"Spis mig ikke"-signal i hæmatologiske maligniteter: CD24 som nyt mål for at forbedre anti-cancer-immuniteten.

MCL er en aggressiv B-NHL med dyster prognose med høj sandsynlighed for tilbagefald efter konventionel immunkemoterapeutisk regime. CLL er i stedet en uhelbredelig kronisk B-celle malignitet med højere sandsynlighed for tilbagefald efter flere linjer af konventionelle behandlinger og en ikke ubetydelig risiko for progression til et aggressivt lymfom. Yderligere tilgange er nødvendige for at tilvejebringe valide alternativer til disse recidiverende og refraktære sygdomme. I disse to indstillinger er TME kendt for at være involveret i cancercelleoverlevelse og giver en negativ indvirkning på standardbehandlingseffektivitet og adoptiv T-celleimmunitet, for hvilke nye immunterapeutiske midler kunne være en alternativ tilgang i tilfælde af dårlige prognostiske indstillinger. Inden for TME er TAM involveret i at forbedre overlevelse af tumorvækst i MCL og CLL, hvilket også dæmper immunterapi. Anti-CD47 mAb viste sig at være en konsistent DEM'er, der, når den først er blokeret, er i stand til at forbedre fagocytose og clearance af tumorceller i blodkræft. CD24 er for nylig blevet valideret som en anden DEM i præklinisk analyse i solid cancer. Da CD24 udtrykkes i den tidlige fase af B-celledifferentiering, kan MCL og CLL drage fordel af blokaden af ​​dette signal, da TAM og NCL'er er strengt forbundet med deres tilsvarende tumorceller, hvilket giver tumorcelleproliferation og immunflugt.

For at opfylde formålene med dette projekt vil indsamling af resterende patientafledte prøver blive udført rutinemæssigt på tidspunktet for diagnosen og på tidspunktet for tilbagefald af sygdommen, i sidstnævnte tilfælde med det formål at kontrollere enhver CD24, CD47 og CD20 overflade. ekspressionsmodifikation på B-celleblaster (f.eks. klonselektion med CD24/CD47-opregulering efter konventionelt regime), SIRP-α og Siglec-10-ekspression på patientafledt Monocyt/Macrophage-system (som udtrykker højere niveauer af DEMs-ligander som potentiel resistensmekanisme efter konventionel behandling).

Endvidere vil fagocytoseassays med prøver opnået på tilbagefaldstidspunktet blive sammenlignet med de tilsvarende eksperimenter udført med prøverne indsamlet på diagnosetidspunktet for at evaluere eventuelle potentielle forskelle.

Som tidligere beskrevet vil fagocytoseanalyse være baseret på en co-kultur proces, der involverer brugen af ​​anti-CD24 antistoffet (alene eller i kombination med andre antistoffer beskrevet i det sekundære endepunkt) inkubering med makrofager (fra rask donor eller fra patient) og patienttumorceller (MCL eller CLL), sidstnævnte mærket med et fluorescerende stof (dvs. CFSE). Makrofagfarvning (med anti-CD11b-PE-antistof) og efterfølgende flowcytometrisk analyse vil blive udført: forholdet mellem dobbeltfarvede makrofager (CD11b-PE+/CFSE+) og enkeltfarvede makrofager (CD11b-PE+) vil give fagocytoseenheden, som vil blive sammenlignet med den negative kontrol og de andre forsøgsbetingelser (antistofkombinationer beskrevet senere i de sekundære endepunkter). Den dobbelte farvning af makrofager giver indirekte resultater af fagocytose (hvis makrofagen fagocytterer CFSE+-celler, vil den også opnå denne farvning ud over den, der skyldes anti-CD11b-PE-antistoffet).

Endelig vil donor-afledte makrofager blive isoleret fra PBMC opnået fra resterende perifert blod, som forblev inden for det kredsløb, der blev brugt til blodpladeferese hos raske donorer. Faktisk kan restblod (næsten 15 ml) findes i reservoiret i dette kredsløb, som normalt smides ud efter proceduren. Donorer vil underskrive informeret samtykke til brug af efterladt materiale til forskningsformål og dette projekt i særdeleshed.