"Eet me niet"-signaal bij hematologische maligniteiten: CD24 als nieuw doelwit om de immuniteit tegen kanker te verbeteren.

MCL is een agressieve B-NHL met een sombere prognose met een hoge kans op terugval na conventioneel immunochemotherapeutisch regime. CLL is in plaats daarvan een ongeneeslijke chronische B-cel maligniteit met een grotere kans op terugval na verschillende lijnen van conventionele therapieën en een niet te verwaarlozen risico op progressie naar een agressief lymfoom. Verdere benaderingen zijn nodig om geldige alternatieven te bieden voor deze recidiverende en refractaire ziekten. In deze twee situaties is bekend dat TME betrokken is bij de overleving van kankercellen en dat het een negatieve invloed heeft op de doeltreffendheid van de standaardbehandeling en de adoptieve T-celimmuniteit, waarvoor nieuwe immunotherapeutische middelen een alternatieve benadering zouden kunnen zijn in geval van slechte prognostische omstandigheden. Binnen TME is TAM betrokken bij het verbeteren van de overleving van tumorgroei in MCL en CLL, en het dempen van immunotherapie. Anti-CD47 mAb bleek een consistente DEM te zijn die, eenmaal geblokkeerd, fagocytose en klaring van tumorcellen bij bloedkanker kan verbeteren. CD24 is onlangs gevalideerd als een ander DEM in preklinische analyse bij solide kanker. Aangezien CD24 tot expressie wordt gebracht tijdens de vroege fase van B-celdifferentiatie, zouden MCL en CLL kunnen profiteren van de blokkade van dit signaal, aangezien TAM en NCL's strikt onderling verbonden zijn met hun corresponderende tumorcellen, waardoor tumorcelproliferatie en immuunontsnapping mogelijk is.

Om aan de doelstellingen van dit project te voldoen, zullen er routinematige verzamelingen van overgebleven patiënt-afkomstige monsters worden uitgevoerd op het moment van diagnose en op het moment van terugval van de ziekte, in dit laatste geval met als doel elk CD24-, CD47- en CD20-oppervlak te controleren expressiemodificatie op B-celblasten (bijv. kloonselectie met CD24/CD47-upregulatie na conventioneel regime), SIRP-α- en Siglec-10-expressie op van de patiënt afkomstig monocyt/macrofaagsysteem (dat hogere niveaus van DEM-liganden tot expressie brengt als mogelijk resistentiemechanisme na conventionele therapie).

Bovendien zullen fagocytose-assays met monsters verkregen op het moment van terugval worden vergeleken met de equivalente experimenten uitgevoerd met de monsters verzameld op het moment van diagnose om eventuele verschillen te evalueren.

Zoals eerder beschreven, zal fagocytose-analyse gebaseerd zijn op een co-kweekproces waarbij het anti-CD24-antilichaam wordt gebruikt (alleen of in combinatie met andere antilichamen beschreven in het secundaire eindpunt) en wordt geïncubeerd met macrofagen (van een gezonde donor of van een patiënt). en patiëntentumorcellen (MCL of CLL), deze laatste gelabeld met een fluorescerende stof (d.w.z. CFSE). Macrofaagkleuring (met anti-CD11b-PE-antilichaam) en daaropvolgende flowcytometrische analyse zullen worden uitgevoerd: de verhouding tussen dubbelgekleurde macrofagen (CD11b-PE+/CFSE+) en enkelgekleurde macrofagen (CD11b-PE+) zal de entiteit van fagocytose opleveren, die zal worden vergeleken met de negatieve controle en de andere experimentele omstandigheden (combinaties van antilichamen die verderop in de secundaire eindpunten worden beschreven). De dubbele kleuring van macrofagen zorgt voor indirecte resultaten van fagocytose (als de macrofaag CFSE+-cellen fagocyteert, zal hij deze kleuring ook krijgen naast die vanwege het anti-CD11b-PE-antilichaam).

Ten slotte zullen donor-afgeleide macrofagen worden geïsoleerd uit PBMC verkregen uit overgebleven perifeer bloed dat achterbleef in het circuit dat wordt gebruikt voor bloedplaatjesferese van gezonde donoren. In het reservoir van dit circuit dat normaal gesproken na de ingreep wordt weggegooid, bevindt zich trouwens nog restbloed (bijna 15 ml). Donateurs tekenen geïnformeerde toestemming voor gebruik van overgebleven materiaal voor onderzoeksdoeleinden en dit project in het bijzonder.