Kombinationsterapi ved hjælp af Cellcept og Rebif i RRMS

I alt 30 patienter vil blive undersøgt, femten i hver arm. Proportional analyse til estimering af prøvestørrelse kunne ikke udføres, da andelen af ​​MxA-positive patienter efter 1 år i Rebif®-behandlingsarmen er ukendt. Ikke desto mindre vil en prøvestørrelse på 15 patienter pr. arm tillade påvisning af en passende forskel mellem behandlingsgrupperne som beskrevet nedenfor:

Til formålet med denne undersøgelse vil en MxA ikke-producent blive udpeget som en "behandlingsfejl" uanset den kliniske status. Definitionen af ​​en MxA ikke-producent er en patient, der producerer 1 år i behandling; MxA transkripter på et niveau 2 SD under hans/hendes gennemsnitlige basislinjeværdi ved indgang. I overensstemmelse hermed vil patienterne blive sammenlignet med deres egen initiale respons på Rebif® ved indtræden i undersøgelsen. I de følgende eksempler vil andelen af ​​MxA ikke-producenter i hver gruppe blive brugt til sammenligninger.

Ved udgangen af ​​1 år er forekomsten af ​​neutraliserende antistoffer hos patienter, der får Rebif® 44 mikrogram SC tiw ca. 20%. Til brug for beregning af stikprøvestørrelse blev en andel på 40 % (0,4) valgt for MxA-ikke-producenterne i Rebif®-armen, da andelen af ​​patienter, der ikke producerer MxA efter 1 år, er højere end andelen, der viser. neutraliserende antistoffer. Med andre ord er andre mekanismer end neutraliserende antistoffer grundlaget for interferon-urespons hos de fleste patienter, et vigtigt fænomen, der går tabt til påvisning, hvis det eneste fokus er begrænset til neutraliserende antistoffer. Hvis man antager, at kombinationen vil være effektiv til at opretholde den biologiske aktivitet af interferon efter 1 år hos de fleste eller alle patienterne, kan følgende scenarier identificeres.

Patienter vil blive tilfældigt tildelt til enten at modtage Rebif med eller uden CellCept. Randomiseringsprocessen vil bruge et computerprogram designet specifikt til randomisering af patienter. Patienter vil have samme chance for at blive randomiseret til at modtage Rebif med eller uden CellCept-behandling.

Hvert emne skal opfylde følgende berettigelseskriterier (dvs. alle inklusionskriterierne og ikke eksklusionskriterierne) før tilmelding til undersøgelsen:

Inklusionskriterier

• Mandlige og kvindelige forsøgspersoner, der er klinisk egnede til interferonterapi, herunder en diagnose af recidiverende multipel sklerose (i henhold til MacDonald-kriterierne, revideret 2005), eller patienter diagnosticeret med klinisk isoleret syndrom.
• Patienter skal være mellem 18 og 65 år inklusive
• Forsøgspersoner skal have tilstrækkelig kognitiv funktion til at forstå og underskrive det IRB-godkendte samtykke forud for udførelse af undersøgelsesspecifikke procedurer.

Eksklusionskriterier

• Kvinder, der er gravide eller ammer, og kvinder i den fødedygtige alder (dvs. ikke kirurgisk sterile eller mindst to år postmenopausale), som indgår i aktive heteroseksuelle forhold og ikke har fået foretaget en hysterektomi eller bilateral oophorektomi og ikke bruger en af ​​følgende præventionsmetoder: tubal ligering, implanterbar præventionsanordning, oral, plaster eller injicerbar svangerskabsforebyggelse, barrieremetode eller seksuel aktivitet begrænset til en vasektomiseret partner vil blive udelukket fra denne undersøgelse på grund af den potentielle risiko for det ufødte foster og/eller det ammende spædbarn.
• Forsøgspersonen har klinisk signifikante abnorme laboratorieværdier. En unormal værdi er defineret som CTCAE Version 3.0, Grad 2 eller dårligere laboratorieværdi, som er bestemt til at være klinisk signifikant af Principal Investigator.
• Forsøgspersonen har modtaget kortikosteroider inden for 30 dage før screeningsbesøget.
• Forsøgspersonen har fået cyclophosphamid eller mitoxantron.
• Forsøgspersonen har fået Imuran eller methotrexat inden for de sidste 3 måneder.
• Forsøgspersonen har en hvilken som helst medicinsk tilstand eller historie med en medicinsk tilstand, der ville forstyrre fortolkningen af ​​undersøgelsesresultaterne eller udførelsen af ​​undersøgelsen som bestemt af investigator. Dette kan omfatte anden autoimmun sygdom, anamnese med cancer, ukontrolleret hypertension, myelodysplastiske syndromer og enhver anden ukontrolleret hjerte-, lever-, nyre- eller lungehistorie, som af investigator er bestemt til at være klinisk signifikant.
• Forsøgspersonen deltager eller har deltaget i et andet klinisk forsøg eller har modtaget en anden forsøgsbehandling inden for de sidste 90 dage.

Primære mål for effekt:

• Analyse af andelen af ​​patienter, der er MxA-producenter i gruppen, der modtager Rebif® med CellCept®, sammenlignet med andelen af ​​patienter på Rebif® alene, som er MxA-producenter.
• Sammenligning af de gennemsnitlige MxA-niveauer i Rebif® med CellCept®-gruppen med Rebif® alene.

