Marcadores Prognósticos Imunológicos e Virológicos da Infecção Congénita pelo Citomegalovírus Humano (HCMV) em Grávidas com Infecção Primária por HCMV.

O citomegalovírus humano (HCMV) estabelece uma relação vitalícia com o seu hospedeiro: a infeção primária é seguida por uma fase de latência com episódios intermitentes de reativação, apesar de uma resposta imunitária robusta e duradoura. A infeção primária e não primária (esta última indicando tanto reativação como reinfeção) é geralmente assintomática em indivíduos imunocompetentes.

Para além de indivíduos imunocomprometidos, o HCMV é potencialmente perigoso durante a gravidez: o feto pode ser infetado e desenvolver sintomas à nascença ou sequelas graves a longo prazo em cerca de 20% dos casos (Stagno et al, JAMA 1986; Dollard et al, Rev Med Virol 2007). O HCMV é a infeção congénita mais comum, com transmissão vertical ocorrendo em cerca de 0,64% das gravidezes (Cannon & Davis, BMC Public Health 2005).

Os nossos estudos sobre a resposta das células T e B ao HCMV sugerem que um desenvolvimento tardio da resposta imunitária à infeção primária por HCMV em grávidas está associado à transmissão do vírus ao feto (Revello et al., J Infect Dis 2006; Lilleri et al., J Infect Dis 2007; 2008; PLoS ONE 2013; Fornara et al., J Clin Immunol 2011, J Med Virol 2015).

Mais recentemente, observámos que as mulheres que transmitiram o vírus ao feto tinham uma percentagem mais elevada de células T CD4+ específicas para o HCMV "efetoras de curto prazo" (STE), enquanto um desenvolvimento mais precoce de células de "memória de longo prazo" (LTM) estava associado a um menor risco de transmissão do vírus ao feto (Mele et al., PLosOne 2017). As LTM caracterizam-se pela expressão do recetor para a IL-7 (IL-7R), uma citocina envolvida na manutenção homeostática das células T de memória (e naive), enquanto as STE não expressam IL-7R e são mantidas por estímulo antigénico. Na mesma linha, os resultados de outro estudo mostraram que o desenvolvimento mais precoce de células T CD4+ com características de memória específicas para o antigénio pp65 do HCMV (ou seja, células T capazes de proliferar in vitro em resposta ao antigénio), determinado por um ELISPOT de cultura, está associado a um menor risco de transmissão do HCMV (Fornara et al., CID 2017).

A limitação do nosso estudo sobre LTM vs STE reside na técnica refinada mas trabalhosa aplicada, que se baseou na separação dos dois subconjuntos de células T e subsequente expansão durante 3 semanas de múltiplas réplicas de culturas de células T (biblioteca de células T), antes de testar a sua especificidade para o HCMV (Geiger et al., J Exp Med 2009). No entanto, os nossos resultados preliminares mostram que as células T específicas para o HCMV LTM e STE também podem ser detetadas por estimulação direta ex vivo de células T e determinação simultânea da produção de IFNγ (especificidade para o HCMV) e expressão de IL-7R (fenótipo da célula T) por citometria de fluxo.

Os objetivos do presente estudo são determinar o desempenho prognóstico da combinação de diferentes parâmetros da resposta das células T específicas para o HCMV (reexpressão de CD45RA, fenótipo LTM, produção de IL-2 e linfoproliferação), para serem utilizados na prática clínica para avaliar o risco de transmissão do HCMV ao feto após infeção primária materna. Além disso, iremos explorar se a presença de células T CD4+ com características de memória (ou seja, expansíveis) capazes de proliferar em resposta a outros antigénios individuais do HCMV está associada ao risco de transmissão do vírus ao feto.

A vacina contra o HCMV é ativamente procurada e vários candidatos estão a ser propostos (Wang & Fu, Curr Opin Virol 2014), sendo obrigatória a definição de parâmetros imunitários associados à proteção contra infeção não primária e transmissão do vírus para analisar a eficácia das diferentes vacinas em desenvolvimento.