å mediere ICP pruritus basert på et stort antall tidligere celle- og dyreforsøk. Basert på å klargjøre mekanismen for kløe, håper dette prosjektet å gi nye biomarkører og nye perspektiver for diagnostisering og til og med prediksjon av sykdommen kombinert med analyse av kliniske prøver. Som sådan kan helseovervåking og tidlig intervensjon dermed muliggjøres under graviditet for å gagne behandlingsresultatet til både pasienten og barnet klinisk. metodene er som følger:

① For å karakterisere de dynamiske endringene av progesteronsulfater hos pasienter med ICP i løpet av første, andre og tredje trimester av svangerskapet I samarbeid med team i avdelingen for obstetrikk og gynekologi på sykehus, vil det bli tatt blodprøver fra gravide kvinner på tre forskjellige tidspunkter poeng under graviditet (inkludert friske gravide og gravide med ICP). Et spørreskjema vil fylles ut av de gravide i tredje trimester eller ved telefonoppfølging etter fødsel. Graden av kløe hos gravide kvinner med ICP vil telles. Endringene i progesteronsulfatnivåer og graden av kløe er preget av utviklingen av graviditetssyklusen. For analyse av metabolittsammensetning i plasma utviklet vi HPLC-MS baserte separasjons- og kvantifiseringsmetoder, med fokus på progesteronmetabolitter/derivater av interesse, inkludert følgende ni progesteronsulfater: Isopregnanolonsulfat (3β5α) (PM5S), Epipregnanolonsulfat (3β5β) ) (PM7S), Pregnanolonsulfat (3α5β) (PM6S), Allopregnanolonsulfat (3α5α) (PM4S), Pregnanandiolsulfat (3α5β) (PM3S), isopregnandiolsulfat (3β5α), 5β-pregnan-3-a, α,diol-20. 20-disulfat (PM3DiS), 5a-pregnan-3a, 20a-diol-3, 20-disulfat (PM2DiS), pregnenolonsulfat og 17-hydroksypregnenolonsulfat. En 100 μl plasmaprøve blandes med 425 μl metanol og vortex i 10 min. Etter sentrifugering ved 14 000 g i 10 minutter overføres supernatanten til et nytt rør og lagres ved -80 °C før HPLC-MS-analyse.

② Utvikle diagnostiske og tidlige prediksjonsmodeller for ICP eller pruritussymptomer. Etter å ha innhentet en tilstrekkelig mengde biologiske prøver og metabolittanalyseresultatene, planlegger vi å gjennomføre effektiv statistisk analyse og datautvinning basert på prøvedataene. Ved å bruke data fra relaterte metabolitter i blodet til ICP-pasienter og friske gravide kvinner i tredje trimester, vil Receiver Operating Characteristic (ROC) kurveanalyse og logistisk regresjonsmodell bli brukt for å finne et enkelt karakteristisk metabolittmolekyl eller en kombinasjon av flere metabolittmolekyler , som effektivt kan skille ICP-pasienter fra normale gravide kvinner, og tjene som en ny indikator med høy nøyaktighet for å hjelpe den kliniske diagnosen ICP. Videre, basert på analysen av blodprøver i første og andre trimester, forventer vi at karakteristiske metabolitter kan utvinnes, og de dynamiske endringene i nivåene deres kan til og med forutsi sannsynligheten for ICP før utbruddet av ICP-symptomer, for å veilede gjennomføring av forebyggende tiltak på forhånd og eventuelt redusere sannsynligheten for uønskede hendelser.