Kombinasjonsterapi ved bruk av Cellcept og Rebif i RRMS

Totalt 30 pasienter skal studeres, femten i hver arm. Proporsjonal analyse for estimering av prøvestørrelse kunne ikke gjøres siden andelen MxA-positive pasienter etter 1 år i Rebif®-behandlingsarmen er ukjent. Ikke desto mindre vil en prøvestørrelse på 15 pasienter per arm tillate påvisning av en passende forskjell mellom behandlingsgruppene som skissert nedenfor:

For formålet med denne studien vil en MxA ikke-produsent bli utpekt som en "behandlingssvikt" uavhengig av klinisk status. Definisjonen av en MxA ikke-produsent er en pasient som produserer 1 år inn i behandling; MxA-transkripsjoner på et nivå 2 SD under hans/hennes gjennomsnittlige grunnlinjeverdi ved inngang. Følgelig vil pasienter bli sammenlignet med deres egen første respons på Rebif® ved inntreden i studien. I de følgende eksemplene vil andelen MxA ikke-produsenter i hver gruppe bli brukt for sammenligninger.

Ved slutten av 1 år er forekomsten av nøytraliserende antistoffer hos pasienter som får Rebif® 44 mikrogram SC tiv omtrent 20 %. For å beregne prøvestørrelse ble en andel på 40 % (0,4) valgt for MxA-ikke-produsentene i Rebif®-armen, siden andelen pasienter som ikke klarer å produsere MxA etter 1 år er høyere enn andelen som viser. nøytraliserende antistoffer. Med andre ord, andre mekanismer enn nøytraliserende antistoffer er grunnlaget for at interferon ikke reagerer hos de fleste pasienter, et viktig fenomen som går tapt ved påvisning dersom fokuset er begrenset til nøytraliserende antistoffer. Forutsatt at kombinasjonen vil være effektiv for å opprettholde biologisk aktivitet av interferon etter 1 år hos de fleste eller alle pasientene, kan følgende scenarier identifiseres.

Pasienter vil bli tilfeldig tildelt til enten å motta Rebif med eller uten CellCept. Randomiseringsprosessen vil benytte et dataprogram utviklet spesielt for randomisering av pasienter. Pasienter vil ha lik sjanse for å bli randomisert til å motta Rebif med eller uten CellCept-behandling.

Hvert emne må oppfylle følgende kvalifikasjonskriterier (dvs. alle inklusjonskriteriene og ikke eksklusjonskriteriene) før påmelding til studiet:

Inklusjonskriterier

• Mannlige og kvinnelige forsøkspersoner som er klinisk kvalifisert for interferonterapi, inkludert en diagnose av residiverende multippel sklerose (i henhold til MacDonald-kriteriene, revidert 2005), eller pasienter diagnostisert med klinisk isolert syndrom.
• Pasienter må være mellom 18 og 65 år inkludert
• Forsøkspersonene må ha tilstrekkelig kognitiv funksjon for å forstå og signere det IRB-godkjente samtykket før utførelse av studiespesifikke prosedyrer.

Eksklusjonskriterier

• Kvinner som er gravide eller ammer, og kvinner i fertil alder (dvs. ikke kirurgisk sterile eller minst to år postmenopausale) som deltar i aktive heteroseksuelle forhold, og ikke har hatt hysterektomi eller bilateral ooforektomi, og som ikke bruker en av følgende prevensjonsmetoder: tubal ligering, implanterbar prevensjonsanordning, oral, plaster eller injiserbart prevensjonsmiddel, barrieremetode eller seksuell aktivitet begrenset til en vasektomisert partner vil bli ekskludert fra denne studien på grunn av den potensielle risikoen for det ufødte fosteret og/eller ammende spedbarn.
• Personen har klinisk signifikante unormale laboratorieverdier. En unormal verdi er definert som CTCAE versjon 3.0, grad 2 eller dårligere laboratorieverdi som er bestemt til å være klinisk signifikant av hovedetterforskeren.
• Pasienten har mottatt kortikosteroider innen 30 dager før screeningbesøket.
• Personen har fått cyklofosfamid eller mitoksantron.
• Personen har fått Imuran eller metotreksat i løpet av de siste 3 månedene.
• Forsøkspersonen har en hvilken som helst medisinsk tilstand, eller historie med en medisinsk tilstand, som vil forstyrre tolkningen av studieresultatene eller gjennomføringen av studien som bestemt av etterforskeren. Dette kan inkludere annen autoimmun sykdom, krefthistorie, ukontrollert hypertensjon, myelodysplastiske syndromer og enhver annen ukontrollert hjerte-, lever-, nyre- eller lungehistorie som er bestemt av utforskeren å være klinisk signifikant.
• Forsøkspersonen deltar eller har deltatt i en annen klinisk studie eller mottatt en annen undersøkelsesbehandling i løpet av de siste 90 dagene.

Primære mål for effekt:

• Analyse av andelen pasienter som er MxA-produsenter i gruppen som mottar Rebif® med CellCept®, sammenlignet med andelen pasienter på Rebif® alene som er MxA-produsenter.
• Sammenligning av gjennomsnittlige MxA-nivåer i Rebif® med CellCept®-gruppen med Rebif® alene.

