Imunologické a virologické prognostické markery kongenitální infekce lidským cytomegalovirem (HCMV) u těhotných žen s primární infekcí HCMV.

Lidský cytomegalovirus (HCMV) navazuje celoživotní vztah se svým hostitelem: primární infekce je následována fází latence s přerušovanými epizodami reaktivace navzdory robustní, dlouhotrvající imunitní odpovědi. Primární a neprimární infekce (druhá zahrnuje jak reaktivaci, tak reinfekci) je obvykle asymptomatická u imunokompetentních jedinců.

Kromě imunokompromitovaných subjektů je HCMV potenciálně nebezpečný během těhotenství: plod se může nakazit a vyvinout příznaky při narození nebo závažné dlouhodobé následky v přibližně 20 % případů (Stagno et al, JAMA 1986; Dollard et al, Rev Med Virol 2007). HCMV je nejčastější kongenitální infekce s vertikálním přenosem vyskytujícím se v přibližně 0,64 % těhotenství (Cannon & Davis, BMC Public Health 2005).

Naše studie T a B buněčné odpovědi na HCMV naznačují, že opožděný vývoj imunitní odpovědi na primární infekci HCMV u těhotných žen je spojen s přenosem viru na plod (Revello et al., J Infect Dis 2006; Lilleri et al., J Infect Dis 2007; 2008; PLoS ONE 2013; Fornara et al., J Clin Immunol 2011, J Med Virol 2015).

Nověji jsme pozorovali, že ženy přenášející virus na plod měly vyšší procento „krátkodobě efektorových“ (STE) HCMV-specifických CD4+ T buněk, zatímco dřívější vývoj „dlouhodobě paměťových“ (LTM) buněk byl spojen s nižším rizikem přenosu viru na plod (Mele et al., PLosOne 2017). LTM jsou charakterizovány expresí receptoru pro IL-7 (IL-7R), cytokinu zapojeného do homeostatické údržby paměťových (a naivních) T buněk, zatímco STE postrádají expresi IL-7R a jsou udržovány antigenní stimulací. Ve stejném směru výsledky další studie ukázaly, že dřívější vývoj paměťově podobných CD4+ T buněk specifických pro antigen pp65 HCMV (tj. T buněk schopných proliferovat in vitro v reakci na antigen) stanovený kultivačním ELISPOTem je spojen s nižším rizikem přenosu HCMV (Fornara et al., CID 2017).

Omezení naší studie LTM vs. STE spočívá v jemné, ale těžkopádné použité technice, která byla založena na třídění dvou subsetů T buněk a následné třítýdenní expanzi více replikátů kultur T buněk (knihovna T buněk) před testováním jejich specificity pro HCMV (Geiger et al., J Exp Med 2009). Nicméně naše předběžné výsledky ukazují, že LTM a STE HCMV-specifické T buňky lze detekovat také přímou ex vivo stimulací T buněk a simultánním stanovením produkce IFNγ (specificita pro HCMV) a exprese IL-7R (fenotyp T buněk) průtokovou cytometrií.

Cílem této studie je stanovit prognostickou výkonnost kombinace různých parametrů HCMV-specifické T buněčné odpovědi (reexprese CD45RA, fenotyp LTM, produkce IL-2 a lymfoproliferace), aby bylo možné je použít v klinické praxi k posouzení rizika přenosu HCMV na plod po mateřské primární infekci. Kromě toho prozkoumáme, zda je přítomnost paměťově podobných (tj. expandovatelných) CD4+ T buněk schopných proliferovat v reakci na další jednotlivé antigeny HCMV spojena s rizikem přenosu viru na plod.

Vakcína proti HCMV je aktivně hledána a navrhováno je několik kandidátů (Wang & Fu, Curr Opin Virol 2014) a definice imunitních parametrů spojených s ochranou proti neprimární infekci a přenosu viru je nezbytná pro analýzu účinnosti vyvíjených různých vakcín.