Signal "Ne me mangez pas" dans les hémopathies malignes : CD24 comme nouvelle cible pour améliorer l'immunité anticancéreuse.

Le MCL est un B-NHL agressif avec un pronostic sombre avec une forte probabilité de rechute après un schéma immunochimiothérapeutique conventionnel. La LLC est plutôt une tumeur maligne chronique incurable à cellules B avec une probabilité plus élevée de rechute après plusieurs lignes de thérapies conventionnelles et un risque non négligeable de progression vers un lymphome agressif. D'autres approches sont nécessaires pour fournir des alternatives valables à ces maladies récidivantes et réfractaires. Dans ces deux contextes, le TME est connu pour être impliqué dans la survie des cellules cancéreuses et confère un impact négatif sur l'efficacité des traitements standards et l'immunité adoptive des lymphocytes T, pour lesquels de nouveaux agents immunothérapeutiques pourraient être une approche alternative en cas de mauvais pronostic. Au sein de la TME, les TAM sont impliquées dans l'amélioration de la survie de la croissance tumorale dans le MCL et la LLC, en atténuant également l'immunothérapie. Le mAb anti-CD47 s'est avéré être un DEM cohérent qui, une fois bloqué, est capable d'améliorer la phagocytose et la clairance des cellules tumorales dans le cancer du sang. Le CD24 a récemment été validé comme un autre DEM dans l'analyse préclinique du cancer solide. Étant donné que CD24 est exprimé au cours de la phase précoce de la différenciation des lymphocytes B, MCL et CLL pourraient tirer parti du blocage de ce signal, puisque TAM et NCL sont strictement interconnectés avec leurs cellules tumorales correspondantes, assurant la prolifération des cellules tumorales et l'évasion immunitaire.

Pour atteindre les objectifs de ce projet, la collecte d'échantillons restants provenant de patients sera effectuée de manière routinière au moment du diagnostic et au moment de la rechute de la maladie, dans ce dernier cas dans le but de vérifier toute surface CD24, CD47 et CD20. modification de l'expression sur les blastes de lymphocytes B (par exemple, sélection de clones avec régulation à la hausse de CD24/CD47 après un régime conventionnel), expression de SIRP-α et Siglec-10 sur le système monocyte/macrophage dérivé du patient (exprimant des niveaux plus élevés de ligands DEM comme mécanisme potentiel de résistance après un traitement conventionnel).

De plus, les tests de phagocytose avec des échantillons obtenus au moment de la rechute seront comparés aux expériences équivalentes réalisées avec les échantillons prélevés au moment du diagnostic pour évaluer les éventuelles différences.

Comme décrit précédemment, l'analyse de la phagocytose sera basée sur un processus de co-culture qui implique l'utilisation de l'anticorps anti-CD24 (seul ou en combinaison avec d'autres anticorps décrits dans le critère secondaire) en incubation avec des macrophages (de donneur sain ou de patient) et les cellules tumorales du patient (MCL ou CLL), ces dernières marquées avec une substance fluorescente (c'est-à-dire CFSE). Une coloration des macrophages (avec un anticorps anti-CD11b-PE) et une analyse ultérieure par cytométrie en flux seront effectuées : le rapport entre les macrophages à double coloration (CD11b-PE+/CFSE+) et les macrophages à coloration unique (CD11b-PE+) fournira l'entité de la phagocytose, qui seront comparés au témoin négatif et aux autres conditions expérimentales (combinaisons d'anticorps décrites plus loin dans les critères secondaires). La double coloration des macrophages fournit des résultats indirects de phagocytose (si le macrophage phagocyte les cellules CFSE+, il acquerra également cette coloration en plus de celle due à l'anticorps anti-CD11b-PE).

Enfin, les macrophages dérivés de donneurs seront isolés à partir de PBMC obtenus à partir de restes de sang périphérique restés dans le circuit utilisé pour la plaquetthérèse de donneurs sains. En effet, du sang résiduel (près de 15 ml) peut se retrouver dans le réservoir de ce circuit qui est normalement jeté après l'intervention. Les donateurs signeront un consentement éclairé pour l'utilisation du matériel restant à des fins de recherche et de ce projet en particulier.