Plateletkryokonservering (PLT-CRIO)

Blodplader er essentielle blodkomponenter med afgørende roller i både haemostase og inflammation. Trombocytopeni, defineret som en reduktion i antallet af cirkulerende blodplader, kan skyldes nedsat knoglemarvsproduktion, øget forbrug, miltsekvestrering eller blødningsepisoer og håndteres almindeligvis gennem blodpladetransfusioner med det formål at genetablere tilstrækkelige antal og, når nødvendigt, kontrollere blødninger. I klinisk praksis gives størstedelen af blodpladetransfusioner til trombocytopeniske kræftpatienter med profylaktisk hensigt, hvor det primære krav er vedvarende blodpladeoverlevelse for at minimere antallet af transfusioner. Omvendt forventes det, at blodpladetransfusioner hos aktivt blødende patienter giver hurtig og effektiv haemostase, mens deres cirkulationstid er mindre relevant. I øjeblikket opbevares blodpladekoncentrater ved stuetemperatur (22-24 °C) under kontinuerlig omrøring i op til fem dage, hvorefter de kasseres, hvis de ikke er brugt. Denne opbevaringsmetode indebærer risiko for bakteriel kontamination og inducerer metaboliske og strukturelle ændringer, der kompromitterer blodpladefunktion, et fænomen kendt som platelet storage lesion (PSL). Desuden begrænser den korte holdbarhed tilgængeligheden af blodplader i nødsituationer, som observeret under SARS-CoV-2-pandemien, hvor efterspørgslen efter profylaktiske blodpladetransfusioner forblev konstant, mens forsyningen var stærkt anspændt. Som svar herpå introducerede Transfusionsmedicinsk Afdeling i Reggio Emilia kryokonservering af blodpladekoncentrater for at forebygge fremtidige mangelperioder. Kryokonservering muliggør opbevaring af blodplader i op til to år og udgør et attraktivt alternativ til konventionelle metoder, idet den ikke kun forlænger opbevaringstiden, men også reducerer risikoen for bakteriel kontamination. Selvom nyere studier har demonstreret sikkerheden og effektiviteten af kryokonserverede blodplader hos blødende patienter, findes der begrænset evidens for deres anvendelse i profylakse hos onko-hematologiske patienter. Vigtige bekymringer inkluderer potentialet for at forværre tromboserisiko hos patienter med kronisk hyperkoagulabilitet og frigivelsen af bioaktive molekyler såsom vækstfaktorer og pro-inflammatoriske cytokiner under optøning, som kunne have pro-tumorigene effekter. Det vides, at blodplade-tumor-interaktioner er komplekse og udøver både pro- og anti-tumorale påvirkninger, hvor balancen ofte favoriserer tumorprogression. Dette studie sigter derfor på at evaluere effekten af kryokonservering på blodpladefunktionalitet, struktur og morfologi samt vurdere potentielle pro-tumorale effekter efter optøning. Ved hjælp af en komparativ tilgang blev kryokonserverede blodplader fra apherese analyseret sideløbende med standard blodplader opbevaret ved stuetemperatur, som i øjeblikket betragtes som guldstandarden for profylaktisk transfusion. Protokollen involverer rekruttering af donorer ved Transfusionsmedicinsk Afdeling af AUSL-IRCCS i Reggio Emilia, hvor blodpladekoncentrater prepareres og kryokonserveres ved brug af 6% dimethyl sulfoxid (DMSO) samt alternative tilgange, der anvender intracellulære og extracellulære kryobeskyttelsesmidler enten individuelt eller i kombination, med lavere cytotoxicitet rapporteret i andre transfusions- og kryobiologiske sammenhænge. Blodpladeprøver blev evalueret før nedfrysning og efter optøning på flere tidspunkter (1, 3 og 6 timer efter rekonstitution). Analyser inkluderede genvindingsrate, pH-ændringer, frigivelse af bioaktive faktorer, aktiveringsmarkører, haemostatisk potentiale (via thromboelastografi) og morfologiske ændringer vurderet ved flowcytometri, mikroskopi og synkrotron-baseret Fourier transform infrarød (FTIR) mikrospektroskopi. Desuden blev den potentielle pro-tumorale aktivitet af kryokonserverede versus friske blodplader undersøgt in vitro ved brug af co-cultivesystemer med brystkræft- og leukæmicellelinjer med fokus på proliferation og blodplade-celle-interaktionstests. Projektets primære mål er at fastslå effekterne af kryogen opbevaring på blodpladefunktion. Det sekundære mål er at identificere det kryokonserverede blodpladeprodukt med det mest passende sikkerhedsprofil til profylaktisk transfusion hos onko-hematologiske patienter. Studiet udføres af BioMetLab ved Transfusionsmedicinsk Afdeling af AUSL-IRCCS i Reggio Emilia i overensstemmelse med Helsinki-erklæringen efter informeret samtykke fra alle donorer.