Att reda ut patogenesen av klåda vid intrahepatisk kolestas under graviditeten

Som den vanligaste leverrelaterade sjukdomen under graviditeten drabbar ICP i genomsnitt 4 % av gravida kvinnor världen över. I en kohortstudie av 12200 kvalificerade kinesiska gravida kvinnor var den rapporterade incidensen av ICP 6,06 %. ICP är skadligt för hälsan för både gravida kvinnor och foster. För fostret påverkar ICP direkt den sunda tillväxten och smidiga leveransen av fostret. Sjukdomsrelaterade biverkningar har rapporterats, inklusive för tidig födsel, mekoniumkontaminering av fostervatten, fetal hypoxi, förlängd vistelse på neonatalavdelningen och till och med dödfödsel. ICP har en allvarlig inverkan på den fysiska och mentala hälsan hos gravida kvinnor, vanligtvis svår klåda. Denna klåda uppstår huvudsakligen under andra och tredje trimestern av graviditeten (vanligtvis tredje trimestern) och tenderar att bli allt värre allt eftersom graviditeten fortskrider. Det är oftast närvarande på handflatorna och fotsulorna, och vissa patienter har generell klåda. Dessutom förvärrades klådan på natten, vilket ledde till svår sömnlöshet. Mot bakgrund av att vi förespråkar flerbarnsfödslar i vårt land är effektiv förebyggande och behandling av sådana sjukdomar särskilt viktig.

För närvarande finns det inga effektiva läkemedel för behandling av ICP, särskilt klådasymtom, eftersom den molekylära mekanismen för ICP och dess klåda fortfarande är oklar. I denna studie har vi identifierat flera endogena potentiella klåda som kan aktivera human MRGPRX4, den potentiella kliande receptorn för ICP-klåda, för att mediera ICP-klåda baserat på ett stort antal tidigare cell- och djurförsök. Baserat på att klargöra mekanismen för klåda, hoppas detta projekt ge nya biomarkörer och nya perspektiv för diagnos och till och med förutsägelse av sjukdomen i kombination med analys av kliniska prover. Som sådan kan hälsoövervakning och tidiga insatser således möjliggöras under graviditeten för att gynna behandlingsresultatet för både patienten och barnet kliniskt. metoderna är följande:

① För att karakterisera de dynamiska förändringarna av progesteronsulfater hos patienter med ICP under graviditetens första, andra och tredje trimester I samarbete med team på avdelningen för obstetrik och gynekologi på sjukhusen kommer blodprover att samlas in från gravida kvinnor vid tre olika tidpunkter poäng under graviditeten (inklusive friska gravida kvinnor och gravida kvinnor med ICP). Ett frågeformulär kommer att fyllas i av de gravida kvinnorna under tredje trimestern eller genom telefonuppföljning efter förlossningen. Graden av klåda hos gravida kvinnor med ICP kommer att räknas. Förändringarna av progesteronsulfatnivåer och graden av klåda kännetecknas av utvecklingen av graviditetscykeln. För analys av metabolitsammansättning i plasma utvecklade vi HPLC-MS-baserade separations- och kvantifieringsmetoder, med fokus på progesteronmetaboliterna/derivaten av intresse, inklusive följande nio progesteronsulfater: Isopregnanolonsulfat (3β5α) (PM5S), Epipregnanolonsulfat (3β5β) ) (PM7S), Pregnanolonsulfat (3α5β) (PM6S), Allopregnanolonsulfat (3α5α) (PM4S), Pregnanandiolsulfat (3α5β) (PM3S), isopregnandiolsulfat (3β5α), 5β-pregnan-3-a, α,α-pregnan-3-a, 2a 20-disulfat (PM3DiS), 5a-pregnan-3a, 20a-diol-3, 20-disulfat (PM2DiS), pregnenolonsulfat och 17-hydroxipregnenolonsulfat. Ett 100 μl plasmaprov blandas med 425 μl metanol och vortexas i 10 min. Efter centrifugering vid 14 000 g under 10 minuter överförs supernatanten till ett nytt rör och förvaras vid -80°C före HPLC-MS-analys.

② Utveckla diagnostiska och tidiga prediktionsmodeller för ICP- eller klådasymtom. Efter att ha erhållit en tillräcklig mängd biologiska prover och metabolitanalysresultaten planerar vi att genomföra effektiv statistisk analys och datautvinning baserat på provdata. Med hjälp av data från relaterade metaboliter i blodet hos ICP-patienter och friska gravida kvinnor i tredje trimestern, kommer analys av Receiver Operating Characteristic (ROC) kurvor och logistisk regressionsmodell att användas för att hitta en enskild karakteristisk metabolitmolekyl eller en kombination av flera metabolitmolekyler , som effektivt skulle kunna skilja ICP-patienter från normala gravida kvinnor, och fungera som en ny indikator med hög noggrannhet för att hjälpa den kliniska diagnosen av ICP. Dessutom, baserat på analys av blodprover under den första och andra trimestern, förväntar vi oss att karakteristiska metaboliter kan brytas, och de dynamiska förändringarna i deras nivåer kan till och med förutsäga sannolikheten för ICP innan ICP-symtomen börjar, för att vägleda genomförandet av förebyggande åtgärder i förväg och eventuellt minska sannolikheten för oönskade händelser.