Nullhypotesen er at det ikke vil være noen forskjell mellom de to behandlingsarmene når det gjelder nivåene av mRNA for MxA. Den alternative hypotesen er at behandlingsarmen vil ha et vedvarende høyt nivå av mRNA sammenlignet med Rebif® alene-behandlingsgruppen.

Sekundære mål for effekt

• Klinisk status, inkludert antall og alvorlighetsgrad av kliniske eksaserbasjoner, alvorlighetsgrad av eksaserbasjoner, tid til første og andre eksaserbasjoner, funksjonshemming målt ved utvidet funksjonshemmingsstatusskala (EDSS) og multippel sklerose funksjonell kompositt (MSFC) og bruk av kortikosteroider i løpet av 1-års studien .
• Toleranse for interferon og klinisk sykdomsbyrde målt ved Multiple Sclerosis Quality of Life Index (MSQLI).
• Gjennombruddssykdom som oppdaget ved gadoliniumforsterkning av lesjoner i MR ved avslutningen av studien.
• Total byrde av T2 FLAIR-sykdom i kombinasjonsarmen sammenlignet med Rebif® alene ved avslutningen av studien.

Måler MxA

MxA-nivåer hos pasienter vil bli bestemt ved å måle relative mengder MxA-mRNA i perifere mononukleære blodceller (PBMC) isolert fra blodet deres. Blod vil bli samlet i heparinrør uten konserveringsmiddel og PBMC-ene isolert ved Ficoll-Histopaque gradientsentrifugering. PBMC-ene vil bli høstet, vasket og de totale celletallene fastslått. Totalt RNA vil bli isolert fra disse cellene. RNA vil deretter bli omdannet til cDNA i en revers transkripsjonsreaksjon.

Sanntidspolymerasekjedereaksjon (PCR) vil bli utført for å etablere nivåer av genaktivering av MxA. Som i standard PCR, brukes oligonukleotidprimere og temperatursyklus for å amplifisere målsekvensen fra templat-DNA. Med sanntids-PCR tilsettes en oligonukleotid-"probe" til blandingen. Denne sonden har et "reporter"-fargestoff med høy energi i 5'-enden og et lavenergi-"quencher"-fargestoff i 3'-enden. Proben er designet for å anneale til en spesifikk del av mål-DNA-sekvensen. Når proben er intakt, undertrykker quencher-fargestoffets nærhet til reporterfargestoffet dets naturlige fluorescens. Ettersom DNA-polymerase lager kopier av mal-DNA-molekylene i blandingen, spaltes den vedlagte sonden, og avstanden mellom reporter- og quencher-fargene øker, noe som fører til at fluorescerende emisjon fra reporteren også øker. Fluorescens måles gjennom temperatursyklusene til PCR-reaksjonen. Beregninger er gjort basert på den detekterte fluorescensen for å bestemme mengden initial template DNA som var tilstede i prøven. Fordi det er umulig å bestemme det nøyaktige antallet MxA mRNA-molekyler som hver prøve startet med, blir sanntids-PCR gjort for å oppdage nivåer av GAPDH, et standard husholdningsgen, i hver prøve slik at en sammenligning mellom GAPDH og MxA kan gjøres , og relative mengder kan bestemmes mellom forskjellige prøver.

Måling av T2 FLAIR Total belastning av T2 FLAIR måles av et semi-automatisert dataprogram som brukes på radiologiavdelingen. Programvaren vil skissere alle lesjoner innenfor det skannede området. Når de er kartlagt, vil MR-ene bli gjennomgått av Dr. Eric Bourekas for måling og kvantifisering av total sykdomsbyrde.

Detaljerte studieprosedyrer

Behandlingsplan Kvalifiserte pasienter vil bli randomisert til å motta behandling med eller uten mykofenolatmofetil 2000 mg per dag i 6 måneder. Etter 4 ukers behandling vil begge gruppene få Rebif® i standarddosen på 44 mikrogram SC TIW, etter et standard doseringsregime for titrering. Pasientene vil bli evaluert hver 3. måned i ett år. Pasientens totale studietid vil være ett år.

Randomisering vil skje ved dag 0-besøket og vil bruke et dataprogram spesielt laget for dette formålet. Pasienter vil ha 50 % sjanse for å få CellCept.

Slutt på studiet

Hvis en pasient utvikler en medisinsk tilstand som, etter etterforskerens mening, ville gjøre det utrygt for dem å fortsette i studien, vil pasienten bli fjernet fra studien og fulgt av studien for sikkerhets skyld, for å løse enhver hendelse. Pasientfjerning fra studien vil bli evaluert fra sak til sak etter etterforskernes skjønn og vil bli utført for å sikre pasientens sikkerhet.

Hvis en pasient opplever mer enn 2 eksaserbasjoner som krever kortikosteroidbehandling (moderat til alvorlig) i løpet av en 12-månedersperiode, eller har bekreftet progresjon i Expanded Disability Status Scale (EDSS) på > 2 poeng med eller uten eksaserbasjoner, vil de bli ansett som behandlingssvikt for passende behandlingsarm og vil bli fjernet fra studien for å forfølge andre behandlingsalternativer.