Nulhypotesen er, at der ikke vil være nogen forskel mellem de to behandlingsarme med hensyn til niveauerne af mRNA for MxA. Den alternative hypotese er, at behandlingsarmen vil have et vedvarende højt niveau af mRNA sammenlignet med Rebif® alene-behandlingsgruppen.

Sekundære mål for effektivitet

• Klinisk status, herunder antal og sværhedsgrad af kliniske eksacerbationer, sværhedsgraden af ​​eksacerbationer, tid til første og anden eksacerbation, handicap målt ved Expanded Disability Status Scale (EDSS) og Multiple Sclerosis Functional Composite (MSFC) og brug af kortikosteroider i løbet af det 1-årige studie .
• Tolerance over for interferon og klinisk sygdomsbyrde målt ved Multiple Sclerosis Quality of Life Index (MSQLI).
• Gennembrudssygdom som påvist ved gadoliniumforstærkning af læsioner i MR ved afslutningen af ​​undersøgelsen.
• Total byrde af T2 FLAIR-sygdom i kombinationsarmen sammenlignet med Rebif® alene ved afslutningen af ​​undersøgelsen.

Måling af MxA

MxA-niveauer hos patienter vil blive bestemt ved at måle relative mængder af MxA-mRNA i perifere mononukleære blodceller (PBMC'er) isoleret fra deres blod. Blod vil blive opsamlet i konserveringsmiddelfrie heparinrør, og PBMC'erne isoleres ved Ficoll-Histopaque gradientcentrifugering. PBMC'erne vil blive høstet, vasket, og det samlede celletal etableres. Total RNA vil blive isoleret fra disse celler. RNA vil derefter blive omdannet til cDNA i en omvendt transkriptionsreaktion.

Realtidspolymerasekædereaktion (PCR) vil blive udført for at etablere niveauer af genaktivering af MxA. Som i standard PCR anvendes oligonukleotidprimere og temperaturcyklus til at amplificere målsekvensen fra template-DNA'et. Med real-time PCR tilsættes en oligonukleotid "probe" til blandingen. Denne probe har et "reporter"-farvestof med høj energi i 5'-enden og et lav-energi-"quencher"-farvestof i 3'-enden. Proben er designet til at anneale til en specifik del af mål-DNA-sekvensen. Når proben er intakt, undertrykker quencherfarvestoffets nærhed til reporterfarvestoffet dets naturlige fluorescens. Efterhånden som DNA-polymerase laver kopier af template-DNA-molekylerne i blandingen, spaltes den vedhæftede probe, og afstanden mellem reporter- og quencher-farvestofferne øges, hvilket forårsager, at fluorescerende emission fra reporteren også øges. Fluorescens måles gennem PCR-reaktionens temperaturcyklusser. Beregninger udføres baseret på den detekterede fluorescens for at bestemme mængden af ​​initial template-DNA, der var til stede i prøven. Fordi det er umuligt at bestemme det nøjagtige antal af MxA mRNA-molekyler, som hver prøve startede med, udføres real-time PCR for at påvise niveauer af GAPDH, et standard husholdningsgen, i hver prøve, så der kan foretages en sammenligning mellem GAPDH og MxA , og relative mængder kan bestemmes mellem forskellige prøver.

Måling af T2 FLAIR Den samlede belastning af T2 FLAIR måles ved hjælp af et semi-automatiseret computerprogram, der bruges inden for røntgenafdelingen. Softwaren vil skitsere alle læsioner inden for det scannede område. Når de er kortlagt, vil MR'erne blive gennemgået af Dr. Eric Bourekas til måling og kvantificering af den samlede sygdomsbyrde.

Detaljerede undersøgelsesprocedurer

Behandlingsplan Kvalificerede patienter vil blive randomiseret til at modtage behandling med eller uden mycophenolatmofetil 2.000 mg dagligt i 6 måneder. Efter 4 ugers behandling vil begge grupper modtage Rebif® i standarddosis på 44 mikrogram SC TIW efter et standardtitreringsdoseringsregime. Patienterne vil blive evalueret hver 3. måned i et år. Patientens samlede studietid vil være et år.

Randomisering vil finde sted ved dag 0-besøget og vil bruge et computerprogram, der er specielt oprettet til dette formål. Patienter vil have 50 % chance for at modtage CellCept.

Slut på studiet

Hvis en patient udvikler en medicinsk tilstand, som efter investigatorens mening ville gøre det usikkert for dem at fortsætte i undersøgelsen, vil patienten blive fjernet fra undersøgelsen og fulgt efter undersøgelsen for en sikkerheds skyld, løsning af enhver hændelse. Patientfjernelse fra undersøgelsen vil blive evalueret fra sag til sag efter efterforskernes skøn og vil blive udført for at sikre patientens sikkerhed.

Hvis en patient oplever mere end 2 eksacerbationer, der kræver kortikosteroidbehandling (moderat til svær) i en 12 måneders periode, eller har bekræftet progression i Expanded Disability Status Scale (EDSS) på > 2 point med eller uden eksacerbationer, vil de blive betragtet som behandlingssvigt for passende behandlingsarm og ville blive fjernet fra undersøgelsen for at forfølge andre behandlingsmuligheder.