Сигнал «Не ешь меня» при гематологических злокачественных новообразованиях: CD24 как новая мишень для повышения противоракового иммунитета.

МКЛ представляет собой агрессивную В-НХЛ с неблагоприятным прогнозом и высокой вероятностью рецидива после традиционной схемы иммунохимиотерапии. Вместо этого ХЛЛ представляет собой неизлечимое хроническое В-клеточное злокачественное новообразование с более высокой вероятностью рецидива после нескольких линий традиционной терапии и существенным риском прогрессирования в агрессивную лимфому. Необходимы дальнейшие подходы, чтобы предоставить действенные альтернативы этим рецидивирующим и рефрактерным заболеваниям. Известно, что в этих двух условиях TME участвует в выживании раковых клеток и оказывает негативное влияние на эффективность стандартного лечения и адоптивный Т-клеточный иммунитет, для которого новые иммунотерапевтические агенты могут быть альтернативным подходом в случае плохих прогностических условий. В рамках TME TAM участвуют в улучшении выживаемости при росте опухоли при MCL и CLL, а также в ослаблении иммунотерапии. Анти-CD47 mAb оказались устойчивыми DEM, которые после блокировки способны улучшать фагоцитоз и клиренс опухолевых клеток при раке крови. CD24 недавно был одобрен в качестве еще одного DEM в доклиническом анализе при солидном раке. Поскольку CD24 экспрессируется во время ранней фазы дифференцировки В-клеток, MCL и CLL могут воспользоваться блокадой этого сигнала, поскольку TAM и NCL строго взаимосвязаны с соответствующими им опухолевыми клетками, обеспечивая пролиферацию опухолевых клеток и ускользание от иммунного ответа.

Для достижения целей этого проекта сбор оставшихся образцов, полученных от пациентов, будет проводиться в обычном порядке во время диагностики и во время рецидива заболевания, в этом последнем случае с целью проверки любой поверхности CD24, CD47 и CD20. модификация экспрессии на В-клеточных бластах (например, селекция клонов с активацией CD24/CD47 после обычного режима), экспрессия SIRP-α и Siglec-10 на системе моноцитов/макрофагов, полученной от пациента (экспрессия более высоких уровней лигандов DEMs как потенциального механизма устойчивости после традиционной терапии).

Кроме того, анализы фагоцитоза с образцами, полученными во время рецидива, будут сравниваться с эквивалентными экспериментами, проведенными с образцами, собранными во время постановки диагноза, чтобы оценить любые потенциальные различия.

Как описано ранее, анализ фагоцитоза будет основан на процессе совместного культивирования, который включает использование анти-CD24-антитела (отдельно или в сочетании с другими антителами, описанными во вторичной конечной точке), инкубируемого с макрофагами (от здорового донора или от пациента). и опухолевые клетки пациента (MCL или CLL), последние помечены флуоресцентным веществом (например, CFSE). Окрашивание макрофагов (антителом против CD11b-PE) и последующий проточный цитометрический анализ будут выполняться: соотношение между дважды окрашенными макрофагами (CD11b-PE+/CFSE+) и одинарно окрашенными макрофагами (CD11b-PE+) обеспечит сущность фагоцитоза, который будут сравниваться с отрицательным контролем и другими экспериментальными условиями (комбинации антител, описанные ниже во вторичных конечных точках). Двойное окрашивание макрофагов дает косвенные результаты фагоцитоза (если макрофаг фагоцитирует клетки CFSE+, он также приобретет это окрашивание в дополнение к окрашиванию, обусловленному антителом против CD11b-PE).

Наконец, макрофаги донорского происхождения будут выделены из РВМС, полученных из оставшейся периферической крови, оставшейся в контуре, используемом для тромбоцитофереза ​​здоровых доноров. На самом деле в резервуаре этого контура может быть обнаружена остаточная кровь (почти 15 мл), которая обычно удаляется после процедуры. Доноры подпишут информированное согласие на использование оставшегося материала в исследовательских целях и в данном проекте в частности.