„Ne egyél meg” jelzés hematológiai rosszindulatú daganatokban: CD24, mint új cél a rákellenes immunitás javítására.

Az MCL egy agresszív B-NHL, rossz prognózisú, és a hagyományos immunkemoterápiás kezelést követően nagy a visszaesés valószínűsége. Ehelyett a CLL egy gyógyíthatatlan krónikus B-sejtes rosszindulatú daganat, amely több hagyományos terápia után nagyobb valószínűséggel jelentkezik, és nem elhanyagolható a kockázata annak, hogy agresszív limfómává fejlődjön. További megközelítésekre van szükség ahhoz, hogy érvényes alternatívákat kínáljunk ezekre a visszaeső és refrakter betegségekre. Ebben a két helyzetben a TME köztudottan részt vesz a rákos sejtek túlélésében, és negatív hatással van a standard kezelés hatékonyságára és az örökbefogadó T-sejtes immunitásra, amihez rossz prognosztikai beállítások esetén alternatív megközelítést jelenthetnek az új immunterápiás szerek. A TME-n belül a TAM szerepet játszik az MCL és CLL tumornövekedési túlélés javításában, valamint az immunterápia csillapításában. Az anti-CD47 mAb konzisztens DEM-nek bizonyult, amely blokkolva képes javítani a fagocitózist és a tumorsejtek kiürülését a vérrákban. A CD24-et a közelmúltban újabb DEM-ként validálták a szolid rák preklinikai elemzésében. Mivel a CD24 a B-sejt differenciálódás korai fázisában expresszálódik, az MCL és a CLL kihasználhatja ennek a jelnek a blokkolását, mivel a TAM és az NCL-ek szorosan összekapcsolódnak a megfelelő daganatos sejtekkel, biztosítva a tumorsejtek proliferációját és az immunszökést.

A projekt céljainak teljesítése érdekében a betegből származó maradék minták rutinszerű gyűjtése a diagnózis felállításakor és a betegség visszaesésekor történik, ez utóbbi esetben a CD24, CD47 és CD20 felületek ellenőrzése céljából. expressziós módosulás B-sejt blasztokon (pl. klón szelekció CD24/CD47 upregulációval a hagyományos kezelési rend után), SIRP-α és Siglec-10 expresszió a páciensből származó monocita/makrofág rendszeren (magasabb szintű DEM ligandumok mint a rezisztencia potenciális mechanizmusa hagyományos terápia után).

Ezenkívül a relapszus idején vett mintákkal végzett fagocitózis-vizsgálatokat összehasonlítják a diagnózis idején gyűjtött mintákkal végzett egyenértékű kísérletekkel, hogy értékeljék az esetleges különbségeket.

Amint azt korábban leírtuk, a fagocitózis-analízis egy olyan együtttenyésztési folyamaton fog alapulni, amely magában foglalja az anti-CD24 antitest használatát (önmagában vagy más, a másodlagos végpontban leírt antitestekkel kombinálva), makrofágokkal inkubálva (egészséges donortól vagy pácienstől). és a páciens tumorsejtjei (MCL vagy CLL), ez utóbbi fluoreszcens anyaggal (azaz CFSE-vel) van megjelölve. Makrofágfestést (anti-CD11b-PE antitesttel), majd áramlási citometriás analízist végeznek: a kétszeresen festett makrofágok (CD11b-PE+/CFSE+) és az egyszeresen festett makrofágok (CD11b-PE+) aránya biztosítja a fagocitózis entitását, összehasonlítjuk a negatív kontrollal és az egyéb kísérleti körülményekkel (a másodlagos végpontokban később ismertetett antitest-kombinációk). A makrofágok kettős festése közvetett fagocitózist eredményez (ha a makrofág fagocitálja a CFSE+ sejteket, akkor az anti-CD11b-PE antitest mellett ezt a festést is elnyeri).

Végül a donorból származó makrofágokat izolálják a megmaradt perifériás vérből származó PBMC-ből, amely az egészséges donorok vérlemezkefereziséhez használt körön belül maradt. Valójában ennek a körnek a tartályában található visszamaradt vér (majdnem 15 ml), amelyet az eljárás után általában szemétbe helyeznek. Az adományozók tájékozott beleegyezést írnak alá a megmaradt anyagok kutatási célokra, és különösen a projekthez való felhasználásához.