Kutinauksen patogeneesin selvittäminen raskauden intrahepaattisessa kolestaasissa

Yleisin maksan aiheuttama sairaus raskauden aikana, ICP vaikuttaa keskimäärin 4 %:iin raskaana olevista naisista maailmanlaajuisesti. Kohorttitutkimuksessa, johon osallistui 12 200 kiinalaista raskaana olevaa naista, raportoitu ICP:n ilmaantuvuus oli 6,06 %. ICP on haitallista sekä raskaana olevien naisten että sikiöiden terveydelle. Sikiölle ICP vaikuttaa suoraan sikiön terveeseen kasvuun ja sujuvaan synnytykseen. Tautiin liittyviä haittatapahtumia on raportoitu, mukaan lukien ennenaikainen synnytys, lapsivesien mekoniumkontaminaatio, sikiön hypoksia, pitkittynyt vastasyntyneiden yksikössä oleskelu ja jopa kuolleena syntymä. ICP:llä on vakava vaikutus raskaana olevien naisten fyysiseen ja henkiseen terveyteen, tyypillisesti vaikea kutina. Tätä kutinaa esiintyy pääasiassa raskauden toisella ja kolmannella kolmanneksella (yleensä kolmannella kolmanneksella), ja se pahenee asteittain raskauden edetessä. Sitä esiintyy yleisimmin kämmenissä ja jalkapohjissa, ja joillakin potilailla on yleistynyttä kutinaa. Lisäksi kutina paheni yöllä, mikä johti vakavaan unettomuuteen. Maassamme monisynnysten puolustamisen taustalla tällaisten sairauksien tehokas ehkäisy ja hoito on erityisen tärkeää.

Tällä hetkellä ei ole olemassa tehokkaita lääkkeitä ICP:n, erityisesti kutinaoireiden, hoitoon, koska ICP:n ja sen kutinan molekyylimekanismi on vielä epäselvä. Tässä tutkimuksessa olemme tunnistaneet useita endogeenisiä potentiaalisia kutinatekijöitä, jotka voivat aktivoida ihmisen MRGPRX4:n, ICP-kutinan mahdollisen kutinareseptorin, välittämään ICP-kutinaa useiden aikaisempien solu- ja eläinkokeiden perusteella. Kutinamekanismin selvittämisen pohjalta tässä hankkeessa toivotaan tarjoavan uusia biomarkkereita ja uusia näkökulmia sairauden diagnosointiin ja jopa ennustamiseen yhdistettynä kliinisten näytteiden analysointiin. Sellaisenaan terveyden seuranta ja varhainen puuttuminen voidaan näin ollen mahdollistaa raskauden aikana, mikä hyödyttää sekä potilaan että lapsen hoitotuloksia kliinisesti. menetelmät ovat seuraavat:

① Karakterisoida progesteronisulfaattien dynaamisia muutoksia ICP-potilailla raskauden ensimmäisen, toisen ja kolmannen kolmanneksen aikana Yhteistyössä sairaaloiden synnytys- ja gynekologian osaston tiimien kanssa verinäytteitä otetaan raskaana olevilta naisilta kolmeen eri aikaan. pisteitä raskauden aikana (mukaan lukien terveet raskaana olevat naiset ja raskaana olevat naiset, joilla on ICP). Raskaana olevat naiset täyttävät kyselyn kolmannella kolmanneksella tai puhelinseurannalla synnytyksen jälkeen. ICP:tä sairastavien raskaana olevien naisten kutina lasketaan. Progesteronisulfaattipitoisuuden muutoksille ja kutina-asteelle on ominaista raskaussyklin eteneminen. Plasman metaboliittikoostumuksen analysointia varten kehitimme HPLC-MS-pohjaisia ​​erotus- ja kvantifiointimenetelmiä, jotka keskittyvät kiinnostaviin progesteronin metaboliitteihin/johdannaisiin, mukaan lukien seuraavat yhdeksän progesteronisulfaattia: Isopregnanolonisulfaatti (3β5α) (PM5S), Epipregnanolonisulfaatti (3β5β) ) (PM7S), pregnanolonisulfaatti (3α5β) (PM6S), allopregnanolonisulfaatti (3α5α) (PM4S), pregnanediolisulfaatti (3α5β) (PM3S), isopregnanidiolisulfaatti (3β5α), 5β-,-pregnan-3α,-2,3α-pregnan-3α 20-disulfaatti (PM3DiS), 5a-pregnani-3a, 20a-dioli-3, 20-disulfaatti (PM2DiS), pregnenolonisulfaatti ja 17-hydroksipregnenolonisulfaatti. 100 µl:n plasmanäyte sekoitetaan 425 µl:n metanolin kanssa ja sekoitetaan vorteksoidaan 10 minuuttia. Kun on sentrifugoitu 14 000 g:llä 10 minuutin ajan, supernatantti siirretään uuteen putkeen ja säilytetään -80 °C:ssa ennen HPLC-MS-analyysiä.

② Kehitä diagnostisia ja varhaisia ​​ennustemalleja ICP- tai kutinaoireille. Riittävän määrän biologisia näytteitä ja aineenvaihduntatuotteiden analyysituloksia saatuaan aiomme suorittaa näyteaineiston perusteella tehokkaan tilastollisen analyysin ja tiedon louhinnan. Käyttäen ICP-potilaiden ja terveiden raskaana olevien naisten veressä olevia tietoja kolmannella raskauskolmanneksella, ROC-käyrien analyysiä ja logistista regressiomallia käytetään yksittäisen ominaisen metaboliittimolekyylin tai useiden metaboliittimolekyylien yhdistelmän löytämiseen. , joka voisi tehokkaasti erottaa ICP-potilaat normaaleista raskaana olevista naisista ja toimia uutena indikaattorina suurella tarkkuudella auttamaan ICP:n kliinistä diagnoosia. Lisäksi ensimmäisen ja toisen raskauskolmanneksen verinäytteiden analyysin perusteella odotamme, että ominaiset metaboliitit voidaan louhia ja niiden tasojen dynaamiset muutokset voivat jopa ennustaa ICP:n todennäköisyyttä ennen ICP-oireiden ilmaantumista, jotta voidaan ohjata. ennaltaehkäisevien toimenpiteiden toteuttaminen etukäteen ja mahdollisesti haittatapahtumien todennäköisyyden vähentäminen.