"Älä syö minua" -signaali hematologisissa pahanlaatuisissa kasvaimissa: CD24 uutena kohteena syövänvastaisen immuniteetin parantamiseksi.

MCL on aggressiivinen B-NHL, jonka ennuste on huono ja uusiutumisen todennäköisyys on suuri tavanomaisen immunokemoterapeuttisen hoito-ohjelman jälkeen. CLL on sen sijaan parantumaton krooninen B-solun pahanlaatuinen syöpä, jolla on suurempi uusiutumisen todennäköisyys useiden tavanomaisten hoitojen jälkeen ja jolla on ei-merkitty riski etenemisestä aggressiiviseksi lymfoomaksi. Lisälähestymistapoja tarvitaan kelvollisten vaihtoehtojen tarjoamiseksi näille uusiutuneille ja refraktorisille sairauksille. Näissä kahdessa ympäristössä TME:n tiedetään osallistuvan syöpäsolujen eloonjäämiseen ja sillä on negatiivinen vaikutus tavanomaiseen hoidon tehokkuuteen ja adoptiiviseen T-soluimmuniteettiin, joille uudet immunoterapeuttiset aineet voisivat olla vaihtoehtoinen lähestymistapa huonoissa ennusteolosuhteissa. TME:ssä TAM osallistuu kasvaimen kasvun eloonjäämisen parantamiseen MCL:ssä ja CLL:ssä ja vaimentaa myös immunoterapiaa. Anti-CD47-mAb osoittautui johdonmukaiseksi DEM:ksi, joka, kun se on estetty, pystyy parantamaan fagosytoosia ja kasvainsolujen puhdistumaa verisyöpässä. CD24 on äskettäin validoitu toiseksi DEM:ksi kiinteän syövän prekliinisessä analyysissä. Koska CD24 ekspressoituu B-solujen erilaistumisen varhaisessa vaiheessa, MCL ja CLL voivat hyödyntää tämän signaalin estoa, koska TAM ja NCL:t ovat tiukasti yhteydessä vastaaviin kasvainsoluihinsa, mikä mahdollistaa kasvainsolujen lisääntymisen ja immuunipaon.

Tämän projektin tavoitteiden toteuttamiseksi kerätään rutiininomaisesti jäljelle jääneitä potilasnäytteitä diagnoosin yhteydessä ja taudin uusiutumishetkellä, tässä jälkimmäisessä tapauksessa tarkoituksena tarkistaa mahdolliset CD24-, CD47- ja CD20-pinnat. ilmentymisen modifikaatio B-solublasteissa (esim. kloonin valinta CD24/CD47-ylössäätelyllä tavanomaisen hoito-ohjelman jälkeen), SIRP-α:n ja Siglec-10:n ilmentyminen potilaasta peräisin olevassa monosyytti/makrofagijärjestelmässä (ilmentää korkeampia DEM-ligandien tasoja mahdollisena resistenssimekanismina tavanomaisen hoidon jälkeen).

Lisäksi fagosytoosimäärityksiä relapsin aikana otetuilla näytteillä verrataan vastaaviin kokeisiin, jotka on suoritettu diagnoosihetkellä kerätyillä näytteillä mahdollisten erojen arvioimiseksi.

Kuten aiemmin on kuvattu, fagosytoosianalyysi perustuu yhteisviljelyprosessiin, joka sisältää anti-CD24-vasta-aineen käytön (yksin tai yhdessä muiden toissijaisessa päätepisteessä kuvattujen vasta-aineiden kanssa) inkuboimalla makrofagien kanssa (terveeltä luovuttajalta tai potilaalta). ja potilaan kasvainsolut (MCL tai CLL), tämä jälkimmäinen on leimattu fluoresoivalla aineella (eli CFSE:llä). Makrofagivärjäys (anti-CD11b-PE-vasta-aineella) ja sen jälkeen virtaussytometrinen analyysi suoritetaan: kaksoisvärjäytyneiden makrofagien (CD11b-PE+/CFSE+) ja yksittäisvärjäytyneiden makrofagien (CD11b-PE+) välinen suhde tuottaa fagosytoosin kokonaisuuden, joka verrataan negatiiviseen kontrolliin ja muihin koeolosuhteisiin (vasta-aineyhdistelmät, jotka kuvataan myöhemmin toissijaisissa päätepisteissä). Makrofagien kaksoisvärjäytyminen tarjoaa epäsuoria tuloksia fagosytoosista (jos makrofagi fagosyytt CFSE+ -soluja, se saa myös tämän värjäyksen anti-CD11b-PE-vasta-aineen vuoksi).

Lopuksi luovuttajaperäiset makrofagit eristetään PBMC:stä, joka on saatu jäljelle jääneestä ääreisverestä, joka pysyi terveiden luovuttajien verihiutalefereesiin käytetyssä piirissä. Itse asiassa tämän kierron säiliöstä löytyy jäännösverta (lähes 15 ml), joka tavallisesti jätetään roskiin toimenpiteen jälkeen. Lahjoittajat allekirjoittavat tietoisen suostumuksen ylijäämän materiaalin käyttöön tutkimustarkoituksiin ja erityisesti tähän hankkeeseen.