"Ikke spis meg"-signal i hematologiske maligniteter: CD24 som nytt mål for å forbedre immuniteten mot kreft.

MCL er en aggressiv B-NHL med dyster prognose med høy sannsynlighet for tilbakefall etter konvensjonell immunkjemoterapeutisk regime. KLL er i stedet en uhelbredelig kronisk B-celle malignitet med høyere sannsynlighet for tilbakefall etter flere linjer med konvensjonelle terapier og en ikke ubetydelig risiko for progresjon til et aggressivt lymfom. Ytterligere tilnærminger er nødvendige for å gi gyldige alternativer for disse tilbakefallende og refraktære sykdommene. I disse to miljøene er TME kjent for å være involvert i kreftcelleoverlevelse og gir en negativ innvirkning på standard behandlingseffektivitet og adoptiv T-celleimmunitet, for hvilke nye immunterapeutiske midler kan være en alternativ tilnærming i tilfelle dårlige prognostiske innstillinger. Innen TME er TAM involvert i å forbedre overlevelse av tumorvekst i MCL og CLL, og demper også immunterapi. Anti-CD47 mAb viste seg å være en konsistent DEM som, når den er blokkert, er i stand til å forbedre fagocytose og clearance av tumorceller i blodkreft. CD24 har nylig blitt validert som en annen DEM i preklinisk analyse ved solid kreft. Siden CD24 uttrykkes under tidlig fase av B-celledifferensiering, kan MCL og CLL dra fordel av blokkeringen av dette signalet, siden TAM og NCL er strengt forbundet med deres tilsvarende tumorceller, noe som gir tumorcelleproliferasjon og immunflukt.

For å oppfylle formålet med dette prosjektet, vil innsamling av gjenværende pasientavledede prøver utføres rutinemessig på tidspunktet for diagnose og på tidspunktet for tilbakefall av sykdommen, i sistnevnte tilfelle med sikte på å kontrollere eventuelle CD24, CD47 og CD20 overflater. ekspresjonsmodifikasjon på B-celle-blaster (f.eks. kloneseleksjon med CD24/CD47-oppregulering etter konvensjonelt regime), SIRP-α og Siglec-10-ekspresjon på pasientavledet Monocyte/Macrophage-system (som uttrykker høyere nivåer av DEMs-ligander som potensiell resistensmekanisme etter konvensjonell terapi).

Videre vil fagocytoseanalyser med prøver oppnådd på tilbakefallstidspunktet bli sammenlignet med tilsvarende eksperimenter utført med prøvene samlet på diagnosetidspunktet for å evaluere eventuelle potensielle forskjeller.

Som tidligere beskrevet vil fagocytoseanalyse være basert på en samkulturprosess som involverer bruk av anti-CD24-antistoffet (alene eller i kombinasjon med andre antistoffer beskrevet i det sekundære endepunktet) inkubering med makrofager (fra frisk donor eller fra pasient) og pasienttumorceller (MCL eller CLL), sistnevnte merket med et fluorescerende stoff (dvs. CFSE). Makrofagfarging (med anti-CD11b-PE-antistoff) og påfølgende flowcytometrisk analyse vil bli utført: forholdet mellom dobbeltfargede makrofager (CD11b-PE+/CFSE+) og enkeltfargede makrofager (CD11b-PE+) vil gi entiteten fagocytose, som vil bli sammenlignet med den negative kontrollen og de andre eksperimentelle betingelsene (antistoffkombinasjoner beskrevet senere i de sekundære endepunktene). Den doble fargingen av makrofager gir indirekte resultater av fagocytose (hvis makrofagen fagocytter CFSE+-celler, vil den også få denne fargingen i tillegg til den som skyldes anti-CD11b-PE-antistoffet).

Til slutt vil donoravledede makrofager bli isolert fra PBMC oppnådd fra perifert blod som ble igjen i kretsen som ble brukt til blodplateferese hos friske givere. Faktisk kan gjenværende blod (nesten 15 ml) finnes i reservoaret til denne kretsen som normalt kastes etter prosedyren. Givere vil signere informert samtykke for bruk av restmateriale til forskningsformål og dette prosjektet spesielt.